產(chǎn)品簡介：

豬流感是由豬流感病毒（SIV）引起的一種急性高度接觸傳染性豬呼吸道疾病，臨床以突發(fā)、高熱、咳嗽、  呼吸困難、衰竭、高發(fā)病率、低死亡率為特征。目前已發(fā)現(xiàn)的 SIV  至少有 9  種不同的血清亞型。H1H1  型豬流感是廣泛流行于豬群流感之一。 

本試劑盒適用于檢測的肺臟、氣管分泌物、鼻-拭子樣品等標(biāo)本中豬流感 H1N1 病毒 RNA，適用于豬流感病毒感染的輔助診斷。 

產(chǎn)品特點(diǎn)：

一、嚴(yán)格的質(zhì)控體系

所有試劑盒從原料到成品都經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量控制，確保每一盒試劑盒都具有穩(wěn)定可靠的質(zhì)量，讓您的檢測結(jié)果更可信。

二、高靈敏度

產(chǎn)品經(jīng)過不斷優(yōu)化，具有出色的靈敏度，能夠檢測到極微量的豬流感H1N1病毒核酸，不放過任何潛在的感染風(fēng)險(xiǎn)。

三、便捷操作

綜合各項(xiàng)指標(biāo)特性，研發(fā)出操作便捷的試劑盒。從樣本制備到結(jié)果分析，每一步都有清晰的操作指南，即使是新手也能輕松上手。

四、多樣的檢測驗(yàn)證樣本

該試劑盒經(jīng)過多種樣本的檢測驗(yàn)證，適用于肺臟、氣管分泌物、鼻-拭子等多種常見樣本，滿足不同的檢測需求。

五、個(gè)性化定制服務(wù)

專業(yè)的研發(fā)團(tuán)隊(duì)可為您提供個(gè)性化的定制服務(wù)，根據(jù)您的特殊需求進(jìn)行產(chǎn)品優(yōu)化和調(diào)整，為您提供更貼合實(shí)際的檢測方案。

六、豐富的產(chǎn)品線

除了豬流感H1N1病毒（SIV-H1N1）雙重PCR試劑盒，我們還提供Elisa試劑盒以及其它快檢試劑盒，滿足您在不同領(lǐng)域的檢測需求。

七、完善的售前售后服務(wù)

我們擁有完善專業(yè)的售前售后服務(wù)團(tuán)隊(duì)，在您購買前為您提供詳細(xì)的產(chǎn)品咨詢和技術(shù)支持，購買后為您解決使用過程中遇到的任何問題，讓您無后顧之憂。

產(chǎn)品參數(shù)：

產(chǎn)品規(guī)格

50T/盒，可滿足一定規(guī)模的檢測需求。

檢測方法

實(shí)時(shí)熒光PCR，具有快速、準(zhǔn)確、靈敏等優(yōu)點(diǎn)。

適用儀器

ABI7500、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。

標(biāo)本采集

病死豬，取肺臟、氣管分泌物；待檢活豬，用棉拭子深入鼻腔取分泌物，置于 1mL 50%甘油生理鹽水中。

保存和運(yùn)輸

采集或處理好的樣品在 2℃~8℃條件下保存應(yīng)不超過 24 h；若需長期保存，應(yīng)放置-70℃以下保存，凍融不超過 3 次。

使用方法：

1.樣品處理（樣本處理區(qū)） 

1.1樣本前處理 

組織樣品：稱取樣品約 1g，剪碎混勻后于研磨器中研磨，加入 1.5mL 生理鹽水后繼續(xù)研磨，待勻漿后轉(zhuǎn)至1.5mL 滅菌離心管中，8000rpm 離心 2min，取上清液 100μL 于 1.5mL 滅菌離心管中；氣管、鼻腔分泌物取 100μL 于 1.5mL 滅菌離心管中。 

1.2核酸提取 

推薦采用公司生產(chǎn)的核酸-提取或純化試劑（磁珠法或離心柱法）進(jìn)行核酸提取，請按照試劑說明書進(jìn)行操作。 

2.試劑配制（試劑準(zhǔn)備區(qū)） 

根據(jù)待檢測樣本總數(shù)，設(shè)所需要的 PCR 反應(yīng)管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對照+1 管陽性對照；反應(yīng)管數(shù)每滿 10 份，多配制 1 份)，每測試反應(yīng)體系配制如下表： 

