TGF beta RII ELISA
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- 更新時間 2025/3/17 10:14:12
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TGF beta RII ELISA技術(shù)全解析
TGF beta RII ELISA,即轉(zhuǎn)化生長因子 βII 型受體酶聯(lián)免疫吸附測定,是一項在生命科學(xué)研究及相關(guān)領(lǐng)域應(yīng)用廣泛的重要檢測技術(shù),主要用于定量檢測生物樣本中 TGF beta RII 的含量。
從技術(shù)原理來看,TGF beta RII ELISA 遵循經(jīng)典的酶聯(lián)免疫吸附測定原理。實驗伊始,先將針對 TGF beta RII 的特異性抗體包被在酶標(biāo)板的微孔底部。當(dāng)含有 TGF beta RII 的生物樣本,如細胞裂解液、血清、組織勻漿等加入微孔后,樣本中的 TGF beta RII 會與包被抗體發(fā)生特異性結(jié)合。接著,加入酶標(biāo)記的另一種針對 TGF beta RII 的特異性抗體,此抗體能與已結(jié)合在包被抗體上的 TGF beta RII 相結(jié)合,從而形成 “包被抗體 - TGF beta RII - 酶標(biāo)抗體” 的三明治結(jié)構(gòu)。隨后加入酶的底物,在酶的催化作用下,底物發(fā)生顯色反應(yīng),且顏色的深淺與樣本中 TGF beta RII 的含量呈正比。最后,借助酶標(biāo)儀測量吸光度,再通過與預(yù)先繪制好的標(biāo)準曲線進行比對,即可精準計算出樣本中 TGF beta RII 的濃度。
在操作流程上,首先要準備好樣本,確保樣本的采集、處理和保存符合實驗要求,以保證樣本中 TGF beta RII 的活性和完整性。之后將包被好抗體的酶標(biāo)板平衡至室溫,依次加入標(biāo)準品、空白對照和待測樣本,在適宜條件下孵育,使抗原抗體充分結(jié)合。孵育結(jié)束后,進行洗滌步驟,去除未結(jié)合的物質(zhì),以減少非特異性信號干擾。接著加入酶標(biāo)抗體,再次孵育,完成夾心結(jié)構(gòu)的構(gòu)建。隨后加入底物顯色,在反應(yīng)達到合適時間時,加入終止液終止反應(yīng)。最后在酶標(biāo)儀上讀取吸光度數(shù)值,并進行數(shù)據(jù)處理。
此試劑盒 技術(shù)具有顯著優(yōu)勢。其靈敏度ji高,能夠檢測出樣本中極低含量的 TGF beta RII,對于研究 TGF beta RII 在生理和病理狀態(tài)下的細微變化至關(guān)重要。特異性強,兩種針對 TGF beta RII 不同表位的特異性抗體,極大地降低了與其他蛋白的交叉反應(yīng),確保檢測結(jié)果真實反映 TGF beta RII 的水平。而且該技術(shù)操作相對簡便,實驗流程標(biāo)準化程度高,適合大規(guī)模樣本檢測,不同實驗室間的結(jié)果可比性強。
在應(yīng)用領(lǐng)域,此試劑盒在基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究中用于探究 TGF beta 信號通路的調(diào)控機制,因為 TGF beta RII 是 TGF beta 信號傳導(dǎo)的關(guān)鍵受體。在腫瘤研究方面,TGF beta RII 的異常表達與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移密切相關(guān),通過檢測腫瘤組織或患者血清中的 TGF beta RII 含量,有助于腫瘤的早期診斷、病情監(jiān)測和預(yù)后評估。在心血管疾病研究中,該技術(shù)可用于研究 TGF beta RII 在心肌纖維化、血管重塑等病理過程中的作用,為心血管疾病的防治提供理論依據(jù) 。