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						上?？撇┤鹕锟萍加邢薰?div   id="v5vpxxr"   class="member-level">中級(jí)會(huì)員 | 第4年
            
					
            
				
            
			
            
		
            
	
            
	
	
            
		
            
			
		
            
	
            


	
            
		
            
			
			
            
							
            
					
            影響細(xì)胞株凍存的因素2023/03/10
            
					
            
				你們細(xì)胞是怎么凍存的?求解!!!我的是4度冰箱放半小時(shí),-20度冰箱半小時(shí),然后轉(zhuǎn)移到-80度冰箱!但是放在-80度冰箱1個(gè)月后,細(xì)胞復(fù)蘇就感覺(jué)狀態(tài)不太好了!!做實(shí)驗(yàn)前要先學(xué)會(huì)凍存，以備自己在后面的實(shí)驗(yàn)中能保持同一來(lái)源、穩(wěn)定可靠的細(xì)胞，且可減少污染或其它不利影響。影響凍存細(xì)胞活性的因素1、細(xì)胞凍存保護(hù)劑：常用的有二甲基亞砜（DMSO）和甘油，常用的濃度為5%-10%（90%小牛血清）。DMSO對(duì)二倍體細(xì)胞的毒性較甘油小。2、細(xì)胞懸液的凍結(jié)速度：慢凍時(shí)冰凍在細(xì)胞外形成，因此不致?lián)p害細(xì)胞。多數(shù)細(xì)胞以
					
            
				
            
								
            
					
            我司ELISA試劑盒產(chǎn)品用處大講解2023/03/10
            
					
            
				ELISA試劑盒用處：使用定性?shī)A心免疫檢測(cè)技術(shù)，用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條，這些多肽是我國(guó)型HEVdu株中心氨基酸序列中抗原性很強(qiáng)的肽段，分別來(lái)自于該du株的開(kāi)放閱讀框2和開(kāi)放閱讀框3。將樣品或規(guī)范品參加孔中并孵育，假如其中存在HEVIgM抗體，這些抗體就會(huì)與HEV的多肽抗原結(jié)合，并固定在上面，洗板除掉其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后參加羊抗人IgM-HRP（辣根過(guò)氧化物酶）酶結(jié)合物，經(jīng)第二次孵育后，酶結(jié)合物就會(huì)與*次孵育結(jié)合上的HEVIgM抗體相結(jié)合，洗板除掉未結(jié)合的酶結(jié)合物
					
            
				
            
								
            
					
            使用小鼠麥胚凝集素elisa試劑盒需要注意這些因素2023/03/09
            
					
            
				小鼠麥胚凝集素elisa試劑盒是一種常見(jiàn)的生物分析試劑盒，它能夠通過(guò)檢測(cè)樣品中特定的蛋白質(zhì)、抗體等分子來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)生物體系的分析和檢測(cè)。但是，在使用ELISA試劑盒時(shí)也需要注意一些事項(xiàng)，以確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。1、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備在進(jìn)行ELISA實(shí)驗(yàn)前，需要對(duì)小鼠麥胚凝集素elisa試劑盒進(jìn)行充分的準(zhǔn)備工作。首先，需要核對(duì)試劑盒的使用說(shuō)明書(shū)，了解試劑盒中各種試劑的性質(zhì)、用途、儲(chǔ)存條件等信息。其次，需要對(duì)試劑盒中的試劑進(jìn)行充分的混勻，以確保試劑的均勻性和穩(wěn)定性。最后，需要對(duì)實(shí)驗(yàn)設(shè)備、試劑管、移液器等實(shí)驗(yàn)
					
            
				
            
								
            
					
            蛋白保存方法詳解2023/03/07
            
					
            
				生物大分子的貯藏保存可分為干態(tài)和液態(tài)貯藏兩種。蛋白質(zhì)失活受多種理化因素的影響，主要有空氣、溫度、水分、光線、酸堿度、樣品狀態(tài)、微生物活動(dòng)、保存時(shí)間和容器等。這些因素可單獨(dú)起作用，但更多情況是協(xié)同作用?？偟膩?lái)說(shuō)，蛋白質(zhì)的保存主要考慮其構(gòu)型穩(wěn)定、活性中心的保護(hù)、避免輔助因子喪失等，以防止其變性、解聚或降解。由于溫度和水分對(duì)蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性影響很大，故蛋白質(zhì)最好是低溫、冷凍或冷凍干燥后低溫干燥保存。1.液態(tài)保存（1）．在低溫下保存蛋白質(zhì)對(duì)熱敏感，溫度越高，穩(wěn)定性越差。因此，低溫保存蛋白質(zhì)溶液在絕大多數(shù)情
					
            
				
            
								
            
					
