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化妝品中15種喹諾酮類藥物的檢測——UPLC-MS/MS法
喹諾酮類藥物是一類合成抗菌藥物，在我國的化妝品衛(wèi)生規(guī)范中屬于嚴(yán)禁添加的藥物。由于這類藥物見效快、成本低，還是有廠商在祛痘、除螨、抗粉刺的化妝品中違禁添加喹諾酮類藥物，有個別廠商甚至采取添加少量多種的辦法逃避監(jiān)管。
目前，國內(nèi)外對食品中喹諾酮類藥物殘留的檢測研究較多，也較為成熟。檢測方法多為液相色譜法、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法、酶聯(lián)免疫法等，對于化妝品中喹諾酮類藥物的分析研究較少，僅有的不是檢測的目標(biāo)物種類少就是檢測的樣品基質(zhì)種類少，難以適應(yīng)化妝品安全監(jiān)管的需要。
化妝品根據(jù)用途和功效不同，基質(zhì)差異也較大，其主要成分有植物油脂、動物油脂、脂肪醇類、粉質(zhì)原料、表面活性劑和防腐劑。檢測化妝品中多種喹諾酮類藥物，不僅要求樣品提取和凈化方法要具有普適性和性，還要求檢測方法具有良好的選擇性和靈敏度。
方法優(yōu)勢：
迪馬科技開發(fā)的《化妝品中15種喹諾酮類藥物的檢測》采用固相萃取-UPLC-MS/MS法測定化妝品中15種喹諾酮類藥物，根據(jù)基質(zhì)理化性質(zhì)分別采用水、甲酸乙腈等溶劑提取，采用混合型陽離子交換固相萃取柱凈化樣品，通過UPLC-MS/MS檢測；方法定量限是10.0 μg/kg。本方案前處理步驟簡便、操作簡單、凈化效果好，重現(xiàn)性好，回收率高。
以下為詳細(xì)解決方案，敬請參考！
化妝品中15種喹諾酮類藥物的檢測——UPLC-MS/MS法
1、適用范圍
本方案適用于爽膚水、乳液、面霜、BB霜、洗面奶、祛痘護(hù)膚品等化妝品中氧氟沙星、依諾沙星、培氟沙星、奧比沙星、達(dá)氟沙星、氟羅沙星、莫西沙星、恩諾沙星、環(huán)丙沙星、司帕沙星、雙氟沙星、丹諾沙星、沙拉沙星、洛美沙星、馬波沙星等15種喹諾酮類藥物的檢測；本方法定量限是10.0 μg/kg。
2、溶液類（爽膚水等）
2.1提取
取樣品0.5 g，加入5 mL水，渦旋混合1 min，待凈化。
2.2 凈化——ProElut PXC 500 mg/12 mL（Cat#：68207）
a活 化： | 5 mL乙醇、5 mL水活化； |
b上 樣： | 加入待凈化液，棄去流出液； |
c淋 洗： | 加入5 mL水、5 mL乙醇，棄去流出液； |
d洗 脫： | 加入10 mL 20%氨水乙醇，收集流出液；加10 mL乙醇，混勻，40 ℃減壓濃縮至干，用初始流動相定容至1 mL，混勻，過0.22 μm微孔濾膜，供LC-MS分析。 |
備注：同方法制備基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液。
3、乳液、果凍狀樣品
3.1提取
取樣品0.5 g，加入10 mL 2%甲酸乙腈，振蕩2 min，6000 rpm下離心2 min，收集上清液，取5.0 mL上清液，待凈化。
3.2 凈化——ProElut PXC 500 mg/12 mL（Cat#：68207）
a活 化： | 5 mL乙醇活化； |
b上 樣： | 加入待凈化液，棄去流出液； |
c淋 洗： | 加入10 mL乙醇，棄去流出液； |
d洗 脫： | 加入10 mL 20%氨水乙醇，收集流出液；加10 mL乙醇，混勻，40 ℃減壓濃縮至干，用初始流動相定容至1 mL，混勻，過0.22 μm微孔濾膜，供LC-MS分析。 |
備注：同方法制備基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液。
4、BB霜、洗面奶
4.1提取
取樣品0.5 g，加2 mL水，振搖使之分散，加10 mL 2%甲酸乙腈，振搖30 s，加4.0 g氯化鈉，振搖2 min，6000 rpm下離心2 min，收集上清液于20 mL具塞刻度試管中，向下層殘渣中繼續(xù)加10 mL 2%甲酸乙腈，按上述方法重復(fù)提取一次，合并2次上清液，用2%甲酸乙腈定容至20 mL，混勻，取10 mL上清液，待凈化。
4.2 凈化——ProElut PXC 500 mg/12 mL（Cat#：68207）
a活 化： | 5 mL乙醇活化； |
b上 樣： | 加入待凈化液，棄去流出液； |
c淋 洗： | 加入10 mL乙醇，棄去流出液； |
d洗 脫： | 加入10 mL 20%氨水乙醇，收集流出液；加10 mL乙醇，混勻，40 ℃減壓濃縮至干，用初始流動相定容至1 mL，混勻，過0.22 μm微孔濾膜，供LC-MS分析。 |
備注：同方法制備基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液。
5、分析條件
5.1 UPLC條件
色譜柱：Leapsil C18，100 × 2.1 mm，2.7 μm (Cat#：86005)
