檢測原理: 本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ELISA法?？谷薎L-4單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)本和標(biāo)準(zhǔn)品中的IL-4會(huì) 與單抗結(jié)合，游離的成分被洗去。小鼠ELISA試劑盒加入生物素化的抗人IL-4抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親 和素。生物素與親和素特異性結(jié)合；抗人IL-4抗體與結(jié)合在單抗上的人IL-4結(jié)合而形成免疫 復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物，若反應(yīng)孔中有IL-4，辣根過氧化物酶會(huì)使無色 的顯色劑現(xiàn)藍(lán)色，加終止液變黃。在450nm處測OD值，IL-4濃度與OD450值之間呈正比，可 通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中IL-4的濃度。
小鼠ELISA試劑盒檢測前準(zhǔn)備工作: 
1. 請(qǐng)?zhí)崆?0分鐘從冰箱中取出試劑盒，以平衡至室溫。 2. 將濃縮洗滌液用雙蒸水稀釋（1:20）。未用完的放回4℃。 3. 標(biāo)準(zhǔn)品: 加入標(biāo)準(zhǔn)品/標(biāo)本稀釋液0.5ml至凍干標(biāo)準(zhǔn)品中，靜置15分鐘，待其充分溶解后，輕輕混勻（濃度為1000 pg/ml）。然后根據(jù)需要進(jìn)行稀釋。（建議標(biāo)準(zhǔn)曲線使用以下濃度： 1000、500、250、125、62.5、31.25、15.6、0 pg/ml）。復(fù)溶標(biāo)準(zhǔn)品原液（1000 pg/ml）若未用完請(qǐng)分裝后放入-20℃以下電冰箱內(nèi)保存，保存兩個(gè)月。已稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品請(qǐng)廢棄。 4. 生物素化抗體工作液：按當(dāng)次試驗(yàn)所需要得用量，使用前20分鐘，以生物素化抗體稀釋液稀釋濃縮生物素化抗體（1:30）成工作濃度。當(dāng)日使用。ELISA試劑盒若實(shí)驗(yàn)次數(shù)過多導(dǎo)致生物素化 抗體量不足，可向我們公司單獨(dú)購買生物素化抗體。 5. 酶結(jié)合物工作液：按當(dāng)次試驗(yàn)所需要得用量，使用前20分鐘，以酶結(jié)合物稀釋液稀釋濃 縮酶結(jié)合物（1:30） 成工作濃度。當(dāng)日使用。若實(shí)驗(yàn)次數(shù)過多導(dǎo)致濃縮酶結(jié)合物量不足， 可向我們公司單獨(dú)購買濃縮酶結(jié)合物。