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            上海易佰聚經(jīng)貿(mào)有限公司
                                                                        
            
										  中級(jí)會(huì)員 | 第16年									
            
                                    								
            

							
            
						
            
                        

					
            
										
            
						
            
                            							
            
								
            
								
            
									
            13636495876
            
								
            
							
            
                            						
            
					
            
										
				
            
			
            
			
            
				
            
					
				
            
			
            
		
            

		
		 
		
		
            
			
            
				
            
					
					
            
						

						



						



            
					
            
						
            質(zhì)粒小抽詳細(xì)參數(shù)
            
						
            
							時(shí)間：2013-3-27閱讀：1950
							
            
							
				
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            訂貨咨詢：；；；
            在線：1656711470  865512910    1730443944 

            備注：本公司銷售的所有產(chǎn)品僅用于生化科研試驗(yàn)

            產(chǎn)品名稱 :
             質(zhì)粒小量提取試劑盒
            品牌 :
             biomiga
            貨號(hào) :
             PD1211-01
            規(guī)格 :
             50次
            詳細(xì)信息 :
             從1~5mL 細(xì)菌培養(yǎng)液中純化提取10~30 ug 高純度質(zhì)粒DNA。
            試劑盒組分： 
             
                        
                                    
            Catalog#
                                    		                        
            PD1211-01
                                    		        
                    
                                    
            Preps
                                    		                        
            50
                                    		        
                    
                                    
            ezBind Columns
                                    		                        
            50
                                    		        
                    
                                    
            Buffer A1
                                    		                        
            15 mL
                                    		        
                    
                                    
            Buffer B1
                                    		                        
            15 mL
                                    		        
                    
                                    
            Buffer N1
                                    		                        
            20 mL
                                    		        
                    
                                    
            Buffer KB
                                    		                        
            30 mL
                                    		        
                    
                                    
            DNA Wash Buffer*
                                    		                        
            15 mL
                                    		        
                    
                                    
            Elution Buffer
                                    		                        
            10 mL
                                    		        
                    
                                    
            RNase A （20 mg/mL）
                                    		                        
            1.5 mg（75 µL）
                                    		        
                    
                                    
            User Manual
                                    		                        
            1
                                    		        
                
             
            保存條件：
             
            RNAse A在4℃下可以保存一年，Buffer A1加入RNase A 后4℃保存，其它組分室溫保存。
             
            注意事項(xiàng)：
                  
            • 使用前請(qǐng)將適量乙醇加入DNA Wash Buffer，令乙醇終濃度為80%
              •     
            • 純化中低拷貝的質(zhì)粒時(shí)，使用2倍的菌液體積，2倍的Buffer A1,B1,N1, 相同體積的Wash Buffer和Elution Buffer
              •     
            • 若為-70oC甘油凍存的菌，請(qǐng)先涂布平板培養(yǎng)后，再重新挑選新的單個(gè)菌落進(jìn)行培養(yǎng)。

            操作簡(jiǎn)要步驟：
                  
            1. 接種新鮮的單個(gè)菌落到1-4 mL的LB培養(yǎng)基（含適量抗生素），37oC震蕩培養(yǎng)14-16小時(shí)。室溫下10,000 x g離心1分鐘，收集菌體，并盡可能的吸去上清。
              2.     
            2. 加入250 µL Buffer A1（確保已加入RNase A），用移液槍或渦流震蕩充分懸浮細(xì)菌細(xì)胞。
              3.     
            3. 加入 250 µL Buffer B1, 輕輕地反轉(zhuǎn)5-10 次以混合均勻，然后靜置2-5分鐘至溶液粘稠而澄清。 
              4.     
            4. 加入350 µL Buffer N1, 立即反轉(zhuǎn)多次，至溶液充分混勻，此時(shí)出現(xiàn)白色絮狀沉淀。
              5.     
            5. 室溫下13,000 rpm離心10分鐘（若上清中有白色沉淀，可再次離心）。
              6.     
            6. 小心吸取離心后的上清液至帶有收集管的DNA柱中（避免吸起沉淀），室溫下13,000 rpm離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將離心柱重新放回到收集管中。
              7.     
            7. 可選: 向DNA柱中加入 500 µL Buffer KB, 室溫下13,000 rpm 離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將離心柱重新放回到收集管中。
              8.     
            8. 向離心柱中加入650 µL DNA Wash Buffer（確保已加入無水乙醇），室溫下，13,000 rpm 離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將離心柱重新放回到收集管中。重復(fù)步驟“8”。
              9.     
            9. 將離心柱放回高速離心機(jī)中，13,000 rpm室溫下開蓋離心2分鐘，以*去除殘留的乙醇。
              10.     
            10. 將離心柱轉(zhuǎn)至一個(gè)新的1.5 mL離心管中，向DNA柱的正中間加入50~100 µL（體積>50 µL）的ddH2O（pH在7.0-8.5之間）或Elution Buffer，室溫放置2分鐘，13,000 rpm 離心1分鐘，洗脫質(zhì)粒DNA。將洗脫液再加入到柱中，在13,000 rpm 離心1分鐘，收集洗脫液。
             
             
             操作流程：
                                
             
            


							
						
            
					
            
				
            
			
            
		
            



		 



  
    
    				
			

		
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    

    

     
     
     
	 




	 
	
	
	

            
	
            
		
            
			
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            請(qǐng)輸入密碼
            
					
            
				
            
				
            
					
            =
                       
            請(qǐng)輸驗(yàn)證碼
            
                    
            
				
            
				
            
		
            
	
            

            


            
	
            
		
            
			
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            常用：
            
                    
            
                
            
            
            
		
            
	
            

            
	

            
	
            
		
            
			
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