狠狠色丁香久久综合婷婷亚洲成人福利在线-欧美日韩在线观看免费-国产99久久久久久免费看-国产欧美在线一区二区三区-欧美精品一区二区三区免费观看-国内精品99亚洲免费高清

            上海旦鼎國際貿(mào)易有限公司
            中級會員 | 第15年

            13564833058

            艾本德
            pcr儀 基因擴(kuò)增儀
            分子生物
            電泳設(shè)備
            IKA RCT Basic磁力攪拌器
            顯微鏡|凝膠成像
            培養(yǎng)箱|搖床
            制冷設(shè)備|恒溫設(shè)備
            光學(xué)儀器
            食品檢測|農(nóng)產(chǎn)品檢測儀
            科晶
            通用分析儀器
            細(xì)胞分析
            物理屬性
            滅菌器|生物安全
            電化學(xué)|水質(zhì)測定儀
            環(huán)衛(wèi)園林
            土壤分析
            藥物測定
            無損檢測儀器
            天平|衡量|力學(xué)
            真空泵|循環(huán)泵|蠕動泵
            樣品處理|離心|混合
            過濾器|純水器
            干燥箱|試驗(yàn)箱|加熱設(shè)備
            光度計
            便攜式濁度儀
            消解儀
            甲醛測定儀
            農(nóng)藥殘毒檢測儀
            溶氧儀
            實(shí)驗(yàn)室設(shè)備
            環(huán)境監(jiān)測設(shè)備

            PCR反應(yīng)技術(shù)的反應(yīng)基本步驟

            時間:2023/4/16閱讀:978
            分享:

            1、變性

            90~94℃的高溫處理可使模板 DNA 雙鏈間氫鍵斷裂,解離成單鏈但不改變其化學(xué)性質(zhì),變性的時間一般為30s,如果模板的 G+C 含量較高,變性時間可能延長。

            1 (6).jpg

            2、退火

            退火的溫度一般降低至25~65℃。在退火過程中,引物分別與待擴(kuò)增的 DNA 片段的兩條鏈的3'端互補(bǔ)配對。退火的溫度取決于引物的 T值,并通過預(yù)備試驗(yàn)來最后確定。一般引物越短,其 T也越低,對于10bp 左右的隨機(jī)引物,退火溫度在37℃左右,反之則高。退火溫度越高,引物與模板結(jié)合的特異性增強(qiáng),非特異性的擴(kuò)增概率降低,但擴(kuò)增效率也隨之降低。相反,隨著溫度的降低,引物與模板非特異性結(jié)合的概率提高。引物的長度越長,其退火溫度則越高,否則會發(fā)生非特異性結(jié)合,降低 PCR 產(chǎn)物對模板的忠實(shí)程度。退火時間一般為30s。

            1638154186810716.png

            3、延伸

            Taq DNA 聚合酶的最適溫度為70~74℃,在此溫度下 Taq DNA 聚合酶以單鏈 DNA 鏈為模板,將單核苷酸逐個加入到引物的3'端,使引物不斷延長,從而合成新的 DNA 鏈。新合成的引物延伸鏈在下一輪循環(huán)時就可以作為模板。反應(yīng)步驟的溫度和時間可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求自行設(shè)定,一般要經(jīng)過20~30個循環(huán),擴(kuò)增產(chǎn)物需要經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行鑒定。




            會員登錄

            ×

            請輸入賬號

            請輸入密碼

            =

            請輸驗(yàn)證碼

            收藏該商鋪

            X
            該信息已收藏!
            標(biāo)簽:
            保存成功

            (空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)

            常用:

            提示

            X
            您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復(fù)您~
            撥打電話
            在線留言