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            干細(xì)胞分離液使用說明書

            時間:2012/10/24閱讀:2457
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            備注:本公司銷售的所有產(chǎn)品僅用于生化科研試驗

             

            各種動物或人外周血造血干細(xì)胞和骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離液操作說明和使用及保存中的注意事項:

             

            本品為帶有乳光或微乳光的滅菌水溶液。主要成分是Ficoll 400 與泛影酸葡甲胺。適用于從組織勻漿中(胎牛血清或人血清懸起的勻漿細(xì)胞 1X107/ml)分離所需細(xì)胞,在醫(yī)療和醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究中廣泛應(yīng)用。

            其他人及動物多種比重細(xì)胞分離液。注:因不同種屬不同比重分離液的細(xì)胞離散系數(shù)及細(xì)胞帶電不同,所以用戶在定制分離液時應(yīng)提供所需分離液的比重、動物的種屬及被分離細(xì)胞的名稱。

             

            使用方法:

            1,例:取1ml肝素抗凝血與全血及組織勻漿稀釋液(或胎牛血清或人血清懸起勻漿的細(xì)胞 1X108/ml11混合再與1ml干細(xì)胞重懸液(產(chǎn)品編號:TBD2012SCB混勻置20度下自然沉降20-30分鐘。吸取渾濁的上清部分,棄去底部紅細(xì)胞備用。(使用本干細(xì)胞重懸液可zui終可獲得全血中約2%干細(xì)胞,若省去重懸步驟則只可獲得小于2%的干細(xì)胞。)

            2,用吸取渾濁的上清部分液體小心疊加在本分離液之液面上(比例為11),20400g/分鐘,離心20分鐘(水平轉(zhuǎn)子),此時離心管中由上至下細(xì)胞分四層。

            *層:為血漿或組織勻漿液層。

            第二層:為環(huán)狀乳白色含所需干細(xì)胞。

            第三層:為透明分離液層。

            第四層;為極少紅細(xì)胞層,收集第二層細(xì)胞放入含細(xì)胞洗滌液(Cat#2010X11184-5毫升的試管中,充分混勻后,以1500-2000轉(zhuǎn)/分離心10-30分鐘。沉淀經(jīng)反復(fù)洗2次即得所需干細(xì)胞。此方法效果較好,推薦使用

            分離圖例:

             

            注意事項

            1. 啟封后應(yīng)置4℃保存避免微生物的污染。

            2. 細(xì)胞分離液從冰箱取出后,不可立即使用,需待溶液溫度升至室溫時,搖勻后使用。

            3. 整個分離過程中,溫度應(yīng)控制在18-28℃且在無菌環(huán)境下,避免微生物的污染,否則會影響分離質(zhì)量。

             

            應(yīng)用

            -從動物組織中分離所需細(xì)胞

             

            特點

            -密度變化率依照Ficoll 400,泛影酸和氫氧化鈉.

            -*分離溶液的密度為參照具體產(chǎn)品的標(biāo)簽

            -生理學(xué)參數(shù)

            -在低粘度時高密度

            -無菌-即用型-溶液

             

            產(chǎn)品質(zhì)控

            溶液                         注射用水

            pH                             7.0-7.5

            滲透壓               280-340mOsmol/kg

            內(nèi)毒素                        <5EU/ml

            無菌                           已檢測

            保存期限                          2

             

            注意

            TBD實驗室的細(xì)胞分離培養(yǎng)基是敏光型的。這種培養(yǎng)基在運輸和貯藏過程中應(yīng)避光保溫。由于各品牌離心機(jī)的性能不同,國內(nèi)南北地區(qū)溫度環(huán)境和四季的差異,可能影響分離效果,用戶可以調(diào)節(jié)離心轉(zhuǎn)數(shù),調(diào)節(jié)離心的時間,摸索*的分離條件(具體分離條件各實驗室自定)。組織,血液,細(xì)胞要求新鮮,避免冷凍和冷藏。

             

            貯藏

            18-25℃避光保存。啟封后置4℃保存。本品為真空包裝,未啟封前置于10以下易出現(xiàn)白色結(jié)晶,影響分離效果。

             

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