            ELISA試劑盒(酶聯(lián)免疫分析測(cè)試法)實(shí)驗(yàn)操作中常見(jiàn)問(wèn)題分析（三）2023/02/22
            
					
            
				(4)顯色和比色TMB經(jīng)HRP作用后，約40分鐘顯色達(dá)ding峰，隨即逐漸減弱，至2小時(shí)后即可wan全消退至無(wú)色。TMB的終止液有多種，疊氮鈉和十二烷基硫酸鈉(SDS)等酶抑制劑均可使反應(yīng)終止。這類(lèi)終止劑尚能使藍(lán)色維持較長(zhǎng)時(shí)間(12-24小時(shí))不褪，是目視判斷的良好終止劑。此外，各類(lèi)酸性終止液則會(huì)使藍(lán)色轉(zhuǎn)變成黃色，此時(shí)可用特定的波長(zhǎng)(450nm)測(cè)讀吸光值。酶標(biāo)比色儀簡(jiǎn)稱(chēng)酶標(biāo)儀，通常指專(zhuān)用于測(cè)讀ELISA結(jié)果吸光度的光度計(jì)。酶標(biāo)儀的主要性能指標(biāo)有：測(cè)讀速度、讀數(shù)的準(zhǔn)確性、重復(fù)性、精確度和可測(cè)范圍
					
            
				
            
								
            
					
            ELISA試劑盒(酶聯(lián)免疫分析測(cè)試法)實(shí)驗(yàn)操作中常見(jiàn)問(wèn)題分析（二）2023/02/17
            
					
            
				(3)操作技術(shù)的影響操作過(guò)程的控制：1嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30～60min。2加樣后及時(shí)放人孵箱。標(biāo)本較多時(shí)，要分批操作。按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間，防止孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)?，難以清洗che底。3封板溫育時(shí)，各孔一定要封嚴(yán)，防止陽(yáng)性標(biāo)本的液體蒸發(fā)，產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。4用洗板機(jī)洗板時(shí)，保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干：還要防止針口有纖維蛋白或異物，這些異物在洗板的
					
            
				
            
								
            
					
            ELISA試劑盒(酶聯(lián)免疫分析測(cè)試法)實(shí)驗(yàn)操作中常見(jiàn)問(wèn)題分析（一）2023/02/11
            
					
            
				由于ELISA(酶聯(lián)免疫試驗(yàn))具有靈敏度較高、特異性好的特點(diǎn)，已廣泛應(yīng)用于各種傳染性疾病的篩查如肝炎、愛(ài)滋、優(yōu)生優(yōu)育等。雖然洗板只是ELISA實(shí)驗(yàn)重要環(huán)節(jié)中的一個(gè)，但作為專(zhuān)業(yè)的洗板機(jī)生產(chǎn)廠家，我們必須對(duì)影響ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果各因素有一定的認(rèn)識(shí)。優(yōu)質(zhì)的試劑，良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。如不注意，就易出現(xiàn)白板、花板、色弱和假陽(yáng)性等現(xiàn)象。尤其是花板現(xiàn)象(就是空白、陰性、陽(yáng)性對(duì)照以及室內(nèi)質(zhì)控孔結(jié)果正常，而標(biāo)本孔的OD值卻明顯偏高)是各個(gè)廠家洗板機(jī)調(diào)試中經(jīng)常遇到的問(wèn)題
					
            
				
            
								
            
					
            人血ELISA試劑盒的有效期是多久？2023/02/09
            
					
            
				人血ELISA試劑盒將人血幼素(HJV)抗體包被于96孔微孔板中，制成固相載體，向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本，其中的人血幼素(HJV)與連接于固相載體上的抗體結(jié)合，然后加入生物素化的人血幼素(HJV)抗體，將未結(jié)合的生物素化抗體洗凈后，加入HRP標(biāo)記的親和素，再次洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，井在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。顏色的深淺和樣品中的人血幼素(HJV)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(0.D.值)，計(jì)算樣品濃度。人血ELISA試劑盒的有效期是多
					
            
				
            
								
            
					
            凝血酶的作用2023/02/06
            
					
            
				凝血酶又叫做凝血酵素，為白色或類(lèi)白色的凍干塊狀物或粉末。是一種由凝血酶前體(血漿中的必要成分)形成的蛋白質(zhì)水解酶,催化纖維蛋白元變成纖維蛋白而促使血液凝固。用于毛細(xì)血管出血的局部止血以及外科手術(shù)后組織愈合。凝血酶能使纖維蛋白原轉(zhuǎn)化成纖維蛋白。局部應(yīng)用后作用于病灶表面的血液很快形成穩(wěn)定的凝血kuai，用于控制毛細(xì)血管、靜脈出血，或作為皮膚、組織移植物的黏合、固定劑。pH＜5時(shí)失效。凝血酶對(duì)血液凝固系統(tǒng)的其他作用尚包括誘發(fā)血小板聚集及繼發(fā)釋放反應(yīng)等。每1ml中含500單位的0.9%氯化鈉溶液微顯渾濁
					
