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雞精和味精中酸性橙Ⅱ號的檢測——SPE/HPLC法解決方案
雞精和味精中酸性橙Ⅱ號的檢測——SPE/HPLC法解決方案
參考標準《SN/T 3536-2013 出口食品中酸性橙Ⅱ號的檢測方法》
酸性橙Ⅱ?qū)儆诨と玖希ǔＪ墙瘘S色粉末，故俗稱金黃粉。食品工業(yè)中，酸性橙Ⅱ?qū)俜鞘秤蒙?，食品中禁止加入。這些物質(zhì)如果在食品加工中使用，人食用后可能會引起食物中毒，長期食用甚至會致癌。
方法優(yōu)勢
迪馬科技依據(jù)《SN/T 3536-2013 出口食品中酸性橙Ⅱ號的檢測方法》，開發(fā)了《雞精和味精中酸性橙Ⅱ號的檢測》方案：
- 采用氨水乙腈提取、ProElut NH2固相萃取柱凈化、液相色譜法檢測；
- 具有前處理步驟簡單、回收率高、方法穩(wěn)定性好、凈化效果優(yōu)異等特點；
- 定量限是0.1 mg/kg，與標準方法一致；
- 過柱方法簡單易操作，對操作人員要求不高，檢測成本相對較低。
雞精和味精中酸性橙Ⅱ號的檢測——SPE/HPLC法
1、適用范圍
本方案適用于雞精和味精中酸性橙Ⅱ的檢測，方法定量限0.1 mg/kg。
2、 標準品配制
- 儲備液100 mg/mL，準確稱取各標準品，用水配制成100 μg/mL的儲備液。
- 中間液10 μg/mL，分別吸取各單標標準儲備液，用水配制成10 μg/mL的中間液。
3、提取
- 2 g樣品，加入20 mL 氨水乙醇溶液，超聲提取10 min，振蕩5 min，6000 rpm離心2 min，收集上清液；
- 下面殘渣再用20 mL氨水乙醇溶液重復(fù)提取一次，合并兩次上清液；
- 取出20 mL上清液，40 ℃下減壓蒸至低于5 mL，用水定容至10 mL，混勻，準備凈化。
4、凈化—— ProElut NH2 500 mg/6 mL（Cat.# 63305）
(1)活 化： | 依次向柱中加入6 mL甲醇、6 mL 2%甲酸水，棄去流出液； |
(2)上 樣： | 將待凈化液加入柱中，棄去流出液； |
(3)淋 洗： (4)洗 脫： | 向柱中一次加入6 mL 2%甲酸水和6 mL甲醇，棄去流出液； 向柱中加入6 mL 10%氨水甲醇，收集流出液； |
(5)定 容： | 將洗脫液在50 ℃下氮吹近干，用水定容至1 mL，上機分析。 |
5、色譜條件
色譜柱：Diamonsil C18(2) 250 x 4.6 mm，5 μm（Cat.#：99603）
流速：1.0 mL/min
進樣量：20 μL
柱溫：35 ℃
檢測器：UV 484 nm
流動相：甲醇：0.02 mol/L乙酸銨=65:35
6、添加回收結(jié)果
表1 調(diào)料中酸性橙Ⅱ檢測的添加回收結(jié)果
| 回收率(%) | |||
添加水平0.1 mg/kg 加標量：10 mg/L，20 μL | 添加水平0.5 mg/kg 加標量：100 mg/L，10 μL | |||
雞精 | 味精 | 雞精 | 味精 | |
酸性橙Ⅱ | 85.61 | 92.00 | 97.42 | 89.21 |
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酸性橙Ⅱ標準品(0.5 μg/mL )檢測的液相色譜圖
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酸性橙Ⅱ標準品(0.1 μg/mL )檢測的液相色譜圖
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味精（添加水平為0.5 mg/kg）中酸性橙Ⅱ檢測的液相色譜圖
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味精（添加水平為0.1 mg/kg）中酸性橙Ⅱ檢測的液相色譜圖
味精（空白樣品）中酸性橙Ⅱ檢測的液相色譜圖
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雞精（添加水平為0.5 mg/kg）中酸性橙Ⅱ檢測的液相色譜圖
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雞精（添加水平為0.1 mg/kg）中酸性橙Ⅱ檢測的液相色譜圖
雞精（空白樣品）中酸性橙Ⅱ檢測的液相色譜圖
雞精和味精中酸性橙Ⅱ號的檢測——SPE/HPLC法相關(guān)產(chǎn)品信息
貨號 | 名稱 | 規(guī)格 |
樣品前處理 | ||
63305 | ProElut NH2 | 500 mg/6 mL 30/pk |
244358 | 12管防交叉污染真空SPE萃取裝置 | 12位 |
4803 | 1,3,6 mL柱管通用連接器 | 15/pk |
4806 | 考克(控制流量) | 15/pk |
99011 | 真空/正壓兩用泵，無油 | 1/pk |
99013 | 抽濾瓶套裝 (包括硅橡膠管2米, 2 L抽濾瓶及橡膠塞) | 1/pk |
30040 | FitMax針頭式過濾器 Nylon | 13 mm, 0.45 μm 100/pk |
色譜柱及保護柱 | ||
99603 | Diamonsil C18(2) 反相色譜柱 | 250 x 4.6 mm，5 μm |
6201 | EasyGuard C18保護柱套裝 | 10 x 4.0 mm 2個柱芯+1個柱套 |
標準品 | ||
12-NG-BS24-1G | 酸性橙II[633-96-5] | 1 g |
HPLC溶劑?緩沖鹽?離子對試劑 | ||
50102 | 甲醇 HPLC級 | 4 L |
50144 | 甲酸 HPLC級 | 50 mL |
50138 | 乙酸銨HPLC級 | 100 g |
通用色譜產(chǎn)品 | ||
52401B | 瓶架/藍色 | 50孔 |
52401A | 瓶架/白色 | 50孔 |
1034 | 樣品瓶（棕色/螺紋） | 2 mL, 100/pk |
1035 | 樣品瓶蓋/含墊（已經(jīng)組裝） | 100/pk |
H80465 | HPLC 進樣針 | 25 μL |
紅色產(chǎn)品貨號#30040、#1034、#1035*