產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
紅細(xì)胞(Red blood cell,RBC)也稱紅血球,是血液中數(shù)量最多的一種血細(xì)胞,脊椎動(dòng)物體內(nèi)通過RBC運(yùn)送氧氣,RBC同時(shí)還具有免疫功能。在貧血檢查中可通過蔗糖水溶血試驗(yàn)來檢測(cè)紅細(xì)胞膜的缺陷,尤其適用于檢測(cè)陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥(paroxysmalnocturnal hemoglobinuria,PNH),該癥為獲得性紅細(xì)胞膜缺陷引起的慢性血管內(nèi)溶血,常在睡眠時(shí)加重,可伴發(fā)性血紅蛋白尿和全血細(xì)胞減少。
酸溶血定性檢測(cè)試劑盒是利用PNH紅細(xì)胞對(duì)補(bǔ)體敏感性增高,在酸化的血清中經(jīng)過37℃孵育,易溶血,血清經(jīng)過56℃加熱30min,使補(bǔ)體滅活,病人紅細(xì)胞不溶解,該試劑盒主要用于檢測(cè)人、動(dòng)物血液的紅細(xì)胞膜的缺陷,尤其用于鑒定陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。
自備材料:
1、生理鹽水
2、與患者同血型的正常新鮮血液
3、水浴鍋
操作步驟(僅供參考):
1、制備脫纖維血清:取患者和與患者同血型的正常人靜脈血 5ml,慢慢注入含有3個(gè)潔凈玻璃珠的小容器中,立即輕輕的持續(xù)搖動(dòng),直至纖維蛋白出現(xiàn)并附著于玻璃珠上為止(一 般需要 10~15min)。轉(zhuǎn)移脫纖維血至潔凈離心管,低速離心,取上清待用,即為脫纖維血清。
2、制備50%紅細(xì)胞懸液:取脫纖維血清,經(jīng)生理鹽水洗滌3次,每次都應(yīng)顛倒、混勻、離心,盡量吸棄上清液,留下紅細(xì)胞沉淀,加入等體積 PNH NaCl Buffer 重新懸浮紅細(xì)
胞,即為50%紅細(xì)胞懸液。
3、取試管6支,按下表先加入同血型正常人新鮮血清0.5ml,其中 3、6兩支試管在 56℃
水浴30min,使補(bǔ)體滅活,其余4管置于室溫 30min。此后按下表順序操作。
加入物(ml) | 待測(cè)管 | 對(duì)照管 | ||||
試管號(hào) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
正常人新鮮血清 | 0.5 | 0.5 | — | 0.5 | 0.5 | — |
正常人 56℃滅活血清 | — | — | 0.5 | — | — | 0.5 |
Acidic Buffer | — | 0.05 | 0.05 | — | 0.05 | 0.05 |
50%患者紅細(xì)胞懸液 | 0.05 | 0.05 | 0.05 | — | — | — |
50%正常人紅細(xì)胞懸液 | — | — | — | 0.05 | 0.05 | 0.05 |
混勻,置于 37℃水浴中 1h(30min 時(shí)輕輕混勻一次),離心。 | ||||||
陽性結(jié)果(溶血) | ± | 3+ | — | — | — | — |
注意:如果PNH 患者第3管(加正常人滅活血清管)溶血,則說明此溶血不依賴于補(bǔ)體,故不是PNH,可能是紅細(xì)胞有其他缺陷(如球形紅細(xì)胞增多癥),應(yīng)做進(jìn)一步鑒別。
參考區(qū)間:正常人無溶血。
注意事項(xiàng):
1、 所用器具必須潔凈干燥,以免溶血造成假陰性。
2、 血清酸化后應(yīng)注意密閉保存,盡快檢測(cè),避免CO2逸出導(dǎo)致血清酸度降低,影響溶血程度。
3、 如果患者多次輸血,其血液中的不正常細(xì)胞會(huì)相應(yīng)減少,可呈弱陽性或陰性。出現(xiàn)這種情況應(yīng)延長(zhǎng)孵育時(shí)間至 4~6h,再觀察溶血情況。
4、 該實(shí)驗(yàn)可作為PNH的過篩實(shí)驗(yàn),陰性可排除 PNH,陽性應(yīng)做酸化溶血實(shí)驗(yàn)證實(shí)。
有效期:6個(gè)月有效。
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