前言：

注射劑疫苗作為預(yù)防傳染病的核心手段，其無菌質(zhì)量直接關(guān)乎公眾健康與全球公共衛(wèi)生安全。隨著新型疫苗（如mRNA疫苗、病毒載體疫苗）的技術(shù)迭代與2025版《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（GMP）》無菌附錄的實(shí)施，無菌防護(hù)已從“經(jīng)驗(yàn)性控制”升級(jí)為“科學(xué)性防控”，對(duì)生產(chǎn)過程的全鏈條微生物污染控制提出了更高要求，對(duì)我們的更是一種大跨度的挑戰(zhàn)。

本文關(guān)鍵詞；2025GMP、注射劑疫苗、凍干疫苗、mRNA疫苗、病毒載體疫苗、微生物、微生物控制、無菌車間、潔凈區(qū)消毒、潔凈區(qū)消毒方式、微生物限度、微生物菌落控制、潔凈區(qū)殺孢子劑、潔凈區(qū)、控制區(qū)、潔凈區(qū)消毒滅菌、無菌室、醫(yī)藥、殺孢子劑、工廠潔凈室微生物控制、生物工程GMP車間、芽孢、腐蝕性、空氣物表消毒、一站式消毒滅菌解決方案、技術(shù)咨詢服務(wù)。

一、潔凈環(huán)境：從硬件標(biāo)準(zhǔn)到動(dòng)態(tài)控制

（一）潔凈區(qū)分級(jí)與氣流屏障構(gòu)建

1.分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)：嚴(yán)格遵循ISO 14644與《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》，將核心區(qū)域劃分為：

- 核心（靜態(tài)/動(dòng)態(tài)ISO 5級(jí)）：灌裝、分裝、凍干加塞等關(guān)鍵操作區(qū)，采用層流罩或隔離器系統(tǒng)，確保顆粒物≤3520個(gè)/m3（≥0.5μm），微生物≤1 CFU/4小時(shí)（沉降菌）；

- B級(jí)（ISO 7級(jí)）：核心區(qū)背景環(huán)境，采用湍流流型，顆粒物≤352,000/m3，微生物≤50 CFU/4h；

- C/D級(jí)：輔助區(qū)域（如稱量、洗瓶），通過壓差梯度（≥10Pa，內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)若高，按照內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)）防止污染逆流。

2. 氣流優(yōu)化：

- 采用“垂直層流+水平層流”組合設(shè)計(jì)，核心層流罩與灌裝機(jī)形成封閉微環(huán)境，避免人員動(dòng)作產(chǎn)生的紊流影響；

- 凍干機(jī)、滅菌柜等設(shè)備設(shè)置獨(dú)立排風(fēng)系統(tǒng)，排氣經(jīng)除菌過濾器，防止殘留蒸汽攜帶微生物擴(kuò)散。

（三）建筑與設(shè)備材質(zhì)無菌化

1.表面材質(zhì)：

- 墻面/地面使用無縫環(huán)氧樹脂，陰陽角做圓弧處理，避免積塵。

- 設(shè)備采用316L不銹鋼（拋光至國家標(biāo)準(zhǔn)，內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)為主，不可劣于國家標(biāo)準(zhǔn)），管道連接使用衛(wèi)生級(jí)卡箍（避免螺紋接口），減少生物膜滋生風(fēng)險(xiǎn)。

2.照明與監(jiān)控：

- 潔凈區(qū)照度≥300lux，采用嵌入式LED燈（國家標(biāo)準(zhǔn)要求無積塵設(shè)計(jì)）；

- 部署AI視覺監(jiān)控系統(tǒng)，自動(dòng)識(shí)別人員違規(guī)動(dòng)作（如未戴手套接觸設(shè)備、劇烈走動(dòng)產(chǎn)塵），并聯(lián)動(dòng)門禁系統(tǒng)限制進(jìn)入（核心區(qū)域存在不得同時(shí)超過4人）。

