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            0.25%胰酶溶液(EDTA+酚紅) 細(xì)胞傳代實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化配置指南

            來源:武漢普諾賽生命科技有限公司   2025年05月14日 16:07  

            胰蛋白酶(Trypsin)是一種絲氨酸水解酶,它能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基側(cè)切段,水解細(xì)胞間的蛋白質(zhì),破壞細(xì)胞間的連接,從而使組織或貼壁細(xì)胞離散成單個細(xì)胞。胰酶分散細(xì)胞的活性與組織或細(xì)胞的特性、胰酶濃度、溫度和作用時間有關(guān),在pH 8.0和37℃時,胰酶的作用能力最-強(qiáng),因此使用胰酶時,應(yīng)把握好濃度、溫度和時間,以免消化過度造成細(xì)胞損傷。

            一般常用胰酶的工作濃度為0.25%,而半貼壁細(xì)胞或?qū)σ让该舾械募?xì)胞常采用低濃度(0.05%)的胰酶進(jìn)行細(xì)胞消化。由于EDTA能夠螯合Ca2+和Mg2+,從而破壞細(xì)胞連接促進(jìn)細(xì)胞的解離,因此在胰酶溶液中常常會加入一定量的EDTA混合使用,以增強(qiáng)解離效果。

            0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA、酚紅,溶于PBS)信息

            形態(tài)

            液體

            規(guī)格

            100mL

            溶劑

            10 mM PBS

            胰蛋白酶濃度

            2.5 g/L

            EDTA•2Na

            0.2 g/L

            酚紅指示劑

            10 mg/L

            儲存條件

            -5~-20℃

            運(yùn)輸條件

            低溫

            有效期

            12個月

            0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA、酚紅,溶于PBS)注意事項(xiàng)

            1、由于不同的組織或者細(xì)胞對胰酶的作用反應(yīng)不一樣,因此操作人員應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況,確定最佳消化時間;消化細(xì)胞時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞貼壁和生長狀況;

            2、使用0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA、酚紅,溶于PBS)時應(yīng)注意無菌操作,避免污染;

            3、不宜長時間放置于室溫環(huán)境或2-8℃長期保存;

            4、2-8℃中解凍,搖勻后使用,切忌反復(fù)凍融,用量較少時建議分裝凍存。

            5、本產(chǎn)品僅用于科研或進(jìn)一步研究使用,不用于診斷和治療。

            6、0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA、酚紅,溶于PBS)中含有酚紅,由于是磷酸鹽緩沖體系,在冷凍后會變成淺黃色。同時該產(chǎn)品采用干冰運(yùn)輸,因此在運(yùn)輸過程中包裝內(nèi)會有部分二氧化碳累積,這些二氧化碳可能會進(jìn)入到溶液中導(dǎo)致pH略微下降。該種淺黃色的胰酶溶解后依然會變成橙紅色液體可以正常使用,或者也可以采用無菌的2 M氫氧-化鈉溶液對PH進(jìn)行微調(diào)后使用。

            0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA、酚紅,溶于PBS)文獻(xiàn)列表

            • Near-infrared light-responsive nanocomposite hydrogels loaded with epidermal growth factor for diabetic wound healing (2025-02-14)

              期刊:Materials Today Bio

              DOI:10.1016/j.mtbio.2025.101578

              影響因子 :8.7

              引用產(chǎn)品: MEM 培養(yǎng)基 ,  特級胎牛血清 ,  青霉素-鏈霉素溶液(雙抗),100× ,  0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA,溶于PBS)

            • Phytic acid extraction from rice bran with acetic acid: Optimization, antioxidant capacity and mechanism based on cellular metabolomics (2025-01-22)

              期刊:LWT-FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY

              DOI:10.1016/j.lwt.2025.117394

              影響因子 :6.0

              引用產(chǎn)品: Hep G2 細(xì)胞 ,  DMEM高糖 培養(yǎng)基 ,  0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA,溶于PBS) ,  青霉素-鏈霉素溶液(雙抗),100×

            0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA、酚紅,溶于PBS)常見問題解答

            Q:胰蛋白酶溶液在4度大概能放多久?

            A:通常我們建議胰蛋白酶放置在4℃冰箱內(nèi)一周內(nèi)使用完畢為宜,如果您的使用量較少,可以將胰蛋白酶混勻后按需進(jìn)行分裝,用不完的放在-5~-20℃冰箱長期保存。


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