流 速：0.3 mL/min 進(jìn)樣量：5 μL 柱 溫：35 ℃
流動相： A：0.1%甲酸水 B：乙腈
梯度設(shè)置
時間/Min. | 0 | 4.5 | 5.5 | 7 | 7.5 | 15 |
A（%） | 80 | 80 | 0 | 0 | 80 | 80 |
B（%） | 20 | 20 | 100 | 100 | 20 | 20 |
5.2質(zhì)譜條件
電離模式：ESI | 掃描方式：正離子掃描 |
檢測方式：多反應(yīng)監(jiān)測 | 電噴霧電壓：5500 V |
霧化氣壓力：50 psi | 輔助氣壓力：50 psi |
氣簾氣壓力：20 psi | 離子源溫度：500 ℃ |
定性離子對、定量離子對、碰撞氣能量及去簇電壓見下表
| 化合物名稱 | 定性離子對 （m/z） (母離子/子離子) | 定量離子對 （m/z） (母離子/子離子) | 碰撞氣能量 /eV | 去簇電壓 /V |
| 馬波沙星 | 363.2/320.2 | 363.2/320.2 | 24 | 82 |
| 363.2/277.4 | 24 | |||
| 沙拉沙星 | 386.2/342.2 | 386.2/342.2 | 24 | 92 |
| 386.2/299.2 | 35 | |||
| 雙氟沙星 | 400.2/356.2 | 400.2/356.2 | 27 | 100 |
| 400.2/299.3 | 37 | |||
| 恩諾沙星 | 360.3/316.1 | 360.3/316.1 | 26 | 80 |
| 360.3/245.2 | 34 | |||
| 洛美沙星 | 352.3/265.1 | 352.3/265.1 | 30 | 93 |
| 352.3/308.3 | 23 | |||
| 氧氟沙星 | 362.3/318.3 | 362.3/318.3 | 25 | 90 |
| 362.3/261.2 | 35 | |||
| 依諾沙星 | 321.3/303.2 | 321.3/303.2 | 26 | 79 |
| 321.3/232.1 | 45 | |||
| 培氟沙星 | 334.2/316.1 | 334.2/316.1 | 25 | 84 |
| 334.2/290.2 | 24 | |||
| 奧比沙星 | 396.3/352.2 | 396.3/352.2 | 24 | 97 |
| 396.3/295.2 | 32 | |||
| 達(dá)氟沙星 | 358.4/340.2 | 358.4/340.2 | 28 | 86 |
| 358.4/255.4 | 50 | |||
| 氟羅沙星 | 370.4/326.2 | 370.4/326.2 | 24 | 100 |
| 370.4/269.2 | 36 | |||
| 莫西沙星 | 402.4/384.1 | 402.4/384.1 | 28 | 85 |
| 402.4/364.2 | 35 | |||
| 環(huán)丙沙星 | 332.2/288.2 | 332.2/288.2 | 23 | 80 |
| 332.2/245.2 | 30 | |||
| 司帕沙星 | 393.2/349.2 | 393.2/349.2 | 27 | 110 |
| 393.2/292.1 | 34 | |||
| 丹諾沙星 | 358.3/314.1 | 358.3/314.1 | 24 | 97 |
| 358.3/283.4 | 30 |
6、添加回收結(jié)果
化妝品中15種喹諾酮類藥物(添加水平10.0 μg/kg)檢測添加回收結(jié)果
| 基質(zhì) | 爽膚水 | 乳液 | 洗面奶 | 腋露 | 祛痘面膜 | BB霜 |
| 氧氟沙星 | 101.20% | 84.40% | 96.91% | 97.20% | 100.40% | 95.20% |
| 依諾沙星 | 96.00% | 102.40% | 115.96% | 80.30% | 89.60% | 92.80% |
| 培氟沙星 | 92.40% | 92.40% | 85.17% | 101.32% | 62.80% | 83.20% |
| 奧比沙星 | 82.80% | 96.40% | 107.21% | 82.58% | 90.40% | 88.80% |
| 達(dá)氟沙星 | 78.80% | 94.80% | 81.31% | 164.09% | 63.20% | 76.80% |
| 氟羅沙星 | 91.60% | 105.60% | 97.72% | 95.77% | 100.80% | 101.60% |
| 莫西沙星 | 104.00% | 103.60% | 101.75% | 99.11% | 102.80% | 64.80% |
| 恩諾沙星 | 106.80% | 108.40% | 103.10% | 118.64% | 83.60% | 89.60% |
| 環(huán)丙沙星 | 86.40% | 115.60% | 89.81% | 99.53% | 95.60% | 78.00% |
