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            大鼠皮層神經(jīng)元細(xì)胞 百歐博偉生物 原代細(xì)胞

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            為更好服務(wù)社會(huì),創(chuàng)造雙方利益較大化,中國微生物菌種查詢網(wǎng)提供的產(chǎn)品:質(zhì)控菌種,標(biāo)準(zhǔn)菌種,中國微生物菌種4萬多株,細(xì)胞系/株1萬多株其中金黃色葡萄球菌,大腸埃希氏菌(大腸桿菌),沙門氏菌,黑曲霉,銅綠假單胞菌,枯草芽孢桿菌,鏈球菌,白色念珠菌,志賀氏菌等為常用菌株。




            色譜耗材,色譜儀器,固相萃取裝置,化學(xué)試劑,樣品瓶,氘燈,標(biāo)準(zhǔn)品,微生物技術(shù),菌種保藏服務(wù)以及ATCC產(chǎn)品代理等產(chǎn)品及服務(wù)

            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
            貨號(hào) bio-73730 主要用途 研究
            保質(zhì)期 5-20年

            大鼠皮層神經(jīng)元細(xì)胞 百歐博偉生物 原代細(xì)胞

             


            大鼠皮層神經(jīng)元細(xì)胞 百歐博偉生物 原代細(xì)胞

             

            一、基本信息

            平臺(tái)編號(hào):bio-73730

            產(chǎn)品規(guī)格:5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

            產(chǎn)品名稱:大鼠皮層神經(jīng)元細(xì)胞

            組織來源:腦組織

            注意事項(xiàng):僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

             

            二、細(xì)胞簡介

            大鼠皮層神經(jīng)元細(xì)胞分離自腦皮層組織;皮層神經(jīng)元細(xì)胞是構(gòu)成中樞神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能的基本單位。神經(jīng)元是具有長突觸(軸突)的細(xì)胞,它由細(xì)胞體和細(xì)胞突起構(gòu)成。在長的軸突上套有一層鞘,組成神經(jīng)纖維,它的末端的細(xì)小分支叫做神經(jīng)末梢。細(xì)胞體位于腦、脊髓和神經(jīng)節(jié)中,細(xì)胞突起可延伸至全身各器官和組織中。細(xì)胞體是細(xì)胞含核的部分,其形狀大小有很大差別,直徑約4-120微米。核大而圓,位于細(xì)胞,染色質(zhì)少,核仁明顯。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有斑塊狀的核外染色質(zhì),還有許多神經(jīng)元纖維。細(xì)胞突起是由細(xì)胞體延伸出來的細(xì)長部分,又可分為樹突和軸突。每個(gè)神經(jīng)元可以有一或多個(gè)樹突,可以接受刺激并將興奮傳入細(xì)胞體。每個(gè)神經(jīng)元只有一個(gè)軸突,可以把興奮從胞體傳送到另一個(gè)神經(jīng)元或其他組織,如肌肉或腺體。皮質(zhì)神經(jīng)元是大腦皮質(zhì)的主要組成細(xì)胞之一,是大腦進(jìn)行功能活動(dòng)調(diào)節(jié)的基本單位,參與動(dòng)物多種中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的病理過程。通過形態(tài)學(xué)觀察顯示神經(jīng)元從貼壁、伸出突起開始;突起逐漸增多,而后突起進(jìn)一步增多并逐漸成網(wǎng),同時(shí)細(xì)胞胞體增大,周邊光暈明顯。10-12d細(xì)胞豐滿,隨后神經(jīng)元開始裂解,突起逐漸減少,細(xì)胞已退化變性,輪廓模糊,光暈消失,細(xì)胞變形。 本公司生產(chǎn)的大鼠皮層神經(jīng)元細(xì)胞采用消化法結(jié)合神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)、化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶;細(xì)胞經(jīng)MAP-2免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

             

            三、培養(yǎng)基信息

            Neurobasal-A、B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等。我們推薦使用大鼠皮層神經(jīng)元細(xì)胞專用培養(yǎng)基(產(chǎn)品貨號(hào):CM-R105)作為體外培養(yǎng)大鼠皮層神經(jīng)元細(xì)胞的培養(yǎng)基。

             

