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描述

Accutase 是包含蛋白水解酶和膠原酶活性的一種細胞消化液，不含任何動物和細菌來源組分。作為YI酶-EDTA 消化液的替換產品，用于從常規(guī)組織培養(yǎng)器皿、粘附包被培養(yǎng)器皿和聚合物上消化細胞。Accutase 比哺乳動物源的YI酶和膠原酶更加有效，因其所含活性成分濃度更低，對細胞傷害更小且更溫和，但能維持相同效力。Accutase在以下應用的細胞消化表現(xiàn)極其優(yōu)秀，包括：連續(xù)性細胞培養(yǎng)、細胞表面標記的分析、病毒生長實驗、細胞饑餓誘導的靜止分析、癌基因轉染的細胞轉化實驗、神經嵴細胞遷移實驗、細胞增殖、細胞趨觸和腫瘤細胞遷移實驗。

本品為即用型的無菌溶液，溶于DPBS（含0.5mM EDTA 和3mg/L 酚紅），經證實有效消化成纖維細胞、內皮細胞、神經元、腫瘤細胞系、胚胎干細胞、間充質干細胞和神經干細胞。

使用方法

（1）于4℃或冰水浴融化Accutase【勿于37℃融化】；

（2）吸掉培養(yǎng)基，用不含鈣鎂的1X DPBS 清洗細胞一次；

（3）加入適量的Accutase 消化液覆蓋細胞【典型情況按照細胞匯合度，加入2.5-5ml 到T25 培養(yǎng)瓶足以】；

（4）37℃或室溫條件允許細胞消化5-10min，或直至細胞*消化?！鞠^程中經常觀察，判斷細胞粘附在固相表面的同時是否變圓，并不僅僅是發(fā)生收縮或不再呈突觸狀。使用Accutase 消化細胞高達1h，不會造成細胞傷害】

（5） 一旦細胞變成球狀，輕拍培養(yǎng)瓶或皿以讓粘附細胞*脫落。

（6）細胞計數，之后用新鮮培養(yǎng)液重懸繼續(xù)培養(yǎng)，或者收集細胞用作其他用途。【不需另做清洗和酶活終止步驟】