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            產品星推薦|關于間充質干細胞三系誘導染色分析

            來源:北京索萊寶科技有限公司   2025年04月16日 09:23  

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            關于間充質

            干細胞三系誘導染色分析

             

            一、MSC三系誘導基本介紹

            干細胞,又稱“萬能細胞”,是一種未充分分化、尚不成熟的細胞,在適當條件下,具有再生各種組織、器官的潛能,因此被寄予厚望,干細胞研究也多次進入國自然研究熱點排行榜。間充質干細胞(MSC)具有多向分化的潛能,體外在一定條件下可以誘導分化為脂肪細胞、成骨細胞、成軟骨細胞,2006年國際細胞治療協(xié)會(ISCT)確定此三項檢測指標是MSC鑒定的必檢項目,MSC的三系誘導在生物醫(yī)藥領域一直深受各位科研人員的青睞和應用。

            二、MSC三系分化檢測手段

            “成脂分化”

            間充質干細胞成脂分化有兩個階段,先是MSC分化為脂肪前體細胞,接著在特定的細胞刺激影響下(如C/EBPs和PPAR-γ)最終分化為脂肪細胞,出現(xiàn)脂肪細胞中顯著的標志物(脂肪滴)。對于脂滴染色,經常采用油紅O染色方法對脂滴進行染色,其原理為油紅O可進入脂滴與其特異性結合將其染成紅色。我司有多款油紅O染色試劑盒,分別適配于組織和細胞樣本,用于細胞染色常推薦G1262,染色后結果可通過圖像處理軟件進行分析,如果想用于后續(xù)定量分析,可以染色后用無水異丙醇或乙醇浸泡細胞3-5min進行顏色提取,用離心管收集溶出的溶液,分取1ml稀釋一定倍數(shù)進行紫外分光光度法測量520nm處的OD值。除此之外我們還擁有熒光法試劑盒(內含核染料)用于脂滴染色,結果對比清晰,染色靈敏。

            染色示例

            相關產品

            貨號

            名稱

            規(guī)格

            G1260

            飽和油紅O染色液

            100ml/

            500ml

            G1261

            改良油紅O染色試劑盒

            2*50ml/

            2*100ml

            G1262

            油紅O染色試劑盒

            (細胞專用)HOT

            4*20ml/

            4*50ml

            G1263

            改良油紅O染色試劑盒

            (環(huán)保型)

            4*50ml

            G1264

            脂質熒光染色試劑盒

            (尼羅紅法)HOT

            2*50ml

            G1265

            糊精水溶液(1%)

            100ml

             

            “成骨分化”

            MSC成骨分化分為兩個時期,誘導初期會有堿性磷酸酶(ALP)的高度表達,作為成骨細胞分化成熟的早期標志,可通過固藍染色來鑒別。誘導后期,成熟的成骨細胞表達ECM鈣化相關蛋白,長時間的成骨誘導使鈣離子以鈣鹽方式沉淀下來,形成“骨結節(jié)”。骨結節(jié)可通過茜素紅S染色(茜素紅和鈣發(fā)生顯色反應),把外面沉積的鈣結節(jié)染成深紅色,通過著色物面積和深淺來表示成骨分化的強弱。

            對于茜素紅染色,我們2024年上新了可以提取鈣鹽染色的輔助試劑-CPC(G1453),以及染色劑+提取劑的試劑盒套裝(G3283),在完成茜素紅染色后,加入提取試劑室溫孵育15-30min使茜素紅染色充分溶解,用離心管收集溶出的溶液,分取100ul或200ul置于96孔板條內用酶標儀測量560nm處的OD值,從而半定量鈣鹽含量。

            染色示例

            相關產品

            貨號

            名稱

            規(guī)格

            分類

            G1480

            堿性磷酸酶

            染色試劑盒

            (偶氮偶聯(lián)法)HOT

            4*2ml/

            4*10ml/

            4*20ml

            ALP

            染色

            G1481

            堿性磷酸酶

            染色試劑盒

            (改良Gomori鈣鈷法)

            3*50ml

            G1450

            茜素紅S染色液

            (0.2%,pH8.3)

            100ml/

            500ml

            茜素紅染色

            G1452

            茜素紅S染色液

            (1%,pH4.2)HOT

            100ml

            G1453

            茜素紅S染色

            提取試劑

            (CPC,10%)HOT

            100ml

            G3280

            鈣鹽染色試劑盒

            (改良茜素紅S 法)

            3*50ml

            G3281

            鈣鹽染色試劑盒

            (茜素紅S法)

            2*50ml

            G3282

            鈣鹽染色試劑盒

            (Von Kossa法)

            2*50ml

            G3283

            茜素紅S染色

            定量檢測試劑盒

            (CPC法)HOT

            2*20ml/

            2*100ml

             

            “成軟骨分化”

            MSC成軟骨分化可分為兩個時期,首先MSC聚集成團,成團的中間細胞經分裂分化轉變成一種大而圓的細胞,即成軟骨細胞。然后成軟骨細胞繼續(xù)分化產生基質和纖維,不斷交織形成軟骨球狀,可通過阿利新藍來進行鑒別染色,阿利新藍與軟骨基質中的多糖結合,使軟骨細胞和基質呈淺藍色或藍綠色。若想對軟骨含量定量分析,可以使用G1567-阿利新藍染色提取試劑在阿利新藍染色后進行溶解提取顏色,室溫孵育1-2h即可,用離心管收集溶出的溶液,分取100μL或200μL置于96孔板條內用酶標儀測量620nm處的OD值,從而達到半定量軟骨含量目的。

            染色示例

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            貨號

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            規(guī)格

            G1560

            阿利新藍染色試劑盒

            (pH=2.5)HOT

            3*50ml/

            3*100ml

            G1562

            阿利新藍染色液(pH2.5)

            100ml

            G1563

            阿利新藍染色試劑盒

            (pH=1.0)

            3*50ml

            G1565

            阿利新藍染色試劑盒

            (細胞專用)

            2*20ml/

            2*50ml

            G1567

            阿利新藍染色提取試劑HOT

            100ml

            G2541

            軟骨染色試劑盒

            (阿利新藍法,pH1.0)

            2*50ml

            G2542

            軟骨染色試劑盒

            (阿利新藍法,pH2.5)HOT

            2*50ml

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