            
				
            
								
            
					
            DTT（二硫蘇糖醇）的作用2023/01/31
            
					
            
				DTT（二硫蘇糖醇）的作用DTT即DL-Dithiothreitol，中文名為二硫蘇糖醇。分子式為C4H10O2S2，分子量為154.25，。常用還原劑，有抗氧化作用。DTT和巰基乙醇相比，作用相似，但DTT的刺激性氣味要小很多，毒性也比巰基乙醇低很多。而且DTT比巰基乙醇的濃度低7倍時(shí)，兩者效果相近。DTT的特性：DTT是一種很強(qiáng)的還原劑，其還原性很大程度上是由于其氧化狀態(tài)六元環(huán)（含二硫鍵）的構(gòu)象穩(wěn)定性。它的氧化還原電勢(shì)在pH為7時(shí)為-0.33伏。由于容易被空氣氧化，因此DTT的穩(wěn)定性較差；但
					
            
				
            
								
            
					
            大鼠Bcl-2試劑盒選型和使用時(shí)要注意些什么？2023/01/09
            
					
            
				大鼠Bcl-2試劑盒的產(chǎn)品選型要注意這幾點(diǎn)：1、是檢測(cè)抗體還是抗原。（1）檢測(cè)抗原常用于檢測(cè)抗原的方法是非競(jìng)爭(zhēng)性的雙抗體夾心法，其次是競(jìng)爭(zhēng)法，但競(jìng)爭(zhēng)法在具體實(shí)驗(yàn)中有些困難;特別是檢測(cè)微生物的抗原，因?yàn)槠湫铇?biāo)記抗原，對(duì)于某些抗原很難做到甚至是不可能的。在競(jìng)爭(zhēng)法中，沒(méi)標(biāo)記的抗原與標(biāo)本直接混合在一起，許多標(biāo)本中含有酶抑制劑或蛋白A樣物質(zhì)（例如糞便），可影響elisa結(jié)果。（2）檢測(cè)抗體檢測(cè)抗體種類(lèi)常用的方法是檢測(cè)抗體種類(lèi)的捕獲法，這個(gè)方法用于檢測(cè)特異性IgG,IgA盒IgM。這個(gè)方法的是因相捕獲的抗體
					
            
				
            
								
            
					
            凍存過(guò)的全血為什么不建議再拿來(lái)做ELISA實(shí)驗(yàn)2023/01/09
            
					
            
				很多ELISA實(shí)驗(yàn)新手客戶都會(huì)咨詢我司技術(shù)能否把全血提取出來(lái)放-70℃條件保存，等實(shí)驗(yàn)開(kāi)展了（比如一個(gè)月左右的時(shí)間）再離心全血取血清或者血漿做ELISA實(shí)驗(yàn)？這種做法我司技術(shù)都是持反對(duì)建議的。與此同時(shí)，也是明確要求我司銷(xiāo)售人員在與客戶售前溝通時(shí)建議老師全血樣本提取好了應(yīng)該及時(shí)離心出血清或者血漿。并要求-70℃條件下保存，如果一個(gè)月左右可以開(kāi)展實(shí)驗(yàn)可以-20℃保存，期間不能反復(fù)凍融。至于凍存后的全血不可以再提取血清、血漿樣本來(lái)做elisa的具體原因如下：1.全血凍存后解凍，用常規(guī)離心方式提取血清仍
					
            
				
            
								
            
					
            酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）基本原理2023/01/03
            
					
            
				一、基本原理1971年Engvall和Perlmann發(fā)表了酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定（enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）用于IgG定量測(cè)定的文章，使得1966年開(kāi)始用于抗原定位的酶標(biāo)抗體技術(shù)發(fā)展成液體標(biāo)本中微量物質(zhì)的測(cè)定方法。這一方法的基本原理是：①使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性。②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體，這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí)，把受檢標(biāo)本（測(cè)定其中的抗體或抗原）和酶標(biāo)抗原或抗體按不同
					
            
				
            
								
            
					
            常用中性紅染色液的濃度及作用2022/12/27
            
					
            
				不同濃度中性紅染色液的區(qū)別中性紅(Neutralred)，學(xué)名“3-氨基-7-甲氨基-2-甲基吩嗪鹽酸鹽”，深綠色、棕色或淺黑色粉末。溶解度為水4.0%，無(wú)水乙醇1.8%，乙二醇yi醚3.75%，乙二醇3.0%；幾乎不溶于二甲苯，其水溶液或乙醇溶液呈紅色是細(xì)胞活體染色和酸堿性指示劑的一種堿性吩嗪染料。細(xì)胞染色原理：中性紅是一種弱堿性pH指示劑，變色范圍pH6.4～8.0之間（由紅變黃）。在中性或微堿性環(huán)境中，植物的活細(xì)胞能大量吸收中性紅并向液泡中排泌，由于液泡在一般情況下呈酸性反應(yīng)，因此，進(jìn)入液
					
