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            大鼠P450膽固醇側(cè)鏈裂解酶(P450scc)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書(shū)

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              2025年04月02日
            關(guān)鍵詞
            大鼠P450膽固醇側(cè)鏈裂解酶,Elisa試劑盒,標(biāo)準(zhǔn)品,血清,酶標(biāo)板
            上傳者
            本生(天津)健康科技有限公司
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            資料簡(jiǎn)介

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              大鼠P450膽固醇側(cè)鏈裂解酶(P450scc)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書(shū)主要包括以下內(nèi)容:

              BS-3514  大鼠P450膽固醇側(cè)鏈裂解酶(P450scc)ELISA試劑盒

              1. 實(shí)驗(yàn)原理

              該試劑盒采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。通過(guò)抗大鼠P450 scc單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的P450 scc與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠P450 scc,形成免疫復(fù)合物連接在板上。辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,最后加終止液硫酸,在450nm處測(cè)OD值,P450 scc濃度與OD值成正比,可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)求出標(biāo)本中P450 scc濃度?。

              2. 試劑盒組成

              試劑盒包含以下組分(2-8℃保存):

              標(biāo)準(zhǔn)品液

              生物素化的抗大鼠P450 scc

              辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin

              底物工作液

              終止液硫酸?。

              3. 樣本處理及保存

              血清/血漿?:收集后2-8℃保存48小時(shí),更長(zhǎng)時(shí)間需冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融?。

              細(xì)胞培養(yǎng)上清液/組織勻漿?:盡早檢測(cè),保存條件同上?。

              4. 實(shí)驗(yàn)步驟

              準(zhǔn)備試劑?:將試劑移至室溫平衡至少30分鐘?。

              加樣?:分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔和待測(cè)樣本孔,每孔加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣本100μL,37℃溫育2小時(shí)?。

              洗滌?:棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡2分鐘?。

              加生物素標(biāo)記抗體?:每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μL,37℃溫育1小時(shí)?。

              加辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素?:每孔加辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素工作液100μL,37℃溫育1小時(shí)?。

              顯色?:每孔加底物溶液90μL,37℃避光顯色15-30分鐘?。

              終止反應(yīng)?:每孔加終止溶液50μL,終止反應(yīng)?。

              讀板?:用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)定各孔的OD值?。

              5. 注意事項(xiàng)

              避免直接接觸終止液和底物A、B,一旦接觸請(qǐng)盡快用水沖洗?。

              實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品?。

              使用一次性吸頭避免交叉污染?。

              洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水?。

              底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子;底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下?。

              6. 結(jié)果計(jì)算

              通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),根據(jù)OD值計(jì)算樣品中P450 scc的濃度?。

              7. 適用范圍

              該試劑盒適用于體外定量檢測(cè)血清、血漿或其他相關(guān)生物液體中P450 scc的濃度,僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床?。

              以上內(nèi)容綜合了多個(gè)相關(guān)網(wǎng)頁(yè)的信息,確保實(shí)驗(yàn)操作的準(zhǔn)確性和安全性?。

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