12551 - 032--Gibco Williams'E培養(yǎng)基 L - Glutamine用戶指南
12551 - 032--Gibco Williams'E培養(yǎng)基 L - Glutamine用戶指南
摘要:本文為科研人員提供12551 - 032--Gibco Williams'E培養(yǎng)基 L - Glutamine的詳細用戶指南。涵蓋產(chǎn)品概述、特性、應(yīng)用場景、使用方法、儲存與運輸、質(zhì)量控制、常見問題解答等內(nèi)容,助力科研人員高效使用該產(chǎn)品。
關(guān)鍵詞:Gibco Williams'E培養(yǎng)基 L - Glutamine;用戶指南;科研應(yīng)用
一、引言
在細胞培養(yǎng)等生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域,培養(yǎng)基的選擇對于細胞的生長、增殖和分化至關(guān)重要。Gibco Williams'E培養(yǎng)基 L - Glutamine作為一種經(jīng)典的細胞培養(yǎng)基,憑借其的配方和優(yōu)異的性能,在科研中得到了廣泛應(yīng)用。本文旨在為科研人員提供一份專業(yè)且易懂的使用指南,幫助大家更好地了解和使用該產(chǎn)品。
二、產(chǎn)品概述
(一)基本信息
品牌:Gibco
產(chǎn)品名稱:Williams'E培養(yǎng)基 L - Glutamine
貨號:12551 - 032
規(guī)格:500ml
儲存條件:2 - 8°C避光儲存
(二)設(shè)計背景與用途
Williams'E培養(yǎng)基最初由Williams和Gunn設(shè)計,最初作為減血清補充培養(yǎng)基,主要用于成年大鼠肝上皮細胞的長期細胞培養(yǎng)。隨著研究的深入,人們發(fā)現(xiàn)該培養(yǎng)基也可用于培養(yǎng)不同物種的肝細胞,如人源HepaRG™細胞等。
三、產(chǎn)品特性
(一)成分組成
基礎(chǔ)成分:含有多類細胞培養(yǎng)所需的氨基酸、維生素、無機鹽等多種成分,為細胞生長提供了全面的營養(yǎng)支持。
特殊成分:含有2000mg/L D - 葡萄糖、25mg/L丙酮酸鈉、2200mg/L碳酸氫鈉等,這些成分有助于維持細胞的正常代謝和生理功能。
L - 谷氨酰胺:作為細胞培養(yǎng)中必需的營養(yǎng)元素,L - 谷氨酰胺參與嘌呤和嘧啶核苷酸、氨基糖類、谷胱甘肽、L - 谷氨酸和其他氨基酸的形成,并參與蛋白質(zhì)的合成和葡萄糖的產(chǎn)生。然而,L - 谷氨酰胺在溶液中不穩(wěn)定,會自發(fā)降解生成氨和焦谷氨酸,其中氨對細胞有害。而本產(chǎn)品中的L - 谷氨酰胺以穩(wěn)定形式存在,不會自發(fā)降解,提高了其利用率,且不會生成多余的氨,更利于細胞的生長。
(二)無添加成分
該培養(yǎng)基不含蛋白質(zhì)、脂類或任何生長因子,因此需要搭配血清或無血清添加物使用,以滿足細胞生長的特殊需求。
(三)緩沖系統(tǒng)
使用碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng)(2.2g/L),因此需要5 - 10%的CO?環(huán)境來維持生理pH值,確保細胞在適宜的酸堿環(huán)境中生長。
四、應(yīng)用場景
(一)肝細胞培養(yǎng)
適用于大鼠肝上皮細胞的長期培養(yǎng),也可用于其他哺乳動物的肝細胞培養(yǎng),為肝細胞生物學(xué)研究提供了重要的工具。
(二)藥物代謝研究
可用于研究藥物在肝細胞中的代謝過程,評估藥物的代謝產(chǎn)物、代謝途徑和代謝動力學(xué)參數(shù),為藥物研發(fā)提供有價值的信息。
(三)毒理學(xué)研究
在毒理學(xué)研究中,可用于評估化學(xué)物質(zhì)對肝細胞的毒性作用,研究毒物的毒性機制和劑量 - 反應(yīng)關(guān)系,為環(huán)境毒理學(xué)和藥物安全性評價提供實驗依據(jù)。
五、使用方法
(一)解凍與混合
從冰箱中取出培養(yǎng)基后,應(yīng)緩慢升溫至室溫,避免溫度變化過大對培養(yǎng)基成分造成影響。將培養(yǎng)基與血清或無血清添加物按照適當(dāng)?shù)谋壤旌暇鶆?,一般血清的添加量? - 10%。