試劑 SIV-H1N1 反應(yīng)液 酶液 

用量 19μL1μL

將混合好的測試反應(yīng)液分裝到 PCR 反應(yīng)管中，20μL/管。 

3.加樣（樣本處理區(qū)） 

將步驟 1 提取的 RNA、陽性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品各取 5μL，分別加入相應(yīng)的反應(yīng)管中，蓋好管蓋，混勻， 短暫離心。 

4.PCR 擴(kuò)增（核酸擴(kuò)增區(qū)） 

4.1將待檢測反應(yīng)管置于熒光定量 PCR 儀反應(yīng)槽內(nèi)； 

4.2設(shè)置好通道、樣品信息，反應(yīng)體系設(shè)置為 25μL；熒光通道選擇： 

檢測通道（Reporter Dye）FAM、ROX， 淬滅通道（Quencher Dye）NONE，請勿選擇 ROX 參比熒光。 

4.3推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置： 

5.結(jié)果分析判定 

步驟 循環(huán)數(shù) 溫度 時(shí)間 收集熒光信號 

11 cycle50℃ 10min否 

21 cycle95℃ 2min否 

345 cycles95℃ 15sec否 

60℃ 30sec是 

5.1結(jié)果分析條件設(shè)定（請參照各儀器使用說明書進(jìn)行設(shè)置，以分析 ABI7500 儀器為例） 

反應(yīng)結(jié)束后自動(dòng)保存結(jié)果，根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié) Baseline 的 Start 值、End 值以及 Threshold 值（用戶可根據(jù)實(shí)際情況自行調(diào)整，Start 值可設(shè)在 3～15、End 值可設(shè)在 5～20，使閾值線位于擴(kuò)增曲線指數(shù)期，陰性質(zhì)控品的擴(kuò)增曲線平直或低于閾值線），點(diǎn)擊 Analyze 自動(dòng)獲得分析結(jié)果。 

5.2結(jié)果判斷 

FAM 通道為豬流感 H1N1 病毒 H1 基因檢測結(jié)果，ROX 通道為豬流感 H1N1 病毒 N1 基因檢測結(jié)果。陽性：檢測通道 Ct 值≤40，且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線； 

陰性：樣本檢測結(jié)果 Ct 值>40 或無 Ct 值。 

5.3質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn) 

陰性質(zhì)控品：無特異性擴(kuò)增曲線或無 Ct 值顯示； 

陽性質(zhì)控品：擴(kuò)增曲線有明顯指數(shù)增長期，且 Ct 值≤32； 以上條件應(yīng)同時(shí)滿足，否則實(shí)驗(yàn)視為無效。 

6.檢測方法的局限性 

1.樣本檢測結(jié)果與樣本收集、處理、運(yùn)送以及保存質(zhì)量有關(guān)； 

2.樣本提取過程中沒有控制好交叉污染，會(huì)出現(xiàn)假陽性結(jié)果； 

3.陽性對照、擴(kuò)增產(chǎn)物泄漏，會(huì)導(dǎo)致假陽性結(jié)果； 

4.病原體在流行過程中基因突變、重組，會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果； 

5.不同的提取方法存在提取效率差異，會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果； 

6.試劑運(yùn)輸，保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測效能下降，出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準(zhǔn)確的結(jié)果； 

7.本檢測結(jié)果僅供參考，如須確診請結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測手段。 

注意事項(xiàng)：

1.所有操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行；

2.試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化，完-全混勻并短暫離心；

3.反應(yīng)液應(yīng)避光保存；

4.反應(yīng)中盡量避免氣泡存在，管蓋需蓋緊；

5.使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專用工作服；

6.樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進(jìn)行，以免交叉污染；

7.實(shí)驗(yàn)完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺(tái)和移液器；

8.試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對待，并按照《微生物生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通則》進(jìn)行處理。

9.本產(chǎn)品僅供科研。

選擇我們的豬流感H1N1病毒（SIV-H1N1）雙重PCR試劑盒，就是選擇精準(zhǔn)、高效、可靠的檢測方案，為您的科研實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航！