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            上海易佰聚經(jīng)貿(mào)有限公司
            中級(jí)會(huì)員 | 第16年

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            人或各種動(dòng)物外周血中性粒細(xì)胞分離液試劑盒分離方法說(shuō)明及圖例

            時(shí)間:2013/1/15閱讀:4403
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            產(chǎn)品名稱 :
             大鼠外周血中性粒細(xì)胞分離液試劑盒
            品牌 :
             TBD
            貨號(hào) :
             LZS1091
            規(guī)格 :
             2X100ml/kit
            詳細(xì)信息 :
             
            分離方法說(shuō)明及圖例
            A. 取 1ml新鮮抗凝血與E液1:1混合再與1ml的全血及組織稀釋液(Cat#:2010C1119)混
            勻置20℃-30℃下自然沉降20-30分鐘。吸取渾濁的上清部分,底部紅細(xì)胞(含大量中性
            粒細(xì)胞)備用;
            B. 將步驟A中所得的渾濁上清液體小心疊加在A液之液面上(上清液與A液的比例為1:1);
            C. 以400g(約1500轉(zhuǎn)/分)離心15分鐘(半徑15cm水平轉(zhuǎn)子);
            此時(shí)離心管中由上至下細(xì)胞分四層。*層;為稀釋液(血漿)層。第二層;為環(huán)狀
            乳白色單個(gè)核細(xì)胞層。第三層;為混濁分離液層(此層液體中含有一定量中性粒細(xì)胞)。
            第四層;極少量紅細(xì)胞層(含一定量中性粒細(xì)胞)。
            D. 將步驟A及步驟C中所得紅細(xì)胞層用紅細(xì)胞裂解液裂解并去除紅細(xì)胞獲得大量中性粒細(xì)
            胞(詳細(xì)方法請(qǐng)參看“二、紅細(xì)胞裂解液使用說(shuō)明”)。
            E. 收集步驟C中所得第三層混濁分離液及步驟D中所得大量中性粒細(xì)胞放入含細(xì)胞洗滌液
            (Cat#:2010X1118)4-5ml的試管中,充分混勻后,以500g(約1800轉(zhuǎn)/分)離心20分鐘,
            棄去上清留沉淀細(xì)胞重新懸起。重復(fù)洗滌2次即得所需中性粒細(xì)胞。

              

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