            四、液體配制

            硼酸硼砂緩沖液:0.05M四硼化鈉45ml,0.2M硼酸55ml,pH8.4;

            EDTA消化液:-0.125g;EDTA-0.2g;D-Hanks平衡鹽液定容至100ml

            所用的培養(yǎng)板、培養(yǎng)瓶或玻片預(yù)先經(jīng)100μg/L多聚賴氨酸硼酸鹽緩沖液于37℃包被4h,三蒸水洗三遍晾干備用。

             

            五、操作步驟如下

            1、孕16d SD大鼠經(jīng)麻醉后,碘酒、75%乙醇消毒腹部皮膚,依次剪開皮膚、肌肉、皮下筋膜,無菌操作下取出胚胎放入預(yù)冷的D-Hanks平衡鹽液中。

            2、在解剖顯微鏡下分離并取出胚胎大腦皮層,除去腦膜,剪碎組織成約1mm3大小,加入-EDTA消化液并放入37℃孵箱內(nèi)消化20min,中間搖晃一次。

            3、隨后用滴管吸出組織轉(zhuǎn)移到裝有預(yù)冷的培養(yǎng)液(DMEM+10%FBS)的離心管內(nèi)終止消化液作用5min。

            4、用滴管吸出組織轉(zhuǎn)移到裝有預(yù)冷的DMEM+10%FBS的離心管內(nèi),用火焰拋光的巴斯德滴管吹打數(shù)次,靜置后取上清吸到另一支離心管內(nèi)。重復(fù)上述步驟2~3次。

            5、將所收集的上清經(jīng)200目篩網(wǎng)過濾。

            6、過濾后的細(xì)胞懸液于800r/min離心5min,棄上清,管內(nèi)加入新鮮培養(yǎng)液(DMEM+20%FBS)并吹打成單細(xì)胞懸液。

            7、細(xì)胞計(jì)數(shù),調(diào)整細(xì)胞密度按1.5×105/cm2種入6孔板內(nèi),放入CO2孵箱中培養(yǎng)。培養(yǎng)48h后換液并加入Ara-C使其終濃度為1×10-5mM/L。Ara-C作用24h后全量換液。以后每隔3天半量換液一次。

             

            六、注意以下幾點(diǎn)

            1、上面的步驟是傳統(tǒng)方法。有許多地方可以進(jìn)行改動(dòng):如消化時(shí)可以直接用0.125-0.25的消化15-20min左右,也可用DNA酶進(jìn)行消化,有人還直接進(jìn)行吹打,都可行。

            2、上面雖然時(shí)大鼠皮層神經(jīng)元,但是同樣適用于小鼠,但是應(yīng)該選擇 孕13d 左右的小鼠。

            3、神經(jīng)元是一種比較難培養(yǎng)的細(xì)胞,因此在接種時(shí)細(xì)胞的密度一定要夠!

            4、在玻片上培養(yǎng)神經(jīng)元時(shí),一定要注意玻片的來源和處理方法,這個(gè)非常重要,對神經(jīng)細(xì)胞的影響是很大的。如果您現(xiàn)在在玻片上培養(yǎng)的神經(jīng)元生長情況還不錯(cuò)的話,那么您在以后的培養(yǎng)中還是用同一來源(廠家)的玻片。

            5、如果有B27和neurobasal培養(yǎng)基,那么就方便了(不用加AraC)--

            1)把細(xì)胞懸液用(DMEM+20%FBS)懸浮,種到培養(yǎng)皿上6-12h后,全量換成2%B27的neurobasal培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng),3d半量換液。

            2)把細(xì)胞懸液用直接用2%B27的neurobasal培養(yǎng)基懸浮接種。

            3)可以用新生1d內(nèi)的胎鼠皮層直接培養(yǎng)。

             

            北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司的微生物菌種查詢網(wǎng)提供微生物菌種保藏、測序、購買等服務(wù),是中國微生物菌種保藏中心的服務(wù)平臺(tái),并且是集微生物菌種、菌種,ATCC菌種、細(xì)胞、培養(yǎng)基為一體的大型微生物查詢類網(wǎng)站,自設(shè)設(shè)備及技術(shù)的微生物菌種保藏中心!歡迎廣大客戶來詢!




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