生化培養(yǎng)箱多管發(fā)酵法實(shí)驗(yàn)樣品的制備和保存
利用多管發(fā)酵法使用生化培養(yǎng)箱培育物質(zhì)在實(shí)驗(yàn)之前必須要有所準(zhǔn)備,比如采集樣品、調(diào)節(jié)溫度、水樣體積的計(jì)算等都要做出預(yù)計(jì),以及培育過(guò)后的保存都要注意。多管發(fā)酵法所使用的培養(yǎng)液在分裝于各發(fā)酵管中后,應(yīng)將發(fā)酵管盡快放于生化培養(yǎng)箱中,在115℃滅菌20min,這個(gè)溫度也應(yīng)控制好,既達(dá)到滅菌的作用,還要防止培養(yǎng)物質(zhì)分解流失,然后貯存于冰箱或暗處備用。
濾膜法所采用的M-FC培養(yǎng)基多使用外購(gòu)的成品,培養(yǎng)基中苯胺藍(lán)的純度和質(zhì)量往往影響菌落的顏色,因此,無(wú)菌包裝的成套培養(yǎng)基在使用前,先接種典型糞大腸菌,以觀察對(duì)比菌落的顏色,來(lái)鑒定其穩(wěn)定性。
生化培養(yǎng)箱多管發(fā)酵法的結(jié)果是根據(jù)不同接種量的發(fā)酵管所出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果的數(shù)目,從MPN表中查得相應(yīng)的MPN指數(shù),來(lái)計(jì)算每升水中糞大腸菌群細(xì)菌的MPN值。MPN是指zui大可能數(shù),它是根據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)理論,估計(jì)水體中的菌群密度和衛(wèi)生質(zhì)量的一種方法,所以準(zhǔn)確判斷不同接種量發(fā)酵管的陽(yáng)性數(shù)是非常重要的,否則將導(dǎo)致較大偏差。濾膜法的結(jié)果是計(jì)數(shù)濾膜上呈藍(lán)或藍(lán)綠色的菌落,來(lái)計(jì)算出每升水樣中的糞大腸菌群數(shù)。所以為便于計(jì)數(shù),減少誤差,理想的水樣體積是一片濾膜上生長(zhǎng)20-60個(gè)糞大腸菌群菌落。
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