| 司帕沙星 | 98.00% | 98.40% | 78.44% | 74.91% | 79.20% | 87.20% |
| 雙氟沙星 | 88.40% | 90.00% | 92.17% | 105.21% | 92.80% | 94.00% |
| 丹諾沙星 | 116.80% | 122.80% | 96.82% | 91.39% | 88.40% | 84.00% |
| 沙拉沙星 | 88.40% | 78.80% | 69.43% | 96.74% | 105.20% | 85.20% |
| 洛美沙星 | 99.60% | 90.00% | 98.14% | 70.91% | 99.60% | 96.00% |
| 馬波沙星 | 82.00% | 109.20% | 90.27% | 115.77% | 82.80% | 110.80% |
15種喹諾酮類25 μg/L MRM色譜圖
馬波沙星25 μg /L XIC色譜圖
依諾沙星25 μg/L XIC色譜圖
氟羅沙星25 μg/L XIC色譜圖
氧氟沙星25 μg/L XIC色譜圖
培氟沙星25 μg/L XIC色譜圖
環(huán)丙沙星25 μg/L XIC色譜圖
洛美沙星25 μg/L XIC色譜圖
丹諾沙星25 μg/L XIC色譜圖
達(dá)氟沙星25 μg/L XIC色譜圖
恩諾沙星25 μg/L XIC色譜圖
奧比沙星25 μg/L XIC色譜圖
沙拉沙星25 μg/L XIC色譜圖
雙氟沙星25 μg/L XIC色譜圖
司帕沙星25 μg/L XIC色譜圖
莫西沙星25 μg/L XIC色譜圖
化妝品中15種喹諾酮類藥物的檢測——UPLC-MS/MS法相關(guān)產(chǎn)品信息：
貨號 | 名稱 | 規(guī)格 |
樣品前處理 | ||
68207 | ProElut PXC | 500 mg/12 mL 20/pk |
244358 | 12管防交叉污染真空SPE萃取裝置 | 12位 |
4806 | 考克(控制流量) | 15/pk |
99011 | 真空/正壓兩用泵，無油 | 1/pk |
99013 | 抽濾瓶套裝 (包括硅橡膠管2米,2L抽濾瓶及橡膠塞) | 1/pk |
30039 | FitMax針頭式過濾器 Nylon | 13 mm,0.22 μm 100/pk |
30040 | FitMax針頭式過濾器 Nylon | 13 mm,0.45 μm 100/pk |
標(biāo)準(zhǔn)品 | ||
50P-C15717000 | 氧氟沙星[82419-36-1] | 100 mg |
50P-C13166950 | 依諾沙星[74011-58-8] | 100 mg |
50P-C15905000 | 培氟沙星磺酸鹽[149676-40-4] | 100 mg |
50P-C15742000 | 奧比沙星[113617-63-3] | 100 mg |
50P-C11960500 | 甲磺酸達(dá)氟沙星[119478-55-6] | 100 mg |
50P-C13658000 | 氟羅沙星[79660-72-3] | 100 mg |
83J-Y0000703 | 莫西沙星鹽酸鹽[186826-86-8] | 110 mg |
50P-C13170000 | 恩諾沙星[93106-60-6] | 100 mg |
50D-250693-5G | 環(huán)丙沙星[85721-33-1] | 5 g |
50P-C16972650 | 司帕沙星[110871-86-8] | 100 mg |
50P-C12627000 | 雙氟沙星鹽酸鹽[91296-86-5] | 100 mg |
50-D132445-100MG | 丹諾沙星[112398-08-0] | 100 mg |
50D-405234-10MG | 沙拉沙星[98105-99-8] | 10 mg |
50P-C14646000 | 洛美沙星鹽酸鹽[98079-52-8] | 100 mg |
55-34039-100MG | 馬波沙星[115550-35-1] | 100 mg |
色譜柱及保護(hù)柱 | ||
86005 | Leapsil C18 | 100 × 2.1 mm，2.7 μm |
HPLC溶劑?緩沖鹽?離子對試劑 | ||
50101 | 乙腈 HPLC級 | 4 L |
50108 | 乙醇 HPLC級 | 4 L |
50144 | 甲酸 HPLC級 | 50 mL |
通用色譜產(chǎn)品 | ||
52401B | 瓶架/藍(lán)色（現(xiàn)貨） | 50孔 |
52401A | 瓶架/白色（現(xiàn)貨） | 50孔 |
1034 | 樣品瓶（棕色/螺紋） | 2 mL, 100/pk |
1035 | 樣品瓶蓋/含墊（已經(jīng)組裝） | 100/pk |
H80465 | HPLC 進(jìn)樣針 | 25 μL |
紅色產(chǎn)品貨號#30039、#30040、#1034、#1035*