一、服務(wù)簡介

      支原體是細(xì)胞污染物中比較常見的一種，細(xì)胞受支原體污染程度較輕時，不會表現(xiàn)出明顯的癥狀，但一旦這種潛伏的污染爆發(fā)時，細(xì)胞培養(yǎng)液會變渾濁。原代細(xì)胞和傳代細(xì)胞都可能遭受支原體污染，根據(jù)國外不同實(shí)驗(yàn)室的調(diào)查結(jié)果顯示，有15%-80%的細(xì)胞系被支原體污染，傳代細(xì)胞的污染率高于原代細(xì)胞。

      細(xì)胞系是生物醫(yī)學(xué)研究中重要的工具，在細(xì)胞質(zhì)量控制相關(guān)的問題中，細(xì)胞系交叉污染和微生物支原體污染是其中常見的質(zhì)量問題。交叉污染分為種屬間的交叉污染、種內(nèi)不同細(xì)胞系的交叉污染。2002年(Drexler et al., 2002)對440個白血病-淋巴細(xì)胞系進(jìn)行分析后發(fā)現(xiàn)，只有64%的細(xì)胞身份正確且支原體陰性，在交叉污染的細(xì)胞系中有50%為支原體陽性，23%的真實(shí)細(xì)胞系也有支原體陽性。

      目前行業(yè)基本都是對細(xì)胞或細(xì)胞制品進(jìn)行質(zhì)控是否有支原體污染，而對具體污染的什么種類支原體很少做探究。從質(zhì)量管理體系的角度來說，如果能夠進(jìn)一步弄清楚污染的支原體種類，有利于支原體污染溯源，通過分析污染來源及可能途徑，進(jìn)一步完善質(zhì)量體系，加強(qiáng)管控，降低支原體污染的發(fā)生概率。

      我公司CELL STR ID®支原體分型檢測體系,在充分分析各類支原體的16SDNA序列基礎(chǔ)上,設(shè)計(jì)了針對支原體的特異引物探針，同時通過不同支原體的特異片段長度差異進(jìn)行區(qū)分。為了實(shí)現(xiàn)這一目的，利用多重?zé)晒釶CR和毛細(xì)管電泳技術(shù)，實(shí)現(xiàn)對支原體的高靈敏度檢測及不同種類的支原體進(jìn)行有效區(qū)分。

二、服務(wù)內(nèi)容

（一）服務(wù)流程

（二）服務(wù)特點(diǎn)

      1．采用多重?zé)晒釶CR支原體擴(kuò)增試劑盒進(jìn)行多重?cái)U(kuò)增；擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)ABI3130XL基因分析儀進(jìn)行檢測。

      2．靈敏度高?？梢澡b別細(xì)胞樣本中含有的少量支原體污染，檢測線為皮克級：30pg/μL。

      3．檢測結(jié)果不僅可以是否有無支原體污染，同時可知其中8種支原體是那種支原體污染；隨著科研技術(shù)的發(fā)展，根據(jù)需要單獨(dú)列出的支原體會有所增加。

      4．鑒定報(bào)告中文版或中英版（自選），以及圖譜（見支原體分型檢測圖譜）。

（三）注意事項(xiàng)

      1．樣品寄送：用戶提供DNA或細(xì)胞 樣本，加冰袋運(yùn)輸；同時請注明細(xì)胞數(shù)量或DNA含量，DNA 含量大于50ng/μl，體積大于20μl。如提供細(xì)胞，請?zhí)峁㏄BS細(xì)胞懸浮液，離心沉淀，去上清液，可常溫特快專遞運(yùn)輸（京外客戶推薦方法）；細(xì)胞數(shù)量≥10⁶個。

      2．正常檢測周期5-7個工作日，加急2-3個工作日。

（四）結(jié)果交付

      檢測結(jié)果以電子版的形式發(fā)放到訂單或合同上面預(yù)留的郵箱，書面報(bào)告可根據(jù)需要隨時提供，寄送到貴單位。

三、支原體分型檢測圖譜及參考文獻(xiàn) 

參考文獻(xiàn)：

4.1、Mycoplasma contamination of cell cultures: Incidence, sources, effects,detection, elimination, prevention。Cytotechnology 39: 75–90, 2002

4.2  Advances in PCR-based detection of mycoplasmas contaminating cell cultures. PCR Methods         Appl 4: 199–208     Rawadi G and Dussurget O (1995)