生物素連接酶（Biotin Ligase）介紹

來源：上海通善生物科技有限公司 2013年06月17日 10:11

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生物素連接酶（Biotin Ligase）

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

生物素連接酶（Biotin Ligase, BirA, EC 6.3.4.15）是大腸桿菌BirA基因編碼的雙功能蛋白質(zhì)，能識(shí)別蛋白質(zhì)分子的特異序列（BirA Substrate Peptide），使蛋白質(zhì)生物素化。該酶帶有6×His標(biāo)簽，剪切反應(yīng)完畢后可通過Ni-NTA（產(chǎn)品貨號(hào)：PAN001）去除。

來源

重組蛋白質(zhì)（E.coli）

活力單位定義

在30℃，30分鐘內(nèi)，將1 pmol 蛋白質(zhì)或者多肽（融合BSP序列）生物素化所需要的酶量定義為一個(gè)活力單位。

純度

純度 > 95%，沒有檢測(cè)到其他蛋白酶活力。

應(yīng)用

生物素標(biāo)記融合BSP的蛋白質(zhì)。

儲(chǔ)存條件

冰袋運(yùn)輸；分裝保存，避免反復(fù)凍融；長(zhǎng)期保存-20℃，短期可在4℃保存數(shù)星期。

反應(yīng)體系

組分	體積（μl）	終濃度
10X buffer A	2.5	1X
10X buffer B	2.5	1X
Biotin Ligase（1kU/μL）	1.5	45 U/μl
蛋白或者多肽底物（1 nmol）	18.5	40 μM

30℃，溫浴30分鐘。

注意事項(xiàng)

不同的BSP序列，生物素化反應(yīng)所需要的時(shí)間可能會(huì)有不同。
反應(yīng)底物量比較大的時(shí)候，可以同時(shí)放大反應(yīng)體系?；蛘叩鞍?多肽的濃度加大一倍，補(bǔ)加2.5ul的D-Biotin。
底物濃度低的時(shí)候，需要孵育的時(shí)間要延長(zhǎng)。
需要較低的溫度孵育時(shí)候，反應(yīng)時(shí)間要加長(zhǎng)
氯化鈉（>100mM）,甘油（>5%）,硫酸銨（>50mM）等常用緩沖液成分會(huì)抑制酶的活力。所以底物盡量保存在低鹽的溶液中。

產(chǎn)品規(guī)格

貨號(hào)	規(guī)格	包裝規(guī)格
貨號(hào)	規(guī)格	Biotin Ligase	10X buffer A	10X buffer B	D-Biotin
RPE004-100	100 kU	100 μl	200 μl	200 μl	200 μl
RPE004-500	500 kU	500 μl	1 ml	1 ml	1 ml

相關(guān)產(chǎn)品

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