化工儀器網(wǎng)>產(chǎn)品展廳>試劑標(biāo)物>行業(yè)專用試劑>生化與分子生物學(xué)用試劑>CA1020-20 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒ANNEXIN V-FITC/PI
CA1020-20 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒ANNEXIN V-FITC/PI
- 公司名稱 北京索萊寶科技有限公司
- 品牌 SOLARBIO/索萊寶
- 型號(hào) CA1020-20
- 產(chǎn)地 北京市通州區(qū)馬駒橋鎮(zhèn)聯(lián)東U谷中區(qū)85A三層
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2024/8/19 17:23:58
- 訪問(wèn)次數(shù) 2661
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免疫學(xué)產(chǎn)品，抗體，elisa試劑盒，染色液，分子生物學(xué)產(chǎn)品，細(xì)胞分離液，細(xì)胞凋亡，細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)產(chǎn)品，
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 20T/50T/100T |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | CA1020 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
| 主要用途 | 可以將凋亡早期的細(xì)胞和晚期的細(xì)胞區(qū)分開來(lái) |
細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒ANNEXIN V-FITC/PI
貨號(hào)： CA1020
規(guī)格： 20T/50T/100T
保存：貯存于 2-8°C，復(fù)檢期為一年。建議 Annexin V-FITC 打開后，分裝成小份凍存于-20°C。
產(chǎn)品說(shuō)明：細(xì)胞凋亡是細(xì)胞的基本特征之一，在機(jī)體的胚胎發(fā)育、組織修復(fù)、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定等方面都起到十分重要
的作用。 Annexin V 是一種分子量為 35.8 KD 的 Ca2+
依賴性磷脂結(jié)合蛋白，能與細(xì)胞凋亡過(guò)程中翻轉(zhuǎn)到膜外的
磷脂酰絲氨酸（Phosphatidylserine, PS）高親和力特異結(jié)合。FITC-Annexin V 結(jié)合到凋亡細(xì)胞后，在藍(lán)色光的
激發(fā)下，發(fā)出綠色熒光，區(qū)分出凋亡細(xì)胞與正常細(xì)胞。碘化丙啶（Propidium iodide，PI）是一種核酸染料，
它不能穿透完整細(xì)胞膜，但對(duì)凋亡晚期細(xì)胞和死細(xì)胞的破損細(xì)胞膜能夠穿透，并使細(xì)胞核紅染。將
FITC-Annexin V 與 PI 匹配使用，可以將凋亡早期的細(xì)胞和晚期的細(xì)胞區(qū)分開來(lái)。
細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒ANNEXIN V-FITC/PI操作步驟:
1. 調(diào)整待測(cè)細(xì)胞的濃度為 5×10五次方-1×10六次方個(gè)/ml。
2. 取 1ml 細(xì)胞，1000rpm，4℃離心 10 分鐘，棄上清。
3. 加入 1ml 預(yù)冷的 PBS，輕輕震蕩使細(xì)胞懸浮，1000rpm，4℃離心 10 分鐘，棄上清（對(duì)于貼壁細(xì)胞，先用胰酶消化，再用 PBS 洗滌）。
4. 重復(fù)步驟 3 兩次。
5. 將細(xì)胞重懸于 200µl Binding Buffer。
6. 加入 10µl Annexin V-FITC 和 10µl PI，輕輕混勻，避光室溫反應(yīng) 15 分鐘 或 4℃反應(yīng) 30 分鐘。
7. 加入 300µl Binding Buffer，在 1 小時(shí)內(nèi)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)。
8. 若用熒光顯微鏡檢測(cè)，將細(xì)胞混合液離心，取細(xì)胞沉淀涂片，再進(jìn)行觀察。
注意事項(xiàng): : : :
為保證得到理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果在使用此試劑盒之前請(qǐng)認(rèn)真閱讀該注意事項(xiàng)。
1.旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體甩管底，避免開蓋時(shí)液體灑落。
2.Annexin V-FITC 和 Propidium iodide 是光敏物質(zhì)，在保存與操作時(shí)請(qǐng)注意避光。
3.Propidium iodide（PI）能通過(guò)皮膚吸收，對(duì)眼睛有刺激作用。
4.在細(xì)胞洗滌的后一步，請(qǐng)盡量將上清棄凈，以免 PBS 殘留影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
5.PI 染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高，建議行 Annexin V-FITC 染色，上機(jī)前 5 分鐘再
加入 PI 染色。
產(chǎn)品內(nèi)容: :: : CA1020-20 CA1020-50 CA1020-100
Annexin V-FITC 200µl 500µl 1000µl
Binding Buffer 12ml 30ml 60ml
Propidium iodide(PI) 200µl 500µl 1000µl
6.整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔，勿用力吹打細(xì)胞，盡量在 4℃下操作。
7.反應(yīng)完畢后請(qǐng)盡快檢測(cè)，因?yàn)榧?xì)胞凋亡是一個(gè)動(dòng)態(tài)的過(guò)程，反應(yīng) 1 小時(shí)后熒光強(qiáng)度就開始衰變。
8.成功的檢測(cè)凋亡受以下幾種因素的影響，如細(xì)胞類型、細(xì)胞膜上 PS 的密度、發(fā)生凋亡時(shí) PS 翻轉(zhuǎn)的比
例、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的方法、所用試劑、誘導(dǎo)凋亡的時(shí)間等，把這些影響因素進(jìn)行優(yōu)化對(duì)實(shí)驗(yàn)成功是非常必要
的。
此試劑盒僅供科研使用。
相關(guān)產(chǎn)品：
P1020 1×PBS，PH7.2-7.4，0.01M
T1300 胰蛋白酶－EDTA 消化液(0.25%)不含酚紅
T1350 胰蛋白酶消化液(0.25%)不含酚紅
24800 通用細(xì)胞凍存液
12100 DMEM(H)
31800 RPMI Medium 1640
CA1040 一步法 TUNEL 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(FITC)
S1056 細(xì)胞凋亡熒光 Hoechst 33342-PI 雙染試劑盒
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