EG15601S LightNing® ApaLI內(nèi)切酶
- 公司名稱 蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 EG15601S
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時間 2025/4/10 13:32:53
- 訪問次數(shù) 78
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蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司成立于2008年，位于蘇州園區(qū)生物納米園（Biobay）A5幢301室。公司管理團隊專注于科學儀器行業(yè)十三年，擁有專業(yè)的技術(shù)團隊與完善的售后服務體系，目前已為300余家實驗室提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品和服務，涵蓋各大高校、醫(yī)療機構(gòu)、檢測中心、科研機構(gòu)、制藥企業(yè)等13個群體。代理的實驗室儀器主要包括振蕩培養(yǎng)箱，PCR儀，移液器，生物反應器，發(fā)酵罐，移液器，超低溫冰箱，醫(yī)用冰箱，液氮罐，高壓滅菌器，超純水機，天平，離心機等。廠商企業(yè)授權(quán)包括知楚儀器、朗基、中科美菱，梅特勒，樂楓，搏旅、NEST、天根、奧盛在內(nèi)等多家等。在提供產(chǎn)品的同時也為您提供生物實驗室常用的耗材試劑，以及實驗室整體搬遷、第三方檢測、計量與校準，二手儀器調(diào)劑等服務。完整的實驗室一站式體驗使您的選擇更加方便、快捷、靈活。
阿爾法性價比：一級代理；一手貨源；進口品質(zhì)，國產(chǎn)價格；
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| 供貨周期 | 兩周 | 應用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
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LightNing® ApaLI內(nèi)切酶組成
組分 | 規(guī)格 |
LightNing® ApaLI | 200 μl |
10× CutOne® Buffer | 2×1 ml |
10× CutOne® Color Buffer | 2×1 ml |
特性和用法
LightNing® ApaLI內(nèi)切酶，可在5~15 min內(nèi)完成反應
u建議反應條件
1× CutOne®緩沖液；
37℃溫育；
參照“DNA 快速酶切流程”配制反應體系。
u失活條件
80℃溫育20 min。
u甲基化敏感性
對于被 CpG 甲基化的 DNA，剪切可能受阻，
對于被 EcoKI 甲基化的 DNA，剪切可能受阻。
u存儲條件
-20℃
相關(guān)問答
Q:為什么在CutOne® Buffer中加入HSA？
A:一些酶在反應過程中需要HSA的參與，我們在CutOne® Buffer中添加了HSA，避免反應中額外添加組分，使得酶切反應更加便捷。
Q:HSA的添加對于雷霆系列限制性內(nèi)切酶的功能會產(chǎn)生什么樣的影響？
A:在我們的測試中未曾發(fā)現(xiàn)HSA對于雷霆系列限制性內(nèi)切酶的功能有任何影響。在有些情況下，對于部分的酶切反應有促進作用。
Q:我需要嚴格遵守5~15 min的酶切時間嗎？能夠延長反應時間嗎？
A:雷霆系列限制性內(nèi)切酶經(jīng)過改造可以將酶切時間縮短至5~15 min。同樣也消除了限制性內(nèi)切酶的星活性（長時間反應造成的非特異性消化），在說明書中告知的星活性出現(xiàn)的時間范圍內(nèi)可以適當延長反應時間。
Q:我什么時候應當考慮星活性對于酶切反應的影響？
A:如果額外的酶切條帶對于實驗結(jié)果會產(chǎn)生影響時我們應當考慮星活性對于酶切反應的影響。例如：進行基因型、突變型分析或克隆時我們應當避免星活性的產(chǎn)生。避免星活性的有效方法：適當擴大反應體積（較小的反應體積容易造成甘油體積達到或超過總反應體積的5%）；不進行超長時間孵育（過夜消化極易產(chǎn)生星活性）。
Q:有哪些關(guān)鍵因素會導致星活性？
A:長時間孵育、過量的酶、高甘油含量（通常高于5%）、較小的反應體系等因素都會導致星活性的產(chǎn)生。
Q:未經(jīng)純化的PCR產(chǎn)物直接酶切要怎樣設定體系？
A:反應體系推薦由這些內(nèi)容組成：10 μl PCR產(chǎn)物、2 μl 10×CutOneTM Buffer、1~2 μl相應的限制性內(nèi)切酶、ddH2O補齊到30 μl。酶的用量根據(jù)PCR產(chǎn)物的濃度而定，只加入2 μl反應緩沖液的原因是PCR反應中存在對應的鹽離子和金屬離子，適當減少反應緩沖液的用量以保證最終反應體系中的環(huán)境適宜限制性內(nèi)切酶發(fā)揮功能。
Q:限制性內(nèi)切酶簡并性識別位點一定是回文的嗎？
A:大多數(shù)二型限制性內(nèi)切酶的識別序列是回文的，而且是特定的堿基序列。然而有些限制性內(nèi)切酶具有簡并性識別位點，也就是說識別位點中有一個或以上的堿基對是非特異的（例如：BsrfI識別5’RCCGGY, R=A/G, Y=C/T）。對于這樣的具有簡并性識別位點的限制性內(nèi)切酶，只要是符合要求的序列皆能被識別并且被正確地切割（例如5’ ACCGGC, 5’ ACCGGT, 5’ GCCGGC, 和5’ GCCGGT，其中兩個并不是回文的，仍然能被BsrFI識別并且切割）。
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