DL-Cyto-Fix & Perm Kit主要應(yīng)用于細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子或其他細(xì)胞質(zhì)分子染色，可固定并透化細(xì)胞，進(jìn)而對(duì)細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)進(jìn)行染色。C-Perm/Wash Buffer經(jīng)過反復(fù)優(yōu)化，可減少非特異性染色并大化特異性熒光信號(hào)強(qiáng)度。流式胞內(nèi)染色試劑盒

流式胞內(nèi)染色試劑盒

產(chǎn)品特點(diǎn)

特異性強(qiáng)，熒光信號(hào)強(qiáng)度高

產(chǎn)品成分

試劑配制

工作濃度C-Perm/Wash Buffer（1X）：將1體積C-Perm/Wash Buffer (10X)加入9體積的去離子水，如將1ml C-Perm/Wash Buffer (10X) 加入9ml的去離子水，配制成10ml的1X C-Perm/Wash Buffer。1X C-Perm/Wash Buffer可保存在4℃并于一周內(nèi)使用。

使用說明

（請(qǐng)?jiān)敿?xì)閱讀使用說明后再開始相關(guān)實(shí)驗(yàn)）

1.細(xì)胞刺激：根據(jù)所使用細(xì)胞和所需檢測(cè)的分子特性，預(yù)先處理細(xì)胞。如所檢測(cè)胞內(nèi)分子為分泌型分子，需提前使用高爾基阻斷試劑阻斷檢測(cè)分子的分泌從而將所測(cè)分子滯留在細(xì)胞內(nèi)以便后續(xù)檢測(cè)。

2.表面染色（可選）：收集細(xì)胞后，每管加入50ul表面染色緩沖液和適量體積的表面抗體，充分重懸細(xì)胞，4℃，避光孵育30min后，加入500ul表面染色緩沖液，300g×5min，4℃離心，棄去上清液；

3.向每管細(xì)胞中加入200ul Fix Buffer (1X)，充分重懸細(xì)胞，4℃避光孵育12分鐘；

4.向每管細(xì)胞中加入500ul 1X C-Perm/Wash Buffer；

5.600g×5min離心，4℃，棄去上清液；

6.抗體孵育：每管加入100ul 1X C-Perm/Wash Buffer和適量體積的胞內(nèi)抗體，充分重懸細(xì)胞；

7.2-8°C避光孵育1h以上或過夜；

8.向每管細(xì)胞中添加500ul 1X C-Perm/Wash Buffer，洗去抗體；

9.600g×5min離心，4 ℃，棄去上清液；

10.將細(xì)胞重懸于300ul-500ul 1X C-Perm/Wash Buffer進(jìn)行上機(jī)分析。