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            英諾思EasyIso™ 人類CD8 T細(xì)胞分離試劑盒操作步驟

            來源:天津益元利康生物科技有限公司   2025年05月12日 13:27  

            引言
            CD8 T細(xì)胞在免疫應(yīng)答中扮演核心角色,其分離純度直接影響下游實(shí)驗(yàn)的可靠性。然而,傳統(tǒng)分離方法常面臨操作復(fù)雜、細(xì)胞活性受損等問題。英諾思推出的EasyIso™ 人類CD8 T細(xì)胞分離試劑盒(貨號SN3103),通過創(chuàng)新的無柱磁極分離技術(shù),實(shí)現(xiàn)高純度、快速且溫和的CD8 T細(xì)胞分選,為科研與臨床研究提供高效工具。上期介紹了原理《
            英諾思EasyIso™ 人類CD8 T細(xì)胞分離試劑盒(SN3103)實(shí)驗(yàn)原理》,這期介紹一下操作步驟。

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            一、操作步驟:快速四步法

            1. 樣本制備:將PBMC單細(xì)胞懸液濃度調(diào)整至1×10? cells/mL;

            2. 抗體孵育:按100 μL/mL加入EasyIso™ Human CD8 T Cell Isolation Cocktail,常溫孵育10分鐘

            3. 磁珠結(jié)合:加入鏈霉親和素納米磁珠(100 μL/mL),輕柔混勻后孵育5分鐘;

            4. 磁極分離:

            使用磁力架吸附3-5分鐘(單孔/聯(lián)排架);

            傾斜磁力架,將富含CD8 T細(xì)胞的上清轉(zhuǎn)移至新管中,即可獲得高純度細(xì)胞。

            全程僅需20分鐘,顯著提升實(shí)驗(yàn)效率。

            二、關(guān)鍵試劑與設(shè)備要求

            緩沖液:推薦使用FACS Buffer1×PBS + 0.02% EDTA + 2% FBS),提高細(xì)胞得率;

            耗材:70 μm無菌濾網(wǎng)、無菌離心管;

            儀器:離心機(jī)、磁力架(兼容單孔或聯(lián)排管)。

            三、使用建議與注意事項(xiàng)

            PBMC制備:推薦采用淋巴細(xì)胞分離液進(jìn)行密度梯度離心,避免紅細(xì)胞裂解法;

            無菌操作:全程需在超凈臺(tái)中進(jìn)行,防止污染;

            滲透壓穩(wěn)定:確保FACS Buffer配制準(zhǔn)確,保護(hù)敏感免疫細(xì)胞;

            磁珠處理:使用前充分震蕩混勻磁珠30秒,確保結(jié)合效率。

            四、數(shù)據(jù)驗(yàn)證:純度高達(dá)91.2%

            實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示,使用SN3103試劑盒分選后:

            分選前:PBMCCD8+ T細(xì)胞占比14.3%;

            分選后:CD3+CD8+ T細(xì)胞純度提升至91.2%(圖B),滿足高標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)需求。

            聯(lián)系英諾思生物代理——天津益元利康生物科技有限公司立即訂購SN3103,體驗(yàn)高效細(xì)胞分選技術(shù)!

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