二、消毒滅菌：全場(chǎng)景覆蓋的技術(shù)矩陣

(一）空間與環(huán)境消毒

1.終末滅菌（周期性）：

- 汽化過氧化氫（VHP）：B級(jí)潔凈區(qū)、隔離器、傳遞窗使用奧克泰士（過氧化氫+銀離子復(fù)合配方）冷干霧化處理，濃度維持在一定區(qū)間，作用90分鐘，芽孢殺滅率≥10^-6（采用嗜熱脂肪芽孢桿菌舉例），相比傳統(tǒng)VHP效率提升30%，且對(duì)電子元件腐蝕性降低70%；

- 干霧滅菌：對(duì)無法耐受濕熱的設(shè)備（如伺服電機(jī)、傳感器），采用奧克泰士冷干霧霧化處理，30分鐘內(nèi)殺滅表面真菌孢子（如黑曲霉）。

2.日常清潔（動(dòng)態(tài)）：

- 核心區(qū)：每班次結(jié)束（主清潔后滅菌）用奧克泰士溶液擦拭設(shè)備表面（如灌裝針頭、軋蓋機(jī)），搭配無菌聚酯纖維擦拭布（國家標(biāo)準(zhǔn)要求落絮≤5個(gè)/100cm2）；

- B/C級(jí)區(qū)：每規(guī)定日期用奧克泰士霧化消毒，降低環(huán)境微生物負(fù)荷，維持環(huán)境潔凈度，減少爆發(fā)隱患。

（二）設(shè)備與物料滅菌

1.在線清洗/滅菌（CIP/SIP）：

- 生物反應(yīng)器：CIP流程為80℃純化水沖洗→奧克泰士循環(huán)30分鐘→無菌水沖洗，SIP采用121℃濕熱滅菌30分鐘，驗(yàn)證溫度均一性（要求偏差±1℃）；

- 除菌過濾器：使用前進(jìn)行完整性測(cè)試（泡點(diǎn)法，壓力偏差≤5%），過濾后用奧克泰士浸泡（防止濾芯表面細(xì)菌再生，如假單胞菌清除率≥99.9%）。

2.物料處理：

- 液體原料：經(jīng)0.22μm除菌級(jí)濾芯過濾（如疫苗抗原溶液），過濾前后檢測(cè)粒徑分布（激光粒度儀，變異系數(shù)≤10%）；

- 固體原料/包裝材料：西林瓶/膠塞通過隧道式滅菌柜（300℃干熱滅菌45分鐘），并在層流保護(hù)下傳輸，膠塞硅化前用奧克泰士噴霧消毒（霉菌孢子負(fù)載從50CFU/個(gè)降至<5CFU/個(gè)）。

（三）人員與物料管控

1.人員管理：

- 更衣驗(yàn)證：進(jìn)入核心區(qū)需經(jīng)過三級(jí)更衣，每級(jí)更衣間設(shè)風(fēng)速監(jiān)測(cè)，穿戴后進(jìn)行“塵埃測(cè)試”（粘性滾筒粘貼全身，落絮≤10/次），手套表面微生物≤ 5 CFU/雙（接觸碟法）；

- 培訓(xùn)與監(jiān)測(cè)：每月進(jìn)行微生物攜帶檢測(cè)（手指、口罩內(nèi)側(cè)采樣），重點(diǎn)監(jiān)控金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌，超標(biāo)人員強(qiáng)制重新培訓(xùn)及更衣。

2.物料傳遞：

- 傳遞窗采用雙門互鎖+紫外線照射+奧克泰士噴霧雙重消毒，物料在外側(cè)預(yù)處理后，經(jīng)層流傳遞窗進(jìn)入核心區(qū)；

- 一次性耗材（如無菌手套、擦拭布）需通過生物相容性測(cè)試細(xì)胞毒性、內(nèi)毒素，并在滅菌后4小時(shí)內(nèi)使用（內(nèi)部延長(zhǎng)保存時(shí)間要放到專用潔凈袋）。

三、關(guān)鍵工藝：從灌裝到凍干的精準(zhǔn)控制

（一） 灌裝工藝

1. 設(shè)備選型：采用伺服驅(qū)動(dòng)灌裝泵，針頭設(shè)計(jì)為“鈍針+斜切面”（減少液滴殘留），并在針頭上方設(shè)層流保護(hù)（風(fēng)速0.5m/s，內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)為準(zhǔn)則）；

