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						上海聯(lián)碩生物科技有限公司
            中級會員 | 第17年
            
					
            
				
            
			
            
		
            
	
            
	
	
            
		
            
			
		
            
	
            

            

	
            
		
            
			
			
            
							
            
					
            細(xì)胞培養(yǎng)板和酶標(biāo)板的不同之處2025/05/20
            
					
            
				細(xì)胞培養(yǎng)板1.細(xì)胞培養(yǎng)板不僅有96孔板，規(guī)格多樣，更有平底、U型底、V型底之分，適配不同功能。2.細(xì)胞培養(yǎng)板每個孔的底部透光性能不一致，易對相關(guān)實驗數(shù)據(jù)造成影響。3.細(xì)胞培養(yǎng)板經(jīng)過滅菌處理，可直接用于培養(yǎng)細(xì)胞。板底經(jīng)TC處理，有利于細(xì)胞貼壁培養(yǎng)。4.細(xì)胞培養(yǎng)板的要求較低，只需要符合細(xì)胞培養(yǎng)的條件即可，價格相對較低。酶標(biāo)板1.酶標(biāo)板為96孔，分為可拆卸與不可拆卸，靈活適應(yīng)不同的操作。2.酶標(biāo)板分為透明、白色、黑色三種類型，分別用于酶聯(lián)免疫實驗與化學(xué)發(fā)光實驗。3.酶標(biāo)板每個孔底部厚度相近，吸光度也相
					
            
				
            
								
            
					
            細(xì)胞增殖實驗的方法2025/05/20
            
					
            
				1.MTT法：是一種檢測細(xì)胞存活和生長的方法。該方法已廣泛用于生物活性因子的活性檢測、抗腫瘤藥物篩選、細(xì)胞毒性試驗以及腫瘤放射敏感性測定等。它的特點是靈敏度高、經(jīng)濟(jì)、快捷。原理：活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚（Formazan）并沉積在細(xì)胞中，而死細(xì)胞無此功能。二甲基亞砜（DMSO）能溶解細(xì)胞中的甲瓚，用酶聯(lián)免疫檢測儀在490nm波長處測定其吸光度值，可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi)，MTT結(jié)晶形成的量與細(xì)胞數(shù)成正比。2.CCK-8法:可用于簡
					
            
				
            
								
            
					
            脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法的原理和操作步驟2025/05/09
            
					
            
				一般來說細(xì)胞轉(zhuǎn)染的方法主要包括：電穿孔法、顯微注射、基因槍、磷酸鈣共沉淀法、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法、多種陽離子物質(zhì)介導(dǎo)、病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染等。01脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染方法原理脂質(zhì)體作為體內(nèi)和體外輸送載體的工具，已經(jīng)研究的十分廣泛，用合成的陽離子脂類包裹DNA，同樣可以通過融合而進(jìn)入細(xì)胞。使用脂質(zhì)體將DNA帶入不同類型的真核細(xì)胞，與其它方法相比，有較高的效率和較好的重復(fù)性。中性脂質(zhì)體是利用脂質(zhì)膜包裹DNA，借助脂質(zhì)膜將DNA導(dǎo)入細(xì)胞膜內(nèi)。帶正電的陽離子脂質(zhì)體，DNA并沒有預(yù)先包埋在脂質(zhì)體中，而是帶負(fù)電的DNA自動結(jié)合到
					
            
				
            
								
            
					
            無血清培養(yǎng)基的使用2025/05/06
            
					
            
				目前在大規(guī)模動物細(xì)胞的培養(yǎng)中已經(jīng)普遍適用于無血清培養(yǎng)基。在疫苗生長、單抗和各種生物活性蛋白等生物制品的應(yīng)用領(lǐng)域中，優(yōu)化無血清培養(yǎng)基的成分可使不同的細(xì)胞在最有利于細(xì)胞生長和表達(dá)目的產(chǎn)物的環(huán)境中維持高密度培養(yǎng)，降低生產(chǎn)成本。在人類細(xì)胞培養(yǎng)中，應(yīng)用無血清培養(yǎng)基還能有選擇性地控制及避免成纖維細(xì)胞的過度生長。在無血清培養(yǎng)條件下，某些細(xì)胞的生長量和抗體的產(chǎn)量甚至較有血清時高出數(shù)倍。除生產(chǎn)生物制品外，無血清培養(yǎng)基也被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)、藥理學(xué)、腫瘤學(xué)領(lǐng)域：(1)研究細(xì)胞的分化條件：無血清培養(yǎng)基其組成可以是確
					
