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產品名稱 :
Lentivirus concentration PL liquid
品牌 :
BIOMIGA
貨號 :
V2001-01
規(guī)格 :
25ML
50ML
250ML
500ml
5L
詳細信息 :
簡介：
通常是在低滴度的病毒。它用于貯存或進一步的應用，常常需要將其濃縮。是一種快速，簡單，廉價的方法所需的，集中病毒和去除雜質。描述BioVision的PEG病毒降水工具包提供了一個簡單，方便，節(jié)省時間的方法，集中病毒不超離心。該試劑盒可用于的小實驗室樣品或大型的高產量和高病毒滴度的病毒制劑。該試劑盒可用于集中在細胞培養(yǎng)基中或環(huán)境樣品的反轉錄病毒，桿狀病毒，慢病毒，和噬菌體等。病毒可以集中超過100倍。經過優(yōu)化的病毒重新懸浮液提供zui大化病毒的
恢復40-100％取決于病毒的類型和來源。整個交易過程采用無毒的試劑。可用于濃縮的病毒感染，病毒DNA或RNA純化等
試劑儲存條件：
該解決方案是準備使用和穩(wěn)定的12個月，在4℃或在-20℃下長期貯存。
協(xié)議：
步驟一：病毒生產
1感染的細胞，并允許孵育，只要必要的接近zui大病毒生產的應變和細胞類型的組合。
2，7分鐘，于1000rpm離心培養(yǎng)。
3，重懸細胞沉淀在新鮮的培養(yǎng)基。一個額外的48小時的孵育。
4，離心機在14000rpm，15分鐘，以除去細胞文化。
5，收集上清，加入1倍體積的PEG溶液4倍體積的含有病毒上清。
6，放入冰箱冷藏過夜（穩(wěn)定在4°C）?2周。
7，2300RPM離心45分鐘。
8，除去上清液。
9，病毒顆粒重新懸浮在1/10到1/100的原始體積。
10，分裝在小樣品和存儲在-70°C使用。
注：
A）。對于高滴度的病毒制劑，再懸浮的體積應限于至約3倍體積的白色沉淀，通常為1/10?1/100的原始樣品的體積。如果不溶性物質中存在的病毒懸浮液，它可以通過離心除去在3,200 xg離心15分鐘，在4℃。
的B）。避免凍結和解凍周期，以zui大限度地提高病毒的恢復。
C）。痕量的病毒懸浮液中的PEG不會影響使用濃縮的病毒。在某些情況下，PEG可能會增加病毒感染效率。但是，如果需要，除去微量的PEG可以通過下面的過程：加入1倍體積的含有4 M氯化鉀和50mM的Tris-HCl，pH7.2的（未提供）的溶液的濃縮的病毒懸浮液中的3倍體積的。或者，固體KCl添加到病毒懸浮液中，至終濃度為1 M.坐在冰15-30分鐘。分拆在4℃下以12,000 xg離心10分鐘以除去沉淀物。仔細收集病毒上清。等分并存儲在-70℃下以供將來使用。
