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            免疫組織化學(xué)IHC服務(wù)|實驗技術(shù)服務(wù)

            來源:上海拜力生物科技有限公司   2015年05月15日 12:34  

            關(guān)鍵詞:免疫組織化學(xué)IHC服務(wù)|實驗技術(shù)服務(wù)
            簡介:世界*品牌免疫組織化學(xué)IHC服務(wù)|實驗技術(shù)服務(wù)原裝,質(zhì)量保證,*。
            免疫組織化學(xué)IHC服務(wù)|實驗技術(shù)服務(wù)——pCzn1質(zhì)粒+Arctic Express宿主菌低溫表達體系。
            我們具備豐富的蛋白表達設(shè)計經(jīng)驗及實驗操作技巧,承諾客戶不成功不收費。我們所有的實驗數(shù)據(jù)真實可信,我們提供原始的表達菌株和克隆質(zhì)粒,客戶可以依據(jù)我們的實驗報告重復(fù)我們的實驗結(jié)果。
            產(chǎn)品品牌:   http://www.。。com/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html    
            測序?qū)嶒灹鞒蹋?br>免疫組織化學(xué)技術(shù)按照標(biāo)記物的種類可分為免疫熒光法、免疫酶法、免疫鐵蛋白法、免疫金法及放射免疫自顯影法等。
            免疫組織化學(xué)染色
            SP法
            1)脫蠟、水化;
            2)PBS洗2~3次各5分鐘;
            3)3%H2O2(80%甲醇)滴加在TMA上,室溫靜置10分鐘;
            4)PBS洗2~3次各5分鐘;
            5)抗原修復(fù);
            6)PBS洗2~3次各5分鐘;
            7)滴加正常山羊血清封閉液,室溫20分鐘。甩去多余液體。
            8)滴加Ⅰ抗50μl,室溫靜置1小時或者4℃或者37℃1小時。
            9)4℃過后需在37℃復(fù)溫45分鐘。
            10)PBS洗3次各5分鐘;
            11)滴加Ⅱ抗40~50μl,室溫靜置,或37℃1小時;
            12)II抗中可加入0.05%的tween-20。
            13)PBS洗3次各5分鐘;
            14)DAB顯色5~10分鐘,在顯微鏡下掌握染色程度;
            15)PBS或自來水沖洗10分鐘;
            16)蘇木精復(fù)染2分鐘,鹽酸酒精分化;
            17)自來水沖洗10~15分鐘;
            18)脫水、透明、封片、鏡檢。
            SABC法
            1)脫蠟、水化。
            2)PBS洗兩次各5分鐘。
            3)用蒸餾水或PBS配置新鮮的3%H2O2,室溫封閉5~10分鐘,蒸餾水洗3次。
            4)抗原修復(fù)。
            5)PBS洗5分鐘。
            6)滴加正常山羊血清封閉液,室溫20分鐘。甩去多余液體。
            7)滴加Ⅰ抗,室溫1小時或者4℃或者37℃1小時(4℃后在37℃復(fù)溫45分鐘)。
            8)PBS洗三次每次2分鐘。
            9)滴加生物素化二抗,20℃~37℃20分鐘。
            10)PBS洗3次每次2分鐘。
            11)滴加試劑SABC,20℃~37℃20分鐘。
            12)PBS洗4次每次5分鐘。
            13)DAB顯色:DAB顯色試劑盒或者自配顯色劑顯色(鏡下掌握顯色程度)。
            14)蒸餾水洗。蘇木素復(fù)染2分鐘、鹽酸酒精分化。
            15)脫水、透明、封片、鏡檢。
            多抗和單抗特性比較
            1.均一性。一種單抗中,每個抗體的化學(xué)結(jié)構(gòu)和氨基酸順序都相同,只有一種Ig亞類。即單抗是一種純度很高的均一抗體。而從不同動物,不同時期所得到的多抗,各有不同的化學(xué)組成。多抗是多種種類和亞類Ig的混合物。
            2. 穩(wěn)定性。單抗的穩(wěn)定較差,對PH變化敏感,對熱不穩(wěn)定,提純過程中易變性,而多抗的穩(wěn)定性則較好。
            3. 特異性。單抗是單一地針對抗原的某一決定簇,所以用它進行血清學(xué)反應(yīng)時,特異性強,敏感性高,一般不發(fā)生交叉反應(yīng)。而多抗能與抗原上的多種抗原決定簇結(jié)合,所以特異性較差,較易引起交叉反應(yīng)。
            4.重復(fù)性。單抗的重復(fù)性好,而多抗每批都不一樣。
            5. 沉淀反應(yīng)。多抗由于與抗原多價結(jié)合容易形成網(wǎng)絡(luò)樣沉淀,而單抗只與抗原結(jié)合產(chǎn)生二聚體,不能直接形成抗原抗體沉淀物。

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