(二)細胞接種與培養(yǎng)
將細胞接種到含有混合培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中,根據(jù)細胞的生長特性和實驗需求,調(diào)整細胞接種密度。將培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶放入含有5 - 10% CO?的培養(yǎng)箱中,在適宜的溫度(通常為37°C)下進行培養(yǎng)。
(三)培養(yǎng)基更換
根據(jù)細胞的生長情況和實驗設(shè)計,定期更換培養(yǎng)基。一般情況下,每隔2 - 3天更換一次培養(yǎng)基,以保證細胞獲得充足的營養(yǎng)物質(zhì)和良好的生長環(huán)境。
六、儲存與運輸
(一)儲存
儲存溫度應(yīng)嚴(yán)格控制在2 - 8°C,并避光保存。避免培養(yǎng)基在高溫、光照或潮濕的環(huán)境中儲存,以免影響其質(zhì)量和性能。
(二)運輸
在運輸過程中,應(yīng)使用適當(dāng)?shù)谋卮胧?,確保培養(yǎng)基始終處于低溫狀態(tài)。可采用冰袋、冷藏箱等設(shè)備進行運輸,防止培養(yǎng)基在運輸過程中變質(zhì)。
七、質(zhì)量控制
(一)生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)
Gibco Williams'E培養(yǎng)基 L - Glutamine在符合cGMP要求的工廠內(nèi)生產(chǎn),該工廠在FDA注冊為醫(yī)療設(shè)備制造商,并通過了ISO 13485標(biāo)準(zhǔn)認證,確保了產(chǎn)品的生產(chǎn)過程符合嚴(yán)格的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。
(二)質(zhì)量檢測
每批產(chǎn)品都進行全面的質(zhì)量檢測,包括外觀檢查、理化指標(biāo)檢測、微生物檢測和細胞培養(yǎng)性能檢測等。只有檢測合格的產(chǎn)品才能出廠銷售,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量和穩(wěn)定性。
八、常見問題解答
(一)培養(yǎng)基出現(xiàn)渾濁或沉淀
可能是由于儲存條件不當(dāng)或運輸過程中受到污染導(dǎo)致的。如果培養(yǎng)基出現(xiàn)渾濁或沉淀,應(yīng)立即停止使用,并進行質(zhì)量檢測。
(二)細胞生長緩慢或死亡
可能是由于培養(yǎng)基成分不足、細胞接種密度不當(dāng)、培養(yǎng)條件不合適或細胞受到污染等原因?qū)е碌摹?yīng)檢查培養(yǎng)基的成分和質(zhì)量,調(diào)整細胞接種密度和培養(yǎng)條件,并進行細胞污染檢測,以確定問題的原因并采取相應(yīng)的解決措施。
(三)L - 谷氨酰胺的穩(wěn)定性問題
雖然本產(chǎn)品中的L - 谷氨酰胺具有較高的穩(wěn)定性,但在長時間儲存或使用過程中,仍可能會發(fā)生一定程度的降解。如果發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基中的L - 谷氨酰胺含量不足,可適當(dāng)添加新鮮的L - 谷氨酰胺或其替代物,以保證細胞的正常生長。
九、結(jié)論
12551 - 032--Gibco Williams'E培養(yǎng)基 L - Glutamine以其的配方、優(yōu)異的性能和廣泛的應(yīng)用場景,為科研人員提供了可靠的細胞培養(yǎng)工具。通過遵循本用戶指南中的使用方法、儲存與運輸要求以及質(zhì)量控制措施,科研人員可以充分發(fā)揮該產(chǎn)品的優(yōu)勢,提高細胞培養(yǎng)的成功率和細胞的健康狀態(tài),為生物醫(yī)學(xué)研究提供有力的支持。希望本指南能夠幫助用戶更好地了解和使用該產(chǎn)品,取得更好的科研成果。
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