在進(jìn)行多孔板尤其是96和384孔板細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，你可能會(huì)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞在孔板中的位置會(huì)影響細(xì)胞的生長狀態(tài)，特別是處在周邊以及四個(gè)角的孔中細(xì)胞通常會(huì)表現(xiàn)出分布不均等現(xiàn)象，也就是常說的邊緣效應(yīng)（edge effects）。這對我們的實(shí)驗(yàn)造成了很多的不便，特別是對于藥物篩選相關(guān)研究更是無法回避。
    由于多孔板中四邊孔zui直接與外界環(huán)境接觸，受環(huán)境影響也就zui大。
關(guān)于邊緣效應(yīng)的成因，現(xiàn)有的觀點(diǎn)主要有以下兩點(diǎn)：

溫度效應(yīng)
   由于位置效應(yīng)，當(dāng)我們將鋪好的細(xì)胞由室溫轉(zhuǎn)移到37℃培養(yǎng)箱時(shí)，周邊孔中的細(xì)胞更傾向于聚集到相對溫暖的邊緣地帶。結(jié)果就是細(xì)胞分布不均，造成一邊細(xì)胞過于擁擠增殖受阻，另一邊卻幾乎沒有細(xì)胞，zui終必然是長勢不及中間孔。

蒸發(fā)效應(yīng)
   雖然通常細(xì)胞培養(yǎng)箱中都會(huì)放置一盤雙蒸水以維持培養(yǎng)箱中的濕度，但仍難達(dá)到多孔板中的濕度，特別是在培養(yǎng)箱經(jīng)常開關(guān)的情況更是如此。同樣的由于位置效應(yīng)，邊緣孔的濕度較中間孔更低，水分揮發(fā)的現(xiàn)象就更嚴(yán)重。所以經(jīng)常你可能就會(huì)看到四周培養(yǎng)基的體積會(huì)明顯少于中間孔，而四個(gè)角落的孔尤為嚴(yán)重。細(xì)胞在2乘的培養(yǎng)基中生活會(huì)是怎樣的一個(gè)情形，想象下腌蘿卜就知道了！當(dāng)然這種現(xiàn)象在長時(shí)間培養(yǎng)時(shí)顯現(xiàn)的尤為突出。

解決方法：
棄為上策
   不能解決，就不用這些周邊的孔，這可說是zui直接的方法。同時(shí)再在這些孔中加入培養(yǎng)基或PBS以形成護(hù)城河，保護(hù)中間孔免受蒸發(fā)效應(yīng)影響。但到底來說這也不算是上上策，畢竟損失近1/3孔（96孔瞬間折損至60孔），尤其是對于像腫瘤干細(xì)胞常用的低黏附培養(yǎng)板這樣造價(jià)不菲的培養(yǎng)板，著實(shí)“棄不起”。

室溫預(yù)孵育
   前面提到在做藥物篩選時(shí)，位置效應(yīng)讓許多人很困惱。有研究者就專門針對溫度效應(yīng)發(fā)表了一篇方法論文[1]，驗(yàn)證了前人提出的一種解決位置效應(yīng)的簡易方法是可行的。該方法就是將鋪好的細(xì)胞在室溫先放置1h，待細(xì)胞完成沉降和貼壁后再放回37℃培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)?？雌饋碓摲桨负唵我仔小捉珜?shí)際上作者的實(shí)驗(yàn)依據(jù)建立在24h觀察得到數(shù)據(jù)的基礎(chǔ)上，而此時(shí)蒸發(fā)效應(yīng)的影響還比較小。因此如果只是短時(shí)實(shí)驗(yàn)，相信使用該方法還是不錯(cuò)的選擇。