關鍵詞:(原核)可溶蛋白表達|實驗技術服務
簡介:世界*品牌(原核)可溶蛋白表達|實驗技術服務原裝,質(zhì)量保證,*。
(原核)可溶蛋白表達|實驗技術服務——pCzn1質(zhì)粒+Arctic Express宿主菌低溫表達體系。
我們具備豐富的蛋白表達設計經(jīng)驗及實驗操作技巧,承諾客戶不成功不收費。在獲得重組蛋白產(chǎn)品的同時,我們也會提供相應的原始數(shù)據(jù)和原始圖片,不需要再額外花費精力重復實驗。另一方面,我們所有的實驗數(shù)據(jù)真實可信,我們提供原始的表達菌株和克隆質(zhì)粒,客戶可以依據(jù)我們的實驗報告重復我們的實驗結果。
產(chǎn)品品牌:(原核)可溶蛋白表達|實驗技術服務 http://www.。。com/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html
實驗描述
利用基因合成、cDNA克隆、反轉錄等方法,獲得目的基因,將目的基因亞克隆至表達載體pSumo-Mut,目的基因在N端融合Sumo標簽蛋白,通過測序和酶切驗證,確證獲得亞克隆正確的表達質(zhì)粒。
利用構建好的表達質(zhì)粒,轉化Arctic Express宿主菌, 在11度低溫IPTG誘導條件下,SDS-PAGE檢測目標蛋白表達情況,確認蛋白分布在上清或是沉淀中。
如果目標蛋白產(chǎn)物分布與上清中,通過Ni柱親和純化, 獲得目的蛋白;如果目標蛋白分布于沉淀中,則通過包涵體梯度洗脫后,重溶獲得目標蛋白,必要的話,重溶蛋白在進一步通過親和純化提高純度。
純化后的蛋白經(jīng)過Sumo蛋白酶酶切,蛋白N端將會*裸露,不留任何氨基酸殘基,酶切后的混合物經(jīng)Ni柱親和純化,可以去除融合蛋白、Sumo標簽蛋白和Sumo蛋白酶,剩余的蛋白即為酶切后目的蛋白。
服務內(nèi)容
針對客戶蛋白表達不理想的問題,我公司根據(jù)客戶提供的基因序列對實驗進行整套優(yōu)化(基因設計、基因優(yōu)化、基因合成、亞克隆、蛋白表達條件優(yōu)化及可溶性測試、原核蛋白表達及檢測),并提供給客戶實驗中每個步驟詳細的實驗報告。
交付
實驗各階段的實驗評估報告(分為密碼子優(yōu)化報告、載體-宿主優(yōu)化報告、表達條件優(yōu)化報告和蛋白可溶性評估)
如果客戶需要蛋白,我們可提供:
>5mg 可溶性蛋白
蛋白純度>90%
融合標簽蛋白
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