“雜音”染色種類繁多，產(chǎn)生的原因也多種多樣，為了便于說(shuō)明，筆者將其歸納為下面幾種。

1、灶片狀著色
切片中著色區(qū)東一塊西一塊，呈灶片狀分布，出現(xiàn)這種問(wèn)題的原因有：（1）裱片時(shí)水未排盡，在局部形成氣泡使組織突起，染色時(shí)試劑滲入后不易洗盡，顯色過(guò)深所致。解決辦法是，漂片盒里的氣泡應(yīng)去盡，晾片熱臺(tái)不能平放，應(yīng)有45度左右的斜度，利于水流走和蒸發(fā)。（2）壞死組織灶，組織壞死后細(xì)胞破壞、酶的釋放、蛋白游離、分解，復(fù)雜的肽鏈殘段（如Fc段）可能與一抗或/和二抗結(jié)合導(dǎo)致zui終著色。解決辦法是在選擇染色切片時(shí)應(yīng)避免選擇壞死組織較多的切片。（3）制作APES膠片時(shí)，膠的濃度太高，干燥后在玻片上留下白色小點(diǎn)，顯色時(shí)白色小點(diǎn)著色。解決辦法是按照標(biāo)準(zhǔn)的制備方法進(jìn)行，即5%鹽酸酒精（5 ml鹽酸+95%酒精95 ml）浸泡玻片4小時(shí)、熱水沖洗玻片1小時(shí)、蒸餾水洗玻片1分鐘、丙酮浸泡玻片5秒鐘后空氣干燥（室溫）、2% APES（2 ml APES+98 ml丙酮）浸泡玻片5分鐘、玻片過(guò)一下丙酮（1-2秒鐘）、玻片過(guò)一下蒸餾水（1-2秒鐘）、37 度干燥、室溫儲(chǔ)存?zhèn)溆?。如果制片過(guò)程中，因丙酮逐漸揮發(fā)而膠變濃時(shí)可適當(dāng)加入一些丙酮。
2、細(xì)胞漿著色
胞漿著色是所有“雜音”染色中有欺騙性的著色，著色區(qū)局限在細(xì)胞內(nèi)，間質(zhì)無(wú)著色，看上去與真實(shí)的免疫反應(yīng)著色幾乎一樣，很難區(qū)別。胞漿里含有較多的蛋白質(zhì)，因此，很多非特異性的染色除了見(jiàn)于間質(zhì)也可以出現(xiàn)在胞漿中。這種原因造成的著色，可以通過(guò)血清封閉解決。還有因內(nèi)源酶造成的著色，如血紅蛋白（紅細(xì)胞）、肌紅蛋白（肌細(xì)胞）、細(xì)胞色素（粒細(xì)胞、單核細(xì)胞）、過(guò)氧化氫酶（肝、腎），這些可用過(guò)氧化氫進(jìn)行封閉。巨噬細(xì)胞吞噬各種抗原物質(zhì)或Fc片斷而出現(xiàn)胞漿著色，這種著色不易避免，但可以通過(guò)形態(tài)學(xué)辨認(rèn)出巨噬細(xì)胞而引起重視。內(nèi)源性生物素的著色有欺騙性，因?yàn)樗鼜V泛的存在于組織細(xì)胞中，我們研究結(jié)果顯示：冰凍組織中存在內(nèi)源性生物素，經(jīng)福馬林固定石蠟包埋后生物素被封閉，加熱抗原修復(fù)后造成內(nèi)源性生物素暴露，內(nèi)源性生物素暴露的強(qiáng)度在不同的組織有所不同，從弱陽(yáng)性（+）到強(qiáng)陽(yáng)性（+++），內(nèi)源性生物素在組織中的分布形式，既有散在分布也有彌漫分布，主要以顆粒狀形式存在于胞漿中，內(nèi)源性生物素廣泛存在于上皮源性組織，特別是腺上皮組織，亦存在部分非上皮組織，內(nèi)源性生物素不僅存在人體組織也存在大鼠組織，內(nèi)源性生物素暴露的強(qiáng)弱與修復(fù)液有關(guān)，其強(qiáng)度增加依次為：檸檬酸、EDTA、EGTA，熱抗原修復(fù)暴露的內(nèi)源性生物素可被雞蛋清封閉，非生物素檢測(cè)系統(tǒng)Polymer兩步法（EliVision、EnVision）可避免生物素干擾。
3、細(xì)胞核著色
不適當(dāng)?shù)慕M織處理可以出現(xiàn)細(xì)胞核著色，如組織在二甲苯里浸泡時(shí)間太長(zhǎng)（如從星期五浸泡到下星期一）、緩沖液中浸泡時(shí)間太長(zhǎng)、組織變干、微波修復(fù)液的PH值和修復(fù)時(shí)間不當(dāng)或修復(fù)過(guò)程中修復(fù)液留下得太少，未沒(méi)過(guò)組織等。解決辦法是嚴(yán)格按照操作常規(guī)進(jìn)行工作。
4、間質(zhì)著色

著色部位主要在間質(zhì)，間質(zhì)著色的原因很多，如抗體與組織中的蛋白質(zhì)因蛋白疏水基團(tuán)相互作用形成非特異性的連接而著色，加一抗前的血清封閉這一步就是為了避免非特異型的結(jié)合。又如血清中的免疫球蛋白常常滲出到組織間質(zhì)，很容易與抗體結(jié)合，造成間質(zhì)著色，特別是lambda和kappa染色時(shí)。當(dāng)甲狀腺膠質(zhì)外溢到組織間質(zhì)時(shí)，做甲狀腺球蛋白染色也會(huì)出現(xiàn)間質(zhì)著色?？贵w不純或抗體被污染也可出現(xiàn)間質(zhì)著色，我們?cè)龅紺D20抗體不純，除了染上B細(xì)胞外還染上了間質(zhì)。