目錄:北京索萊寶科技有限公司>>分子生物學(xué)>>DNA電泳>> A8350低熔點瓊脂糖 DNA電泳
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 2.5g |
|---|---|---|---|
| 貨號 | A8350 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
| 主要用途 | 正確的加熱方式對瓊脂糖的充分溶解和凝結(jié)至關(guān)重要 |
低熔點瓊脂糖 DNA電泳
貨號：A8350
規(guī)格：2.5g/5g/100g
DNA、脂蛋白和免疫電泳用；由于其低熔點的特性特別適用于DNA等回收。
A low-melting agarose that melts between 62-68 °C and remains liquid for several hours at 37°C. Ideal for purification of macromolecules from agarose slices and for in-gel enzymatic manipulations.
DNase (P/F)
EEO (-Mr) 0.12
Gel Strength (1.0%) (g/cm2) 250
Gelling Range (1.0%) (°C) 24 - 29
Melting Range (°C) 62 - 68
Moisture (%) < 10
Protease (P/F)
RNase (P/F)
Sulfate (%) 0.1
正確的加熱方式對瓊脂糖的充分溶解和凝結(jié)關(guān)重要，在此，我們提供以下幾點作為正確制備瓊脂糖凝膠的操作參考。
? 瓊脂糖加熱溶解所需時間短。
? 瓊脂糖在TAE或者TBE緩沖液中不溶解，加熱時，瓊脂糖顆粒水化形成溶液，水化是時間依賴的，不同的瓊脂糖水化點不同。瓊脂糖純度高，超微顆粒，非常適合作為電泳實驗載體。對比于其他的瓊脂糖，瓊脂糖水化速度快，使用者無需煮沸過長時間，否則易導(dǎo)致膠液濃稠，不利于混勻，凝膠后易破損。
瓊脂糖凝膠制備
用1×TBE溶液配制1%濃度瓊脂糖凝膠
1.用于制備膠液的錐形瓶體積應(yīng)為膠液體積的2-4倍，緩慢向緩沖液中加入瓊脂糖，邊加邊攪拌，防止瓊脂糖聚集。記錄瓶體和溶液總重量。
2.微波爐高火加熱30s，根據(jù)配制的溶液體積調(diào)整加熱時間。加熱時間與微波爐、瓶體大小和瓊脂糖濃度有關(guān)。
3.搖勻瓊脂糖溶液。
4.再次高火加熱30s，搖勻瓊脂糖溶液。
5.將溶液再次放回微波爐，高火加熱沸騰（大約10-35s）。接觸移動時瓊脂糖膠液可能會劇烈沸騰，小心操作，避免燙傷。從微波爐拿出后，室溫冷卻1-2min，輕輕搖晃使液體里的氣泡溢出。
6.重新放回微波爐，高火加熱，使之沸騰約15s，觀察瓊脂糖的溶解狀態(tài)，如果仍有顆粒存在，重復(fù)該步驟直所有晶體全部溶解。
7.待瓊脂糖*溶解成液體，重新稱量總重量，計算蒸發(fā)液體量，用水補齊原始重量，搖勻液體。
8.建議膠液冷卻50-55℃時灌膠，有利于凝膠孔徑均勻*，不于損傷制膠儀。灌膠前輕輕搖晃瓊脂糖溶液，釋放膠液中殘存的氣泡。
9.向制膠槽中灌膠，一般膠的厚度3-5mm，灌膠后盡量排除梳孔之間或底部的氣泡。
10.在室溫放置（30-45min）使膠充分凝結(jié)。
如果要制備不同濃度和不同體積的凝膠，請注意以下兩點：
1.在凝膠溶液煮沸前少進行2次搖勻。
2.膠液沸騰后，每隔10-15s觀察一次膠液溶解程度（間隔時間取決于膠液濃度和體積）。
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