TFPI ELISA?
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- 公司名稱 上海拜力生物科技有限公司
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- 更新時(shí)間 2025/3/17 10:17:26
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TFPI ELISA 技術(shù)介紹
TFPI ELISA，即組織因子途徑抑制物酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定，是一種用于定量檢測(cè)生物樣本中組織因子途徑抑制物（TFPI）含量的重要實(shí)驗(yàn)技術(shù)，在凝血機(jī)制研究、疾病診斷等領(lǐng)域發(fā)揮著關(guān)鍵作用。
此試劑盒 的核心原理基于抗原抗體的特異性結(jié)合。實(shí)驗(yàn)前，先將針對(duì) TFPI 的特異性抗體固定在酶標(biāo)板的微孔表面。當(dāng)加入含有 TFPI 的樣本，如血漿、血清或細(xì)胞培養(yǎng)上清液時(shí)，樣本中的 TFPI 會(huì)與包被抗體特異性結(jié)合。接著，加入酶標(biāo)記的另一種針對(duì) TFPI 的特異性抗體，該抗體與已結(jié)合在包被抗體上的 TFPI 結(jié)合，形成 “包被抗體 - TFPI - 酶標(biāo)抗體” 的夾心結(jié)構(gòu)。隨后添加酶的底物，酶會(huì)催化底物發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生顯色變化，顏色的深淺與樣本中 TFPI 的含量成正比。通過(guò)酶標(biāo)儀測(cè)量吸光度，并與預(yù)先制備的標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)比，就能精確計(jì)算出樣本中 TFPI 的濃度。
在操作過(guò)程中，首先要對(duì)樣本進(jìn)行妥善處理。對(duì)于血漿樣本，需嚴(yán)格按照規(guī)范采集血液，并迅速進(jìn)行抗凝處理，以防止凝血過(guò)程對(duì) TFPI 含量造成影響。處理好樣本后，將包被有抗體的酶標(biāo)板平衡至室溫，依次加入標(biāo)準(zhǔn)品、空白對(duì)照和待測(cè)樣本，在適宜溫度下孵育一段時(shí)間，確保抗原抗體充分結(jié)合。孵育完成后，通過(guò)多次洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)，減少非特異性信號(hào)干擾。之后加入酶標(biāo)抗體，再次孵育，構(gòu)建完整的夾心復(fù)合物。接著加入底物進(jìn)行顯色反應(yīng)，當(dāng)顯色達(dá)到合適程度時(shí)，加入終止液終止反應(yīng)，最后在酶標(biāo)儀上讀取吸光度值，并依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算 TFPI 含量。
此試劑盒 技術(shù)具有諸多優(yōu)勢(shì)。其靈敏度高，能夠檢測(cè)到樣本中極微量的 TFPI，這對(duì)于研究 TFPI 在生理和病理狀態(tài)下的細(xì)微變化至關(guān)重要。特異性強(qiáng)，兩種針對(duì) TFPI 不同表位的抗體極大地降低了與其他蛋白的交叉反應(yīng)，保證檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠。而且該技術(shù)操作相對(duì)簡(jiǎn)便，實(shí)驗(yàn)流程標(biāo)準(zhǔn)化，適合批量樣本檢測(cè)，可重復(fù)性好，不同實(shí)驗(yàn)室間的實(shí)驗(yàn)結(jié)果具有較高可比性。
在應(yīng)用方面，此試劑盒 在凝血機(jī)制研究中用于深入探究 TFPI 在凝血級(jí)聯(lián)反應(yīng)中的調(diào)控作用。在臨床診斷中，檢測(cè)患者血漿中的 TFPI 含量有助于評(píng)估某些出血性或血栓性疾病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)和病情進(jìn)展。例如，在彌散性血管內(nèi)凝血（DIC）患者中，TFPI 水平往往會(huì)發(fā)生顯著變化，通過(guò)檢測(cè) TFPI 可輔助診斷 DIC 并監(jiān)測(cè)病情變化。此外，在心血管疾病研究中，TFPI 與動(dòng)脈粥樣硬化等疾病的發(fā)生發(fā)展相關(guān)，該技術(shù)可用于評(píng)估心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)和治療效果 。
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