            
				
            
								
            
					
            瓊脂糖的特點及其應(yīng)用領(lǐng)域2025/04/29
            
					
            
				瓊脂糖是一種有機(jī)物，化學(xué)式C24H38O19，是一種白色或黃色珠狀凝膠顆?；蚍勰瑸榫€性的多聚物，基本結(jié)構(gòu)是1,3連結(jié)的β-D-半乳糖和1,4連結(jié)的3,6-內(nèi)醚-L-半乳糖交替連接起來的長鏈。瓊脂果膠是由許多更小的分子組成的異質(zhì)混合物。瓊脂糖在水中一般加熱到90℃以上溶解，溫度下降到35-40℃時形成良好的半固體狀的凝膠，這是它具有多種用途的主要特征和基礎(chǔ)。瓊脂糖凝膠性能通常用凝膠強(qiáng)度表示。強(qiáng)度越高，凝膠性能越好。性能：瓊脂糖在水中一般加熱到90℃以上溶解，溫度下降到35-40℃時形成良好的半固
					
            
				
            
								
            
					
            離心管在細(xì)胞復(fù)蘇與轉(zhuǎn)移過程中的功能2025/04/29
            
					
            
				細(xì)胞復(fù)蘇和凍存講究“慢凍快溶”，復(fù)蘇時一定要將凍存在液氮或-80℃中凝固的細(xì)胞凍存液快速融化至37℃，使胞外凍存時的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對細(xì)胞造成損害?！翊蜷_水浴鍋加熱至37℃。●超凈臺上放好離心管（離心管規(guī)格選用15ml的），細(xì)胞培養(yǎng)瓶，移液管，紫外滅菌至少20至30分鐘，吹風(fēng)5至10分鐘除去臭氧?！?7℃預(yù)熱好要復(fù)蘇細(xì)胞的培養(yǎng)液，也可以不用預(yù)熱培養(yǎng)液，根據(jù)細(xì)胞情況選擇?！裣螂x心管中加約5至10ml培養(yǎng)液，從液氮罐或-80℃中取出凍存細(xì)胞，立即將凍存管放入37℃
					
            
				
            
								
            
					
            IMDM培養(yǎng)基的實際用途2025/04/24
            
					
            
				1、細(xì)胞株的培養(yǎng)：所述細(xì)胞株為中國倉鼠卵巢細(xì)胞，且以下簡稱為細(xì)胞；將細(xì)胞以2*105—6*105cells/ml的數(shù)量接種于血清培養(yǎng)基，培養(yǎng)條件為37℃，5%二氧化碳的培養(yǎng)箱，得到細(xì)胞A；測定細(xì)胞A的生長曲線以及加入微量的促生長因子后得到細(xì)胞A的生長曲線；所述促生長因子為促生長劑G-CSF-RCHP，且按0.2—0.4μl/ml添加至血清培養(yǎng)基。2、細(xì)胞的收集：將生長于血清培養(yǎng)基中的細(xì)胞A使用胰酶處理1—5分鐘后，收集細(xì)胞A于15ml的離心管中，1000rpm離心3分鐘，吸入37℃預(yù)熱的10ml
					
            
				
            
								
            
					
            ECL化學(xué)發(fā)光底物（高靈敏度）的操作流程2025/04/24
            
					
            
