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            上海研謹(jǐn)生物科技有限公司

            RNA Pulldown、DNA Pull-down

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            所在地上海市

            更新時(shí)間:2025-01-14 13:29:11瀏覽次數(shù):3552次

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            RNA Pulldown、DNA Pull-down

             

             

            實(shí)驗(yàn)意義

             

            核酸與蛋白質(zhì)的互作是細(xì)胞功能的核心,包括蛋白質(zhì)合成、mRNA組裝等生命活動(dòng)中重要的代謝過程,研究核酸與蛋白質(zhì)的互作是研究生命科學(xué)的基本工具。

             

            實(shí)驗(yàn)原理及步驟

            RNA Pull-down:通過體外轉(zhuǎn)錄RNA并用生物素進(jìn)行標(biāo)記,然后與胞漿蛋白混合物共同孵育形成RNA蛋白質(zhì)復(fù)合物,然后用鏈霉親和素標(biāo)記的磁珠分離純化該復(fù)合物(利用生物素與鏈霉親和素的非共價(jià)親和作用)。洗脫后進(jìn)行檢測(cè),如果檢測(cè)蛋白為已知蛋白可通過WB進(jìn)行鑒定,如果檢測(cè)未知蛋白則可以結(jié)合質(zhì)譜進(jìn)行鑒定。流程為提取細(xì)胞胞漿蛋白樣品液- -體外轉(zhuǎn)錄合成生物素標(biāo)記RNA-共孵育_ -磁珠純化- -洗脫得到互作蛋白. -WB或質(zhì)譜鑒定。

            DNA Pull-down:通過合成標(biāo)記有生物素的DNA片段,與細(xì)胞核蛋白混合物共同孵育形成DNA-蛋白質(zhì)復(fù)合物,然后用鏈霉親和素磁珠純化,WB或者質(zhì)譜進(jìn)行檢測(cè)鑒定。流程為提取核蛋白樣品液- -合成生物素標(biāo)記DNA-共孵育- -磁珠純化- ~洗脫

            得到互作蛋白- -WB或質(zhì)譜鑒定。

             

            結(jié)果展示

            RNA Pull-down

             

             

             

             

            DNA Pull-down .

             

             

             

            實(shí)驗(yàn)周期及交付標(biāo)準(zhǔn)

            1.實(shí)驗(yàn)周期: 1-2個(gè)月

            2.交付標(biāo)準(zhǔn):

            RNA Pull-down:探針序列、X光片.實(shí)驗(yàn)報(bào)告(實(shí)驗(yàn)步驟、試劑、儀器等)

            DNA Pull-down:探針序列、X光片.實(shí)驗(yàn)報(bào)告(實(shí)驗(yàn)步驟.試劑、儀器等)

             

            需確認(rèn)信息

            1.目的基因種屬及ID號(hào)

            2.基因序列信息

            3.樣本種屬及類型

            4.樣本數(shù)量.

            5.分析要求

            參考文獻(xiàn)

            [1]Chen R,Liu Y,Zhuang H,et al. Quantitative proteomics reveals that long non-coding RNA MAL AT1 interacts withDBC1 to regulate p53 acetylation[J]. Nucleic Acids Research, 2017, 45(17):9947-9959.

            [2]Tran D H , Shishido Y,Chung S P , et al. lnentication of DNA-binding proteins that interact with the 5-f1anking region

            of the human D-amino acid oxidase gene by pull-down assay coupled with two-dimensional gel electrophoresis and

            mass spectrometry[J]. Journal of Pharmaceutical & Biomedical Analysis, 2015, 116:94-100.

             

            部分實(shí)驗(yàn)代做服務(wù)

            ELISA試劑盒免費(fèi)代檢測(cè)

            CCK8檢測(cè)

            基因組DNA提取

             

            蛋白相互作用分析

            Western Blot

             

            免疫組化

            熒光定量PCR

            動(dòng)物模型服務(wù)

            流式細(xì)胞檢測(cè)

            細(xì)胞增殖

            激光共聚焦

            DNA甲基化實(shí)驗(yàn)

            細(xì)胞劃痕

            鈣離子濃度檢測(cè)

            掃描電鏡實(shí)驗(yàn)

            microRNA 測(cè)序

            動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

            Taqman探針

            ATP/ADP檢測(cè)

             

            石蠟/冰凍切片

            定點(diǎn)突變

            線粒體膜電位(MMP)檢測(cè)

            細(xì)胞生長(zhǎng)曲線的測(cè)定

            藥理毒理動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

             

            免疫共沉淀

            真核表達(dá)載體構(gòu)建

            染色質(zhì)免疫沉淀CHIP

            非標(biāo)定量(Label-free)實(shí)驗(yàn)

            多克隆抗體制備服務(wù)

            服務(wù)名稱: . 多克隆抗體制備服務(wù)$r$n提供商: 上海

            RNA反義純化(RAP) 實(shí)驗(yàn)服務(wù)

            服務(wù)名稱: . RNA反義純化(RAP) 實(shí)驗(yàn)服務(wù)$r$n提供商:

            RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀(RIP)實(shí)驗(yàn)服務(wù)

            提供商: 上海研謹(jǐn)生物$r$n服務(wù)名稱:

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