一、背景

兔血清是采用健康兔的血液為原料，經(jīng)無菌采集、分離、微孔過濾后制成的一種生物試劑。它的主要成分為血漿中除去纖維蛋白后分離出的淡黃色透明液體，具有維持血液的正常粘度、酸堿度、滲透壓等作用。兔血清的性狀為澄清液體，無噬菌體，內(nèi)毒素低，無溶血、無異物、無菌、無支原體等，因此，它被廣泛用于生化相關(guān)科研試驗。

二、特點

兔血清對兔來源的細胞在增殖性能和凍存存活率方面均優(yōu)于胎牛血清,適宜兔源組織的培養(yǎng)。

三、使用方法

使用時，用PBS（0.01mol/LpH7.2-7.4）將封閉血清原液稀釋10或20倍，配成10%或者5%的工作液，直接滴加在組織切片或者細胞涂片上，37℃度孵育10-30分鐘，清除血清，勿洗，滴加適當比例稀釋的一抗工作液，37℃孵育1-2h或4℃過夜。

四、作用

兔血清的主要作用是提供有利于細胞生長增殖所需的各種生長因子和激素。生長因子包括胰島素，胰島素樣生長因子，表皮生長因子，成纖維細胞生長因子，血小板衍生生長因子等。

五、具體來說，兔血清在多個領(lǐng)域有重要應用

1、細胞培養(yǎng)：兔血清可以作為細胞培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基成分，為細胞提供必要的營養(yǎng)和生長因子，促進細胞的生長和增殖。

2、免疫學實驗：兔血清可用于制備抗體、抗原等免疫學試劑，以及用于免疫沉淀、免疫熒光等實驗，有助于研究免疫系統(tǒng)的功能和機制。

3、生物化學實驗：在生物化學實驗中，兔血清可用于酶活性測定、蛋白質(zhì)定量、核酸分析等，幫助科研人員了解生物體內(nèi)的生物化學過程和機制。

4、藥理學和毒理學實驗：兔血清也可用于藥物代謝、藥物動力學等藥理學實驗，以及用于檢測毒物對生物體的影響，如毒性、致畸性等。

兔血清的儲存條件通常為-15℃～-20℃，有效期一般為五年。為確保其質(zhì)量和穩(wěn)定性，在使用過程中應遵循相關(guān)操作規(guī)程和注意事項。

需要注意的是，不同來源的兔血清可能存在差異，因此在選擇和使用兔血清時需要根據(jù)實驗需求進行選擇和優(yōu)化。此外，由于兔血清中含有多種成分，可能會對某些細胞產(chǎn)生不良影響，因此在使用時需要謹慎評估其對細胞的影響。

六、應用

兔血清可以用于針刀療法對膝骨關(guān)節(jié)炎模型兔血清中MMP-3和MMP-13濃度的影響：

觀察針刀治療后KOA模型兔血清中MMP-3和MMP-13濃度的變化,進而初步探討針刀療法治療膝骨關(guān)節(jié)炎的作用機制。研究目的大量臨床研究顯示針刀療法是有效治療膝骨關(guān)節(jié)炎的方法之一,本研究通過觀察針刀治療后膝骨關(guān)節(jié)炎兔模型血清中MMP-3和MMP-13含量變化的影響,以初步探討MMPs與骨關(guān)節(jié)炎的關(guān)系,從而闡述針刀療法治療膝骨關(guān)節(jié)炎的作用機制,為針刀松解法治療膝骨關(guān)節(jié)炎的臨床應用提供實驗依據(jù)。

研究方法將48只健康清潔6月齡新西蘭家兔(雌雄各半,體重2.25±0.1kg)隨機分為4組,每組各12只,四組分別為空白組、模型組、針刀組和電針組。空白組不參加造模,其余三組采用左后肢伸直位固定制動法制備實驗性膝骨關(guān)節(jié)炎家兔模型。模型組不進行干預,針刀組每周干預治療1次,電針組每周干預3次,兩組均干預3周。干預結(jié)束3周后,采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測模型兔血清中MMP-3和MMP-13的濃度,分析針刀松解法對血清中MMPs含量的影響。研究結(jié)果在針刀和電針治療前和治療后,分別對模型組、針刀組和電針組實驗兔用改良Lequesne MG評估方法進行行為學觀察。

結(jié)果顯示治療前3組行為學評分值沒有顯著差異(P>0.05),治療后,針刀組、電針組與模型組相比分值明顯下降,差異顯著,具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。ELISA檢測兔KOA血清中MMP-3、MMP-13水平的結(jié)果表明：模型組血清中MMP-3、MMP-13含量明顯增加,與其它組相比差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；針刀組血清中MMP-3、MMP-13含量顯著降低,與模型組及電針組相比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

研究結(jié)論針刀療法能夠降低膝骨關(guān)節(jié)炎模型兔血清中MMP-3和MMP-13的濃度,因此針刀療法能減少軟骨細胞外基質(zhì)的降解,抑制關(guān)節(jié)軟骨的破壞,控制軟骨的退行性改變,達到改善膝骨關(guān)節(jié)炎的癥狀、治療KOA的作用。

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