試劑盒提取植物dna已經(jīng)獲得廣泛應(yīng)用。各個生化試劑廠家也都有了dna提取試劑盒產(chǎn)品。索萊寶作為國內(nèi)生化試劑供應(yīng)商提供了各類dna提取試劑盒。今天給大家介紹試劑盒提取植物dna步驟。當(dāng)然是以索萊寶產(chǎn)植物基因組dna提取試劑盒產(chǎn)品為例。
使用前先在漂洗液中加入無水乙醇，加入體積請參照瓶體上的標簽。所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。
1、植物組織預(yù)處理：取新鮮植物組織（不超過 100mg）或干重組織（不超過 20mg），于液氮中充分研磨細粉狀，讓液氮自然揮發(fā)。
2、將研磨好的植物組織粉末迅速轉(zhuǎn)移到預(yù)先裝有 400ul 溶液 A、20ul RNase A（10mg/ml）和 5ul β-巰基乙醇的離心管中，充分顛倒混勻，室溫放置 10min。
3、加入 140ul 溶液 B，充分顛倒混勻，12000rpm 離心 10min，將上清轉(zhuǎn)移新離心管(約 400-500ul)，注意不要吸入沉淀。
4、加入和上清相同體積的溶液 C，充分顛倒混勻，再加入和溶液 C 相同體積的無水乙醇，此時若出現(xiàn)絮狀物，將絮狀物吹散后一起加入吸附柱中，12000rpm 離心 5min，棄廢液，一次加不完可分兩次加入。
注意：如果吸附柱膜呈綠色或離心時有堵塞現(xiàn)象，可向吸附柱中加入 600ul 無水乙醇，并適當(dāng)延長離心時間。
5、 向吸附柱中加入 600ul 漂洗液(請先檢查是否已加入無水乙醇)，12000rpm 離心 1min，棄廢液，將吸附柱放回收集管。
6、向吸附柱中加入 600ul 漂洗液，12000rpm 離心 1min，棄廢液，將吸附柱放回收集管中， 12000rpm 離心 2min。
7、將吸附柱置于室溫或 50℃溫箱放置數(shù)分鐘，否則殘余的乙醇可能會影響后續(xù)的實驗如酶切、PCR 等。
8、將吸附柱放入一個干凈的離心管中，向吸附膜中央懸空滴加 50-200ul 經(jīng) 65℃水浴預(yù)熱的洗脫液，室溫放置1-5min，12000rpm 離心 2min，即可得到高質(zhì)量的植物基因組 DNA。
9、(可選)離心所得洗脫液再加入吸附柱中，室溫放置 2min，12000rpm 離心 2min。
以上是索萊寶植物基因組dna提取試劑盒使用步驟。如果還有不理解可以索萊寶部分獲取幫助。
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