關鍵詞:單抗定制技術服務|實驗技術服務
簡介：世界*品牌單抗定制技術服務|實驗技術服務原裝，質量保證,*。
單抗定制技術服務|實驗技術服務——pCzn1質粒+Arctic Express宿主菌低溫表達體系。
我們具備豐富的蛋白表達設計經(jīng)驗及實驗操作技巧，承諾客戶不成功不收費。在獲得重組蛋白產(chǎn)品的同時，我們也會提供相應的原始數(shù)據(jù)和原始圖片,不需要再額外花費精力重復實驗。另一方面，我們所有的實驗數(shù)據(jù)真實可信，我們提供原始的表達菌株和克隆質粒，客戶可以依據(jù)我們的實驗報告重復我們的實驗結果。
產(chǎn)品品牌：   http://www.。。ｃｏｍ/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html    
測序實驗流程：
單克隆抗體（單抗）應用淋巴細胞雜交瘤技術將免疫動物的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合形成雜交瘤細胞，通過HAT篩選，ELISA抗體檢測，有限稀釋克隆化，選擇出具有分泌抗體功能又能無限繁殖的來源于單一B細胞的雜交瘤細胞，并產(chǎn)生抗體，就是單克隆抗體。單抗的zui大優(yōu)勢是它的特異性、均一性、性和無限供應性。在免疫學、醫(yī)學、生物學等領域的基礎研究和臨床醫(yī)學上，包括對疾病(包括癌癥)的診斷、預防和治療等方面，均顯示出巨大的生命力。
實驗步驟：
1. 每種抗原免疫5只Balb/c小鼠
2. 選取ELISA效價較高的小鼠，取脾細胞與SP2/0細胞融合
3. 進行2~4次克隆化及ELISA篩選，確保雜交瘤細胞分泌抗體的穩(wěn)定性
4. 抗體亞類鑒定
5. 至少選擇2株雜交瘤細胞的凍存，并免費提供一年的保種服務
細胞檢測：細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌
細胞凍存：液氮凍存（基礎培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS
細胞運輸：干冰運輸（1 Vial）或活細胞運輸（T-25 flasks
細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療詳細介紹
細胞培養(yǎng)是一種無菌操作技術，要求工作環(huán)境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。細胞培養(yǎng)室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響，要求工作環(huán)境清潔、空氣清新，干燥和無煙塵。細胞培養(yǎng)室的設計原則一般是無菌操作區(qū)設在室內較少走動的內側，常規(guī)操作和封閉培養(yǎng)于一室，而洗刷消毒在另一室。 
所有細胞入庫之前均經(jīng)過嚴格的細胞質量檢測和鑒定
所有細胞在出庫之前均經(jīng)過一次嚴格的質檢認證
確保細胞到每一位用戶手里都是狀態(tài)
高質量ATCC產(chǎn)品對您的研究非常重要
1.細胞形態(tài)觀察。細胞膜是每天必須觀察的，看是否清晰，細胞的死亡往往是從細胞膜的破裂開始的，早期的表現(xiàn)就是細胞膜某一點出現(xiàn)欠完整或者毛發(fā)影。
2.細胞往往會有“抱團”現(xiàn)象，抱團生長或死亡，個人認為應該勤換液或傳代，盡量避 免細胞抱團。
3.細胞生長迅速，強烈建議用較大的培養(yǎng)瓶養(yǎng)，用小瓶養(yǎng)的話，換液不及時，很容易死 亡。細胞的生長速度一般為2天左右就需要傳代，并且一般為一傳三，或一傳四。
4.培養(yǎng)液：1640培養(yǎng)液，1L一般加碳酸氫鈉2g，并加雙抗，胎牛血清濃度*為12%，zui低 不低于10%，HL60細胞對胎牛血清高度依賴。培養(yǎng)液PH應調為7.20-7.40之間。
5.防污染。HL60細胞生長迅速，較少發(fā)生污染，但常規(guī)措施應該做好。比如無菌操作，酒精 消毒等，培養(yǎng)瓶口建議過火，包括瓶蓋，應過火4秒左右。
6.凍存。-20一小時，-80液氮長期保存。強烈建議液氮長期保存，盡量不要在-80長期 保存，死亡率很高。
7.復蘇。調節(jié)水浴箱溫度為42℃，并提前在試管內放置10倍培養(yǎng)液，使培養(yǎng)液溫度與室溫一 致。1分鐘內融化細胞(禁止搖晃凍存管)，移取至試管內，動作要輕，從試管管底開始慢慢上提 移液管，使細胞在培養(yǎng)液內分布均勻，離心，洗2次。
收到細胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況。 (一)如果細胞未長滿，用75%酒精噴灑整個 瓶消毒后放到超菌 臺內，嚴格無菌操作，打開血管平滑肌細胞瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下 10ml培養(yǎng)液在瓶內繼續(xù)培養(yǎng)。
(二)如果細胞已長滿，即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：
1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS(不含鈣，鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中， 倒轉放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預熱，然后又將 培養(yǎng)瓶倒轉大約30 秒后，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓分 散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶， 細胞隨即脫落下來。
3. 加入6-8ml*培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。1:3~1:6 傳代;2~3天1次。
注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細 胞不適應而造成生長不好。
凍存方法：凍存液：基礎培養(yǎng)基 +5%DMSO+20%FBS
儲存：液氮儲存