產(chǎn)品名稱：小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)ELISA試劑盒

檢測(cè)方法： ELISA酶聯(lián)免疫法
測(cè)試種屬：人、大小鼠、豚鼠、兔子、牛、羊、豬、雞、鴨elisa試劑盒等種屬
保存條件：2~8℃，*溫度6攝氏度，有效期6個(gè)月。
產(chǎn)品產(chǎn)地：進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)
產(chǎn)品庫(kù)存：現(xiàn)貨供應(yīng)
產(chǎn)品性狀：48T/96T，盒裝液體
品牌：琛藝酶科/進(jìn)口原裝
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm
低檢測(cè)限：歡迎咨詢索取原版說(shuō)明書(shū)
研究領(lǐng)域：炎癥研究、神經(jīng)生物學(xué)、新陳代謝、信號(hào)通路、免疫學(xué)。
注意要點(diǎn)：僅供科研實(shí)驗(yàn)，不得用于其他用途。

elisa試劑盒組成：

注：標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為：120、60、30、15、7.5、0 pg/mL.

小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)ELISA試劑盒樣本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。

2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。

3. 尿液：用無(wú)菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。

試劑盒性能：

1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。

2.批內(nèi)變異系數(shù)與批間變異系數(shù)應(yīng)分別小于10%和15% 。

檢測(cè)范圍：                                              

3.75 pg/mL - 120 pg/mL 

靈敏度：                                              

低檢測(cè)濃度小于0.1 pg/mL

保存條件及有效期：

1.試劑盒保存： 2-8℃。

2．有效期： 6個(gè)月

　　【貨號(hào)】  

　　【品牌】 琛藝酶科

　　【規(guī)格】 48T/96T

　　【單位】 盒

　　【價(jià)格】 電議

　樣品收集:

1.血清：全血樣品于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜后于1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，收集血液的試管應(yīng)為一次性的無(wú)熱原，無(wú)內(nèi)毒素試管。
2.血漿：抗凝劑推薦使用EDTA或肝素，樣品采集后30分鐘內(nèi)于1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測(cè)。避免使用溶血，高血脂樣品。
3.組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測(cè)。
4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：取細(xì)胞培養(yǎng)上清于1000×g離心20分鐘，除去雜質(zhì)及細(xì)胞碎片。取上清檢測(cè)。
5.其它生物樣品：1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)
6.樣品應(yīng)清澈透明，懸浮物應(yīng)離心去除。
7.樣品收集后若在1周內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)的可保存于4℃，若不能及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次使用量分裝，凍存于-20℃(1個(gè)月內(nèi)檢測(cè))，或-80℃（6個(gè)月內(nèi)檢測(cè)），避免反復(fù)凍融。
結(jié)果判斷:
1. 以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo)， OD值為縱坐標(biāo)， 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 如有設(shè)置復(fù)孔，則應(yīng)取其平均值計(jì)算。 以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo)， OD值為縱坐標(biāo)，繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。亦可以O(shè)D值為橫坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為縱坐標(biāo)，繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。
2. 推薦使用專業(yè)的曲線制作軟件，如curve expert 1.3或1.4，在軟件界面既可根據(jù)樣品OD值，由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度，乘以稀釋倍數(shù)；亦可將樣品的OD值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線的擬合方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。 1478. 若樣品OD值高于標(biāo)準(zhǔn)曲線上限，應(yīng)適當(dāng)稀釋后重測(cè)，計(jì)算濃度時(shí)應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)。

9.為什么有的試劑盒是采用競(jìng)爭(zhēng)ELISA法？

小分子抗原或半抗原因?yàn)槿狈勺鲓A心法的兩個(gè)以上的位點(diǎn)，因此不能用雙抗體夾心法進(jìn)行測(cè)定，可以采用競(jìng)爭(zhēng)法。其原理是標(biāo)本中的抗原和固相載體上的抗原競(jìng)爭(zhēng)生物素化抗體上的結(jié)合位點(diǎn)，標(biāo)本中抗原量含量愈多，結(jié)合在固相上的生物素化抗體愈少，高的顯色也愈淺，即顯色深淺與樣本中的抗原濃度成反比。小分子激素等ELISA測(cè)定多用此法。

 ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)操作流程：
稀釋——加樣——溫育——配液——洗滌——加酶——溫育——洗滌——顯色——終止——測(cè)定
1.有質(zhì)量問(wèn)題免費(fèi)包換，合同上注明了的（質(zhì)量問(wèn)題包括運(yùn)輸不當(dāng)，客戶在使用過(guò)程中測(cè)不出結(jié)果，等等?。?/span>
2.全程技術(shù)指導(dǎo).（包括售前的標(biāo)本收集，使用過(guò)程中不明白的地方，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后的數(shù)據(jù)分析，有任何疑問(wèn)，我們技術(shù)都會(huì)即時(shí)給你去電）
3.提供免費(fèi)代測(cè)的服務(wù)。（你只需把標(biāo)本寄過(guò)來(lái)，我們?yōu)槟愎?jié)省時(shí)間，幫你出結(jié)果，原始數(shù)據(jù)，分析數(shù)據(jù)均可提供，一般時(shí)間是5天左右）
4.客戶有任何問(wèn)題，我們都是在一個(gè)工作日之內(nèi)給出解決方案。售后和技術(shù)這一塊都是竭誠(chéng)為客戶服務(wù)！
為什么實(shí)驗(yàn)過(guò)程中孵育、洗滌需要振蕩、如何振蕩。
振蕩孵育使反應(yīng)更充分，振蕩洗滌使背景更干凈。建議使用酶標(biāo)96孔微孔板振蕩器。
孵育過(guò)程振蕩，可以加快、加強(qiáng)抗原抗體分子間的相互碰撞接觸，使得反應(yīng)過(guò)程更加*，OD值通常會(huì)比未振蕩孵育的結(jié)果要高；洗滌過(guò)程振蕩，可以使洗板更干凈，在很大程度上能降低背景值，同時(shí)可以提高試劑盒檢測(cè)的靈敏度，具體操作請(qǐng)參見(jiàn)說(shuō)明書(shū)。