				ECL化學(xué)化學(xué)發(fā)光底物（超敏）可為使用辣根過氧化物酶（HRP）偶聯(lián)物的免疫印跡實驗提供明亮的信號和低皮克級檢測靈敏度。該ECL底物能夠兼容各種膜、封閉液和寬范圍抗體稀釋液，以出色性能、通用性和高性價比，滿足用戶的免疫印跡應(yīng)用需求。操作步驟：1、執(zhí)行常規(guī)SDS-PAGE、轉(zhuǎn)模和WesternBlot步驟。注意用HRP標(biāo)記lgG或用一抗-鏈親和素-生物素-HRP夾法。2、WesternBlot最后一次洗模的同時配置發(fā)光工作液：分別取等體積的A液和B液，放入干凈容器中混合（注意吸取A液和B液的吸頭一定
					
            
				
            
								
            
					
            酵母蛋白胨的特點及其在蛋白胨應(yīng)用中的優(yōu)勢2025/04/15
            
					
            
				酵母蛋白胨的優(yōu)勢：動植物源蛋白胨是市場中主要的蛋白胨，對于比較粗放的發(fā)酵，該類產(chǎn)品具有一定的優(yōu)勢。但隨著酵母要求逐漸精細(xì)化、標(biāo)準(zhǔn)化后，這類蛋白胨的弊端逐漸暴露出來。動植物生長的環(huán)境及一些外在因素，可能造成動植物生長狀態(tài)的波動，進(jìn)而造成其體內(nèi)蛋白含量波動，并且蛋白的儲存、提取和加工體系基本是開放的，可能會造成原料品質(zhì)的變化（如變色、腐敗等）和營養(yǎng)成分的差異，最終導(dǎo)致蛋白胨產(chǎn)品質(zhì)量的不穩(wěn)定，以此為原料，勢必會影響發(fā)酵生產(chǎn)的穩(wěn)定性；動物源蛋白凍可能存在致病性和風(fēng)俗禁忌問題，植物性的蛋白胨主要存在過敏性
					
            
				
            
								
            
					
            酶標(biāo)板和細(xì)胞培養(yǎng)板之間的區(qū)別2025/04/10
            
					
            
				什么是酶標(biāo)板，它是一種配合在酶標(biāo)儀上，用來做酶聯(lián)免疫實驗的器材。雖然它看上去只是一塊普通的有孔的塑料板，但是在酶免疫測定中卻是一個部分。酶聯(lián)免疫吸附實驗，簡稱ELISA，是酶免疫測定技術(shù)中應(yīng)用技術(shù)。其基本方法是將已知的抗原或者抗體吸附在固相載體表面，并保持其免疫活性。然后抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體，這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在測定時，把受檢標(biāo)本（測定其中的抗體或抗原）和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的
					
            
				
            
								
            
					
            巴氏吸管的特點及用途2025/04/10
            
					
            
				巴氏吸管是一種兩端開口的由透明高分子材料聚乙烯制作而成的吸管也稱巴斯德吸管、轉(zhuǎn)液管、吸液管巴氏吸管的特點：1.精選醫(yī)用級LDPE原料制成，適用于少量液體的吸取和轉(zhuǎn)移。2.表面張力優(yōu)化處理，液體的流動性強(qiáng)，更易于操作。3.透明度好，便于觀察。4.具有一定的彈塑性，可以在一定的角度內(nèi)彎曲，有利于進(jìn)入微量貨異性容器進(jìn)行取液或加液等操作。5.彈性好，不易破裂，適用于快速移液。6.使用方便，準(zhǔn)確可靠，滴量的可重復(fù)性好。7.管端可熱封，用于少量液體的運送。巴氏吸管的用途：主要用于細(xì)胞試驗、臨床試驗、克隆試驗
					
            
				
            
								
            
					
            電泳緩沖液具有哪些特性2025/04/01
            
					
            
				電泳緩沖液是核酸、蛋白質(zhì)凝膠電泳系統(tǒng)的一個重要組成，是電泳場中的導(dǎo)體，也是維持電泳系統(tǒng)恒定pH值的必要條件。常見的核酸電泳緩沖液有:TAE、TBE、TPE和MOPS等。電泳緩沖液的特點：1.TAE是使用的緩沖系統(tǒng)。其特點是超螺旋在其中電泳時更符合實際相對分子質(zhì)量(TBE中電泳時測出的相對分子質(zhì)量會大于實際分子質(zhì)量)，且雙鏈線狀DNA在其中的遷移率較其他兩種緩沖液快約10%，電泳大于13kb的片段時用TAE緩沖液將取得更好的分離效果，此外，回收DNA片段時也易用TAE緩沖系統(tǒng)進(jìn)行電泳。TAE的缺點
					
