F3503S-50 rxns )LabFD BspQI 內(nèi)切酶
| 參考價 | ￥180.00 |
- 公司名稱 北京蘭博利德商貿(mào)有限公司
- 品牌
- 型號F3503S-50 rxns
- 所在地北京市
- 廠商性質(zhì)代理商
- 更新時間2023/11/26 21:22:09
- 訪問次數(shù) 350
| 50 | 180.00元 | 999 EA可售 |
聯(lián)系方式：?；勖?/b>13810194211 查看聯(lián)系方式
聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息，謝謝!
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 食品/農(nóng)產(chǎn)品,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥 |
|---|
BspQI 限制性內(nèi)切酶
產(chǎn)品貨號：F3503S
儲存條件：-20℃
同裂酶：SapI, LguI, PciSI；（注： 同裂酶對于不同的甲基化修飾可能具有不同敏感性。）
產(chǎn)品組成
組分 | 規(guī)格 |
BspQI (10U/ul) | 50ul |
10× HN Buffer | 1ml |
產(chǎn)品簡介
BspQI 屬于 Type IIS 型限制酶，識別非回文序列，并在識別序列之外進(jìn)行切割，常用于 Golden Gate 組裝。經(jīng)過優(yōu)化的反應(yīng) Buffer
使 BspQI 最大限度發(fā)揮功能，同時反應(yīng)緩沖液包含重組白蛋白，其可增強(qiáng)多種酶的穩(wěn)定性。
建議反應(yīng)條件
1× HN 緩沖液；50℃溫育；參照“DNA 酶切流程”配制反應(yīng)體系。
失活條件
80℃溫育 20 min。
活性定義
1 活性單位 (U) 是指在 50 μl 反應(yīng)體系中，50℃ 1 h 內(nèi)wanquan酶切1 µg λDNA 所需的酶量
質(zhì)量控制
超長時間溫育檢測
最適反應(yīng)溫度下，將 10 U BspQI 與 1 μg λDNA 共同溫育 3 h，未檢測到其他核酸酶污染或星號活性引起的底物非特異性降解，延時
酶切可能出現(xiàn)星號活性。
酶切-連接-再酶切檢測
最適反應(yīng)溫度下，使用 10 U BspQI 消化底物，回收酶切產(chǎn)物。在 22℃下使用適量 T4 DNA Ligase (Fast) 可以將酶切產(chǎn)物重新連接。
將連接產(chǎn)物再次回收后，使用相同的內(nèi)切酶可以重新切開連接產(chǎn)物。
DNase 殘留檢測
將 10 U BspQI 與雙鏈 DNA 底物在 37℃溫育 16 h，通過 DNA 電泳檢測雙鏈 DNA 底物無變化。
使用方法
1.DNA 快速酶切流程
（1）在冰上按如下建議的加樣順序配制反應(yīng)體系：
ddH2O | up to 50ul |
10× HN Buffer | 5ul |
底物 DNA | 1ug |
BspQI (10 U/μl) | 1ul |
Total | 50ul |
a. DNA 底物中應(yīng)不含ben fen、氯仿、乙醇、EDTA、洗滌劑或高濃度鹽，否則將會影響 BspQI 酶活性；
（2）輕柔吸打或輕彈管壁以混勻（切勿渦旋），然后瞬時離心以收集掛壁液滴；
（3）50℃溫育 50min-1h；
（4）80℃溫育 20min 即可使酶失活，或者通過吸附柱或benfen / 氯仿純化終止反應(yīng)。
2.注意事項
① 反應(yīng)體系中加入的酶體積不應(yīng)超過總體積的 10%，避免酶中過多的甘油引起星號活性；
② 限制性內(nèi)切酶存儲緩沖液中的添加劑 ( 例如甘油、鹽 ) 與底物溶液中的污染物 ( 例如鹽、EDTA 或乙醇等 ) 相同，反應(yīng)體積越小，酶切反應(yīng)抑制效應(yīng)越強(qiáng)。
不同 DNA 中的酶切位點數(shù)量
λDNA | ΦX174 | pBR322 | pUC57 | pUC18/19 | SV40 | M13mp18/19 | Adeno2 |
10 | 1 | 1 | 1 | 1 | 0 | 0 | 7 |
甲基化修飾影響
Dam | Dcm | CpG | EcoKI | EcoBI |
無影響 | 無影響 | 無影響 | 無影響 | 無影響 |
采購中心
化工儀器網(wǎng)