自身免疫性疾病（Autoimmune Diseases）是一類(lèi)因免疫系統(tǒng)功能紊亂導(dǎo)致的慢性炎癥性疾病，其特征是免疫系統(tǒng)錯(cuò)誤地將自身正常組織識(shí)別為外來(lái)抗原并發(fā)起攻擊。據(jù)統(tǒng)計(jì)，這類(lèi)疾病影響著全球5%-10%的人口，可導(dǎo)致多器官組織損傷和功能障礙。

JAK-STAT信號(hào)通路：

靶向治療的“黃金賽道”

JAK-STAT信號(hào)通路作為細(xì)胞因子介導(dǎo)免疫調(diào)節(jié)的核心通路，其異常激活與多種自身免疫性疾?。ˋID）的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。目前針對(duì)該通路的靶向治療策略主要從三個(gè)層面展開(kāi)：

圖1. Autoimmunity Reviews;Volume 18, Issue 11, November 2019, 102390

1. 細(xì)胞因子受體（上游信號(hào)接收）

細(xì)胞因子受體多為單次跨膜蛋白，其本身不具有激酶活性，需依賴JAK激酶進(jìn)行信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。通過(guò)阻斷細(xì)胞因子與受體的結(jié)合，可以從源頭上抑制JAK-STAT通路的激活。

該靶點(diǎn)藥物以抗體類(lèi)藥物為主，如廣泛應(yīng)用于類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等疾病的TNF-α抑制劑（阿達(dá)木單抗）。

2. JAK激酶（信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)樞紐）

JAK家族包括JAK1、JAK2、JAK3和TYK4四個(gè)成員。當(dāng)受體二聚化后，JAK激酶會(huì)發(fā)生相互磷酸化并激活，進(jìn)而磷酸化下游STAT蛋白。

目前靶向JAK激酶的小分子藥物發(fā)展迅速，其中第二代高選擇性抑制劑（如烏帕替尼）通過(guò)精準(zhǔn)靶向JAK1亞型，顯著降低了藥物毒性。

3. STAT蛋白（轉(zhuǎn)錄調(diào)控執(zhí)行者）

STAT蛋白家族包含STAT1-6七個(gè)成員，其激活過(guò)程為：被JAK磷酸化→形成二聚體→核轉(zhuǎn)位→結(jié)合DNA調(diào)控基因表達(dá)。

針對(duì)STAT蛋白的藥物類(lèi)型豐富，既包括小分子STAT抑制劑（如Stattic），也包含PROTAC降解劑（如SD-36）等新型藥物。

Revvity解決方案：從靶點(diǎn)驗(yàn)證到高效篩選

Revvity的HTRF和Alpha技術(shù)平臺(tái)為自身免疫藥物研發(fā)提供了一套完整的檢測(cè)解決方案，覆蓋從細(xì)胞因子-受體結(jié)合、JAK激酶活性檢測(cè)到STAT蛋白轉(zhuǎn)錄調(diào)控的全流程研究。該平臺(tái)憑借以下突出技術(shù)優(yōu)勢(shì)，已成為藥物早期研發(fā)階段進(jìn)行高通量篩選和靶點(diǎn)驗(yàn)證的關(guān)鍵工具：
1）采用免洗滌的均相檢測(cè)體系，操作簡(jiǎn)便高效；
2）具備飛摩爾級(jí)的超高檢測(cè)靈敏度；
3）支持高通量篩選（HTS）需求；

4）為JAK-STAT等關(guān)鍵信號(hào)通路的機(jī)制研究提供精準(zhǔn)數(shù)據(jù)支持。

1. 靶向表面受體檢測(cè)

以IL-6/IL-6R結(jié)合檢測(cè)為例：采用競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè)體系，可直觀反映抑制劑對(duì)受體結(jié)合的阻斷效果。

圖2. HTRF Human IL-6/IL-6R Binding檢測(cè)原理圖

2. 抑制JAK激酶

如圖所示，所有HTRF KinEASE檢測(cè)都以相同的方式工作。

激酶反應(yīng)：將激酶與試劑盒提供的通用底物及ATP在化合物（存在或不存在）條件下孵育。

檢測(cè)步驟：加入Eu3?和XL665偶聯(lián)物，檢測(cè)緩沖液中的EDTA可終止酶促反應(yīng)。

圖3. HTRF Kinase Assay檢測(cè)原理圖

3. 調(diào)控STAT蛋白

• 檢測(cè)胞內(nèi)STAT蛋白的磷酸化水平，評(píng)估JAK-STAT信號(hào)通路的激活情況。

圖4. HTRF磷酸化蛋白水平檢測(cè)原理圖

• 檢測(cè)胞內(nèi)STAT蛋白的水平，驗(yàn)證靶向降解藥物（如PROTAC）的效果。

圖5. Alpha總蛋白水平檢測(cè)原理圖

結(jié)語(yǔ)：未來(lái)趨勢(shì)與挑戰(zhàn)

隨著對(duì)JAK-STAT信號(hào)通路研究的深入，自身免疫性疾病的治療正邁向更精準(zhǔn)、更高效的靶向時(shí)代。JAK抑制劑等小分子藥物的成功，不僅驗(yàn)證了該通路的治療潛力，也為其他免疫相關(guān)疾病的藥物研發(fā)提供了新思路。

在這一進(jìn)程中，Revvity的高通量篩選與精準(zhǔn)檢測(cè)能力，將持續(xù)加速靶點(diǎn)驗(yàn)證與藥物優(yōu)化，推動(dòng)更多突破性療法從實(shí)驗(yàn)室走向臨床。未來(lái)，多學(xué)科交叉融合、基礎(chǔ)研究與臨床轉(zhuǎn)化的緊密協(xié)作，將進(jìn)一步提升自身免疫性疾病的診療水平，為全球患者帶來(lái)更長(zhǎng)效、更安全的治療選擇。

產(chǎn)品列表

細(xì)胞因子/細(xì)胞因子受體

激酶試劑盒

STAT家族

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推薦瑞孚迪帶有HTRF認(rèn)證和Alpha技術(shù)的VICTOR Nivo和 EnVision Nexus。

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