            
				
            
								
            
					
            確保細(xì)胞培養(yǎng)實驗結(jié)果穩(wěn)定的要點2025/03/24
            
					
            
				在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，無菌操作是確保實驗成功的關(guān)鍵步驟之一。細(xì)胞培養(yǎng)的無菌環(huán)境可以有效防止外源性細(xì)菌、真菌和病毒的污染，從而保證細(xì)胞的純度和生長狀態(tài)。本文將介紹無菌操作的重要性，以及一些常用的無菌技術(shù)和注意事項，幫助實驗人員進(jìn)行高質(zhì)量的細(xì)胞培養(yǎng)。無菌操作的重要性細(xì)胞培養(yǎng)實驗的成功與否直接依賴于細(xì)胞的純度和生長狀態(tài)。任何微小的污染都可能導(dǎo)致實驗結(jié)果的偏差或失敗。無菌操作的目的是消除和預(yù)防細(xì)胞培養(yǎng)過程中的污染，確保細(xì)胞的純度和生長環(huán)境的穩(wěn)定性。通過無菌操作，我們可以盡可能減少以下問題的出現(xiàn)：外源性細(xì)菌、
					
            
				
            
								
            
					
            細(xì)胞培育所需求的8大基本條件2025/03/24
            
					
            
				1.溫度細(xì)胞溫度過低時細(xì)胞成長緩慢甚至不成長。利用冷凍保藏細(xì)胞可保持細(xì)胞的原有割裂分解能力。溫度過高導(dǎo)致細(xì)胞。這主要是由酶和蛋白質(zhì)所需求的適溫度決定的。大都生物大分子遇到高溫后簡單導(dǎo)致空間結(jié)構(gòu)改動或者喪失（變性）。細(xì)胞膜遇到高溫后簡單變化。2.pH過酸或過堿可導(dǎo)致細(xì)胞。這主要與蛋白質(zhì)的變性和細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)受損有關(guān)。3.透壓細(xì)胞內(nèi)外可溶于水的物質(zhì)份額和品種決定細(xì)胞的脹大與收縮程度，因為細(xì)胞膜是半透膜，只允許對自己有利的物質(zhì)經(jīng)過。4.細(xì)胞養(yǎng)物養(yǎng)分物和水一同，又名細(xì)胞培育液，培育液中含有細(xì)胞增殖和成長所
					
            
				
            
								
            
					
            TRIZOL法如何提取細(xì)胞中的總RNA2025/03/18
            
					
            
				RIZOL是一種總RNA抽提試劑，TRIZOL在破碎和溶解細(xì)胞時能保持RNA的完整性，是最常見的RNA提取方法之一。實驗試劑及原理：（1）TRIZOL含有苯酚、異硫氰酸胍等物質(zhì)，能迅速破碎細(xì)胞并抑制細(xì)胞釋放出的核酸酶。TRIZOL的主要成分是苯酚。TRIZOL在破碎和溶解細(xì)胞時能保持RNA的完整性，因此常用于對純化RNA及標(biāo)準(zhǔn)化RNA的生產(chǎn)。（2）氯仿：其作為有機(jī)溶劑可以快速破壞細(xì)胞、使內(nèi)容物釋放、去除勻漿中的脂溶性雜質(zhì)；可以抑制RNA酶的活性，并使蛋白質(zhì)變性，易于通過離心去除。（3）異丙醇：用
					
            
				
            
								
            
					
            馬血清在細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域的作用2025/03/06
            
					
            
