資料簡介
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以下是關(guān)于大鼠L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用說明:
1. ?試劑盒組成?
標(biāo)記物?:HRP標(biāo)記物?。
樣本類型?:適用于大鼠血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等?。
檢測方法?:雙抗體夾心法、間接法、競爭法以及BAS-ELISA等?。
2. ?樣本處理?
血清?:使用無菌管收集,室溫血液自然凝固10-20分鐘,2-8℃條件下離心20分鐘(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清?。
血漿?:選擇EDTA、肝素鈉或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,2-8℃條件下離心20分鐘(2000-3000轉(zhuǎn)/分),收集上清?。
細(xì)胞上清液?:2-8℃條件下離心20分鐘(2000-3000轉(zhuǎn)/分),收集上清?。
組織勻漿?:稱取1g組織,加入9g PBS(pH 7.2-7.4),勻漿后離心20分鐘(2000-3000轉(zhuǎn)/分),收集上清?。
3. ?實(shí)驗(yàn)步驟?
加樣?:在各孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品各100μL,37℃孵育90分鐘?。
加入生物素化抗體?:加入100μL生物素化抗體工作液,37℃孵育60分鐘?。
洗滌?:洗滌3次?。
加入酶結(jié)合物?:加入100μL酶結(jié)合物工作液,37℃孵育30分鐘?。
洗滌?:洗滌5次?。
加入底物?:加入90μL底物溶液,37℃孵育15分鐘左右?。
終止反應(yīng)?:加入50μL終止液,立即在450nm波長處測量OD值?。
結(jié)果計(jì)算?:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本中PAL的濃度?。
4. ?注意事項(xiàng)?
樣本保存?:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分保存?。
試劑保存?:試劑盒應(yīng)按照說明書要求保存,避免反復(fù)凍融?。
實(shí)驗(yàn)前預(yù)測定?:正式測定之前,建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定?。
5. ?應(yīng)用?
用途?:本試劑盒主要用于科研實(shí)驗(yàn)和課題研究,定量檢測大鼠血清中的PAL濃度?。
以上內(nèi)容綜合了多個(gè)來源的實(shí)驗(yàn)步驟和注意事項(xiàng),確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性?。
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