2. 過程控制：灌裝速度與軋蓋機(jī)同步，避免瓶口暴露時(shí)間過長(zhǎng)，每班次開始前進(jìn)行“空機(jī)運(yùn)行驗(yàn)證”（檢測(cè)灌裝量波動(dòng)≤1%，漏液率≤0.01%）。

（二）凍干工藝

1. 凍干機(jī)性能：擱板溫度均勻性≤±0.5℃，真空度維持在標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)通過DSC差示掃描量熱法測(cè)定物料共晶點(diǎn)，升溫速率控制在標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)，防止“噴瓶”；

2. 無菌保障：凍干結(jié)束后充入無菌氮?dú)?，并?duì)凍干機(jī)腔體進(jìn)行奧克泰士熏蒸（適合濃度，作用60分鐘，延長(zhǎng)或縮短應(yīng)對(duì)應(yīng)產(chǎn)品），防止開門時(shí)外界濕氣帶入導(dǎo)致微生物滋生。

（三）一次性技術(shù)應(yīng)用

1. 優(yōu)勢(shì)：采用一次性生物反應(yīng)袋無菌灌裝管路，避免交叉污染，使用后整體丟棄，減少清潔驗(yàn)證工作量（干預(yù)可以采取，避免隱患）；

2. 驗(yàn)證要點(diǎn)：一次性耗材需通過E&L測(cè)試，確保析出物不影響疫苗質(zhì)量（如金屬離子≤1ppm，有機(jī)污染物≤10ppm）。

四、監(jiān)測(cè)與驗(yàn)證：從實(shí)時(shí)監(jiān)控到數(shù)據(jù)閉環(huán)

（一）環(huán)境監(jiān)測(cè)系統(tǒng)（EMS）

1. 在線監(jiān)測(cè)參數(shù)：

- 物理參數(shù)：粒子計(jì)數(shù)器（核心區(qū)實(shí)時(shí)連續(xù)監(jiān)測(cè)，報(bào)警閾值3520個(gè)/m3和20個(gè)/m3）、溫濕度（20-24℃，45-60%RH）、壓差（波動(dòng)超過±2Pa觸發(fā)聲光報(bào)警），報(bào)警閾值、溫濕度、壓差偏差按照內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)，不超國家規(guī)定范圍；

- 微生物參數(shù)：浮游菌采樣器（流量100L/min，核心區(qū)每4小時(shí)一次）、沉降菌碟（直徑90mm，暴露4小時(shí)，B級(jí)區(qū)每周一次）、表面接觸碟（55cm2，設(shè)備表面每班次一次），按照內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施，內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)不低于國家標(biāo)準(zhǔn)。

2. 數(shù)據(jù)管理：

- 采用PLC系統(tǒng)整合所有監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)，通過分析趨勢(shì)（如粒子數(shù)連續(xù)30分鐘上升10%自動(dòng)預(yù)警），數(shù)據(jù)存儲(chǔ)符合標(biāo)準(zhǔn)原則（可追溯、長(zhǎng)期保存）；

- 每月生成《潔凈區(qū)微生物趨勢(shì)分析報(bào)告》，識(shí)別污染熱點(diǎn)（如灌裝機(jī)轉(zhuǎn)盤區(qū)域微生物檢出率偏高，針對(duì)性增加消毒頻率）。

（二）滅菌驗(yàn)證與偏差處理

1.驗(yàn)證項(xiàng)目：

- 生物指示劑（BI）挑戰(zhàn)：在VHP滅菌柜、隧道烘箱中放置嗜熱脂肪芽孢桿菌芽孢條（10^6 CFU/條），驗(yàn)證殺滅率≥10^6；

- 清潔驗(yàn)證：設(shè)定殘留限度（如疫苗抗原≤10ppm），采用棉簽擦拭法+HPLC檢測(cè)，設(shè)備表面微生物≤10CFU/100cm2。

2.偏差響應(yīng)：

- 若核心區(qū)沉降菌≥5CFU/4小時(shí)，立即停止生產(chǎn)，啟動(dòng)“三查”流程（人員操作記錄、設(shè)備運(yùn)行參數(shù)、環(huán)境監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)），并對(duì)該區(qū)域進(jìn)行奧克泰士強(qiáng)化消毒；