				馬血清是采用健康馬血液為原料，經(jīng)無菌采集、分離、微孔過濾后而成，性狀為澄清液體，無噬菌體、低內(nèi)毒素，無溶血無異物無細(xì)菌真菌支原體霉形體衣原體等，促細(xì)胞生長繁殖效果好，在細(xì)胞實驗中是常用的試劑。以下是馬血清在細(xì)胞生物學(xué)中的作用：1、馬血清可用于細(xì)胞培養(yǎng)或誘導(dǎo)樹突狀細(xì)胞，且細(xì)胞生長、增殖狀況良好。有研究人員分別用胎牛血清和馬血清培養(yǎng)馬單核細(xì)胞來產(chǎn)生樹突狀細(xì)胞（eqMoDC），結(jié)果發(fā)現(xiàn)，馬血清馬血清生成的eqMoDC與FBS生成的eqMoDC沒有區(qū)別。然而，與馬血清補充培養(yǎng)基一起孵育的eqMoDC在從
					
            
				
            
								
            
					
            透析袋的使用方法2025/02/25
            
					
            
				透析袋的選擇1，正確選擇合適的截留分子量截留分子量的選擇是以預(yù)留在膜內(nèi)的大分子的分子量和將要被除去的小分子污染物的分子量為基礎(chǔ)的。為達(dá)到合理有效的分離，需分離的兩種物質(zhì)分子量的比率至少為25，選擇截留分子量的經(jīng)驗法則：選擇截留分子量值約為要保留的大分子分子量的一半，以獲得至少90%的保留率。2，正確選擇扁平寬度透析袋扁平寬度的選擇取決于樣品體積和透析容量。較小的透析管透析更快；較大的透析管因擴(kuò)散距離較長透析較慢。為易于使用，建議使用總長（包括閉合夾和頂部空間）為大約10-15厘米的透析袋。3，透
					
            
				
            
								
            
					
            聚合酶鏈反應(yīng)2025/02/19
            
					
            
				PCR由變性–退火–延伸三個基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：①模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備;②模板DNA與引物的退火(復(fù)性)：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結(jié)合;③引物的延伸：DNA模板–引物結(jié)合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP為反應(yīng)原料，靶序列為模板，按堿基配對與半保留復(fù)制原理，合成一條新的與模板DNA鏈互補的半保留
					
            
				
            
								
            
					
            姬姆薩染色法的操作步驟及注意事項2025/02/10
            
					
            
				操作步驟：1、滴加姬姆染色液A液（0.5-0.8ml）于涂片上，并讓染液覆蓋整個標(biāo)本涂色片染色1分鐘。2、將姬姆薩染色液B液滴加于A液上面（滴加之量為A液的2-3倍）以洗耳球吹出微風(fēng)使液面產(chǎn)生漣漪狀，使兩液充分混合，染色3-10分鐘。3、水洗（沖洗時不能先倒掉染液，應(yīng)以流水沖去，以防有沉渣沉淀在標(biāo)本上）。4、干燥，鏡檢。注意事項：1、染色時間要視何種標(biāo)本，涂片薄厚，有核細(xì)胞多少，何種細(xì)胞及溫室等而定；通常染血液涂片時滴加B液后染1-3分鐘即可，染骨髓片則應(yīng)不少于5分鐘。2、做骨髓涂片時因為骨髓纖
					
            
				
            
								
            
					
            ELISA實驗前務(wù)必注意事項2025/02/05
            
					
            
				目前很多人在訂購ELISA試劑盒的時候會問到一些關(guān)于試劑盒的實驗操作步驟及應(yīng)注意的哪些問題，下面我司針對一些初學(xué)者，將ELISA實驗前的注意事項做了一份報告如下：請大家在實驗前務(wù)必注意。1、仔細(xì)閱讀說明書2、檢查試劑盒標(biāo)簽上的有效期。如果超過有效期，請勿使用。3、按說明書確定所有試劑齊全（數(shù)量、體積）4、標(biāo)本制備要規(guī)范，每份標(biāo)本體積要按2-3個復(fù)孔以上的量制備（貯存），盡量分裝做備份。短期內(nèi)無法實驗者，注意低溫保存5、準(zhǔn)備好所有實驗額外所需物品，（比如移液器，試管，清洗器，酶標(biāo)儀）6、按說明書將
					
            
				
            
							
				
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