●試劑組成

●操作程序

1.  樣本稀釋：用樣本稀釋液（5號(hào)液）將待檢血清按1:100稀釋，如5ul血清＋495ul樣本稀釋液，充分混勻。

陰、陽及臨界對(duì)照每支加入300ul蒸餾水復(fù)溶，充分溶解；復(fù)溶后的對(duì)照直接加樣，不用再稀釋。

2.  加樣反應(yīng)：每次試驗(yàn)設(shè)設(shè)陰性、臨界、陽性及空白對(duì)照各1孔（分別加入陰性、臨界、陽性對(duì)照及樣本稀釋液100ul）。樣本檢測孔每孔加已稀釋血清樣本100ul。37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體，每孔加洗滌液（2號(hào)液）1滴，立即用蒸餾水注滿，靜置30秒后甩去，再直接用蒸餾水洗滌四次，每次均需靜置30秒,后一次甩去拍干。

3.  加酶反應(yīng)：除空白對(duì)照孔外其余每孔加酶結(jié)合物（1號(hào)液）2滴，37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體,如上

洗滌，拍干。

4.  顯色反應(yīng)：加底物（3號(hào)液）和顯色劑（4號(hào)液）各1滴，混勻，37℃下避光顯色10分鐘。加終止液（6號(hào)液）1

滴，混勻，終止反應(yīng)（加終止液后藍(lán)色會(huì)變?yōu)辄S色）。

●結(jié)果判斷

      以空白對(duì)照調(diào)零，用酶標(biāo)儀于450nm（630nm作參比波長）讀取吸光度（A值）。當(dāng)待檢樣本孔A值大于等于陰性對(duì)照A值的2.1倍者判為陽性。如陰性對(duì)照A值低于0.05時(shí)，按0.05計(jì)算。

●注意事項(xiàng)

1.試劑盒于2-8℃保存，每次使用前應(yīng)先平衡至室溫。

2.未使用完的板條應(yīng)密封保存。

3.試劑盒中終止液具有腐蝕性，要小心使用。

4.瓶蓋每次使用后要擰緊，各瓶蓋之間不可混用。不同批號(hào)試劑盒的試劑組份不可混用。

5.試驗(yàn)樣本應(yīng)為無染菌、無血脂、無溶血的血清或血漿。任何樣本都應(yīng)視為傳染源妥善處理。

6. 37℃孵育時(shí)，建議使用水浴箱。如無條件，可在溫箱中放置濕盒進(jìn)行反應(yīng)并同時(shí)用不干膠膜封蓋板孔。