            
				
            
								
            
					
            科博瑞淺談PCR試劑盒的使用2022/12/20
            
					
            
				PCR檢測(cè)步驟1.將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；2.待測(cè)樣本與步驟1所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。其中步驟1為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上
					
            
				
            
								
            
					
            科博瑞平板計(jì)數(shù)簡(jiǎn)便方法2022/12/14
            
					
            
				細(xì)菌計(jì)數(shù)細(xì)菌細(xì)胞計(jì)數(shù)是建立或監(jiān)測(cè)細(xì)菌生長(zhǎng)速度、確定種群倍增時(shí)間所必需的。細(xì)菌培養(yǎng)物可以通過(guò)測(cè)定活細(xì)胞數(shù)來(lái)確定，活細(xì)胞數(shù)是每mL的菌落形成單位數(shù)(CFU/mL)，或者通過(guò)使用分光光度計(jì)測(cè)量600nm處的光密度（OD600）來(lái)間接分析細(xì)胞總數(shù)。必須指出的是，細(xì)菌的生長(zhǎng)速度和培養(yǎng)要求在不同菌種之間可能有很大的差異，因此很難用同一種方式量化所有的細(xì)菌。下面，科博瑞提供了一個(gè)關(guān)于如何確定細(xì)菌細(xì)胞計(jì)數(shù)的一般程序。活體計(jì)數(shù)：為了計(jì)數(shù)細(xì)菌懸浮液中的CFU，從活躍的細(xì)菌液體培養(yǎng)物中吸取一定的體積在適當(dāng)?shù)囊后w介質(zhì)中
					
            
				
            
								
            
					
            大鼠（Rat）蘇氨酸（Threonine）ELISA檢測(cè)試劑盒簡(jiǎn)介2022/12/09
            
					
            
				檢測(cè)原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被蘇氨酸（Threonine）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并徹di洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的蘇氨酸（Threonine）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），計(jì)算樣品濃度。樣品收集、處理及保存方法1.血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3
					
            
				
            
								
            
					
            小鼠麥胚凝集素elisa試劑盒操作注意事項(xiàng)2022/12/07
            
					
            
				小鼠麥胚凝集素elisa試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)，已知待測(cè)物質(zhì)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將待測(cè)物質(zhì)和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育，洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。顏色的深淺和樣品中待測(cè)物質(zhì)的濃度呈比例關(guān)系。1、靈敏度:最小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2、特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3、重復(fù)性:板內(nèi)、板間變
					
            
				
            
								
            
					
            植物細(xì)胞色素P450（CYP450）試劑盒使用說(shuō)明書(shū)，科博瑞品牌2022/12/07
            
					
            
				檢測(cè)范圍：96T25IU/L-800IU/L使用目的：本試劑盒用于測(cè)定植物組織，細(xì)胞及其它相關(guān)樣本中細(xì)胞色素P450（CYP450）活性。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中植物細(xì)胞色素P450（CYP450）水平。用純化的植物細(xì)胞色素P450（CYP450）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入細(xì)胞色素P450（CYP450），再與HRP標(biāo)記的細(xì)胞色素P450（CYP450）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的
					
            
				
            
								
            
					
            科博瑞告訴你酶聯(lián)免疫試劑盒操作的通用的規(guī)則2022/12/02
            
					
            
				酶聯(lián)免疫試劑盒是較普遍常用的藥物殘留檢測(cè)方法，與儀器分析技術(shù)相比具有快速、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確和靈敏度高等特點(diǎn)，但對(duì)實(shí)驗(yàn)操作條件的要求比較嚴(yán)格。實(shí)驗(yàn)條件主要由實(shí)驗(yàn)室的操作環(huán)境和操作人員的操作熟練程度兩方面組成，但ELISA試劑盒對(duì)實(shí)驗(yàn)室操作環(huán)境的要求是幾種藥物殘留檢測(cè)方法中相對(duì)較低的。由于大部分的試驗(yàn)操作步驟都是由實(shí)驗(yàn)人員來(lái)完成的，人為的誤差相對(duì)嚴(yán)重一些。本人結(jié)合幾年的工作實(shí)踐介紹一下進(jìn)行ELISA操作的時(shí)候應(yīng)該注意的問(wèn)題。酶聯(lián)免疫試劑盒操作的通用的規(guī)則1.要確保微量加樣器的準(zhǔn)確性，可以使用蒸餾水和電子天
					
            
				
            
							
				
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