- 污染批次隔離：對(duì)污染發(fā)生前后30分鐘生產(chǎn)的產(chǎn)品增加檢測(cè)項(xiàng)目（如無菌檢查延長(zhǎng)至14天，支原體PCR檢測(cè)），經(jīng)質(zhì)量授權(quán)人批準(zhǔn)后方可放行。

五、合規(guī)性與技術(shù)賦能

（一）國際法規(guī)對(duì)標(biāo)

- 2025版GMP無菌附錄：落實(shí)“污染控制策略（CCS）”，將奧克泰士消毒頻率、濃度等參數(shù)納入風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，例如B級(jí)區(qū)人員密集區(qū)域消毒頻次從每日1次增加至2次；

- EU GMP Annex 1修訂版：符合“動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)”要求，在核心區(qū)操作人員需穿戴滅菌手套（雙層）+頭套全覆蓋，用奧克泰士消毒，記錄與人員進(jìn)出記錄聯(lián)動(dòng)，確保數(shù)據(jù)完整性。

（二）新興技術(shù)應(yīng)用

- 數(shù)字孿生模擬：通過模擬潔凈區(qū)氣流，優(yōu)化層流罩位置，減少滅菌盲區(qū)；

- 機(jī)器人自動(dòng)化：引入無菌機(jī)器人，執(zhí)行高風(fēng)險(xiǎn)操作（西林瓶上料、軋蓋），機(jī)器人表面涂覆抗生物膜涂層（結(jié)合奧克泰士消毒，生物膜形成量減少70%）；

- 區(qū)塊鏈存證：將消毒記錄、環(huán)境監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)上鏈，確保不可篡改，滿足FDA對(duì)數(shù)據(jù)完整性（DI）的嚴(yán)苛要求。

六.奧克泰士殺孢子劑優(yōu)勢(shì)：

l 符合2025GMP要求，符合新規(guī)理念，對(duì)注射劑/凍干疫苗系統(tǒng)設(shè)備友好，不影響設(shè)備精密準(zhǔn)確性。

l 無殘留、無毒衍生物、對(duì)人體健康無害，不影響設(shè)備元件、藥品API、包材、輔料穩(wěn)定性。

l 良好的材料兼容性，可以長(zhǎng)期規(guī)劃使用。

l 滅菌效率無差異，其主要成分是過氧化氫與銀離子，使用后能夠分解為水和氧氣，不需要后續(xù)沖洗。

l 滅菌效期長(zhǎng)，滿足生產(chǎn)批次生產(chǎn)時(shí)間，確保流程正常進(jìn)行，進(jìn)一步保證了生產(chǎn)效率。

針對(duì)新規(guī)推進(jìn)，面對(duì)注射劑/凍干隱患微生物，非終端滅菌問題，建議采用奧克泰士產(chǎn)品！為生產(chǎn)環(huán)境穩(wěn)定、工作效率、微生物控制保駕護(hù)航！我們也將竭誠為您提供專業(yè)技術(shù)服務(wù)：

（1）根據(jù)客戶需求，指導(dǎo)和協(xié)助客戶建立和完善系統(tǒng)化殘留溶劑、微生物檢驗(yàn)體系，包括采樣計(jì)劃、預(yù)防性消毒程序等工作。

（2）指導(dǎo)和協(xié)助客戶對(duì)實(shí)際生產(chǎn)過程中微生物污染進(jìn)行分析查。

（3）對(duì)各類微生物污染問題提供針對(duì)性解決方案，指導(dǎo)和協(xié)助客戶執(zhí)行方案直至解決微生物污染問題，提供閉合鏈條式服務(wù)。

（4）提供后續(xù)管控方案，防范微生物污染的再次發(fā)生。

（5）對(duì)客戶現(xiàn)用消毒產(chǎn)品/方式的驗(yàn)證評(píng)估提供技術(shù)建議。

（6）根據(jù)客戶需求，對(duì)客戶員工進(jìn)行微生物學(xué)和消毒學(xué)方面的技術(shù)培訓(xùn)。