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            蛋白胨(Peptone)用戶指南

            來源:上海易匯生物科技有限公司   2025年04月17日 19:01  

            蛋白胨(Peptone)用戶指南

            ——微生物培養(yǎng)基核心成分的專業(yè)解析

            一、產(chǎn)品概述

            蛋白胨(Peptone)是一種由動(dòng)物組織(如牛肉、酪蛋白)或植物蛋白(如大豆)經(jīng)酶解或酸水解制備的氮源物質(zhì),廣泛用于微生物培養(yǎng)基的配制。其核心功能包括:

            • 提供氮源:為微生物生長提供氨基酸、多肽及小分子肽類。

            • 促進(jìn)生長:含維生素、礦物質(zhì)等微量成分,加速菌體代謝。

            • 增強(qiáng)適應(yīng)性:不同來源的蛋白胨可優(yōu)化特定菌株的生長環(huán)境。

            二、分類與特性


            類型原料來源適用場景特點(diǎn)
            動(dòng)物源蛋白胨牛肉、豬骨細(xì)菌、真菌培養(yǎng)(如大腸桿菌、酵母)氨基酸組成豐富,含維生素B族
            植物源蛋白胨大豆、小麥乳酸菌、植物內(nèi)生菌培養(yǎng)低過敏原性,適合植物共生菌研究
            酪蛋白胨牛奶酪蛋白分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)(如質(zhì)粒轉(zhuǎn)化)純度高,批次間穩(wěn)定性強(qiáng)
            胰蛋白胨動(dòng)物胰酶水解高要求微生物(如支原體、衣原體)富含支鏈氨基酸,促進(jìn)細(xì)胞膜合成


            三、技術(shù)參數(shù)


            指標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)值檢測方法
            總氮含量≥12.0%凱氏定氮法
            氨基酸含量≥8.0%高效液相色譜法(HPLC)
            灰分≤5.0%灼燒法
            pH值(1%水溶液)6.5-7.5電位滴定法
            溶解性全溶,無沉淀目視觀察


            四、操作指南

            1. 培養(yǎng)基配制

              • 按配方比例稱取蛋白胨(如LB培養(yǎng)基:10 g/L蛋白胨),加入蒸餾水?dāng)嚢枞芙狻?/p>

              • 調(diào)節(jié)pH至目標(biāo)值(如7.0±0.2),121℃高壓滅菌20分鐘。

            2. 無菌操作

              • 滅菌后培養(yǎng)基需在超凈臺內(nèi)分裝,避免二次污染。

              • 固體培養(yǎng)基冷卻至50-55℃時(shí)倒平板,防止冷凝水過多。

            3. 儲(chǔ)存條件

              • 未開封的蛋白胨需密封保存于干燥陰涼處,避免吸潮結(jié)塊。

              • 開封后建議分裝,4℃冷藏保存,有效期6個(gè)月。

            五、應(yīng)用場景

            • 微生物發(fā)酵:作為氮源用于抗生素(如青霉素)、氨基酸(如谷氨酸)的生產(chǎn)。

            • 分子生物學(xué):在LB、SOB等培養(yǎng)基中促進(jìn)質(zhì)粒擴(kuò)增和轉(zhuǎn)化效率。

            • 食品微生物檢測:用于沙門氏菌、金黃色葡萄球菌的分離培養(yǎng)。

            • 環(huán)境科學(xué):研究土壤微生物群落對不同氮源的響應(yīng)。

            六、質(zhì)量驗(yàn)證

            1. 微生物生長測試

              • 在LB培養(yǎng)基中接種大腸桿菌(E. coli),37℃培養(yǎng)12小時(shí)后,菌落直徑應(yīng)≥2 mm。

            2. 氨基酸譜分析

              • 使用HPLC檢測,必需氨基酸(如亮氨酸、異亮氨酸)占比≥30%。

            3. 無菌驗(yàn)證

              • 按《中國藥典》2020版要求,37℃培養(yǎng)7天,無菌生長。

            七、注意事項(xiàng)

            1. 原料溯源

              • 動(dòng)物源蛋白胨需確認(rèn)原料無瘋牛?。˙SE)風(fēng)險(xiǎn),植物源需避免轉(zhuǎn)基因成分。

            2. 批次一致性

              • 長期實(shí)驗(yàn)建議使用同一供應(yīng)商的同一批次產(chǎn)品,減少實(shí)驗(yàn)誤差。

            3. 替代方案

              • 對高成本實(shí)驗(yàn),可嘗試酵母提取物(Yeast Extract)部分替代蛋白胨(比例1:1)。

            八、常見問題解答

            • Q:蛋白胨結(jié)塊是否影響使用?
              A:輕微結(jié)塊可微波低火加熱溶解,嚴(yán)重結(jié)塊需更換新批次。

            • Q:如何降低培養(yǎng)基泡沫?
              A:減少蛋白胨用量至8 g/L,或添加0.1%消泡劑(如聚二甲基硅氧烷)。

            • Q:蛋白胨與水解酪蛋白(Casein Hydrolysate)的區(qū)別?
              A:蛋白胨為多肽混合物,水解酪蛋白為更小分子肽,適合不同菌株需求。

            九、供應(yīng)商信息

            • 推薦品牌:Oxoid、BD Difco、青島海博生物

            • 檢測標(biāo)準(zhǔn):符合USP、EP、CP藥典要求

            • 技術(shù)支持:提供氨基酸譜分析報(bào)告及微生物生長驗(yàn)證數(shù)據(jù)



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