一、為什么需要進(jìn)行柱平衡？

· 置換色譜柱內(nèi)儲(chǔ)存的溶劑

· 在流動(dòng)相和固定相之間建立平衡

· 濕潤(rùn)固定相以實(shí)現(xiàn)分析物的分配

· 產(chǎn)生可靠的結(jié)果。

二、色譜柱沒(méi)有平衡好會(huì)產(chǎn)生何種影響？

·基線(xiàn)波動(dòng)

·保留時(shí)間變化

·峰形變形

·分離度變差

·響應(yīng)異常

·產(chǎn)生鬼峰。

三、哪些因素影響色譜柱平衡？

- 固定相性質(zhì)：具有龐大基團(tuán)或空間位阻的固定相（例如苯基柱）可能需要更長(zhǎng)的柱平衡時(shí)間。

- 表面積：具有較低表面積的固定相有利于更快的柱平衡。

- 孔徑大?。壕哂休^寬孔徑（因此表面積較低）的固定相有利于更快的柱平衡。

-流動(dòng)相組成：具有較高濃度的緩沖鹽和離子對(duì)試劑的流動(dòng)相需要更長(zhǎng)的平衡時(shí)間。

-水相的比例：如果流動(dòng)相中的水相含量較高，柱平衡時(shí)間可能較長(zhǎng)。

-柱溫：較高的柱溫會(huì)加速柱平衡，因?yàn)榉肿舆\(yùn)動(dòng)加快（黏度降低）。

-梯度洗脫中的緩沖鹽濃度：通過(guò)在兩個(gè)流動(dòng)相瓶中加入緩沖鹽溶液，以保持洗脫過(guò)程中緩沖鹽濃度的穩(wěn)定，有助于加快洗脫過(guò)程中的柱平衡速度。

注意：在平衡過(guò)程的開(kāi)始階段應(yīng)避免使用緩沖鹽：有機(jī)相，而是使用比例相符的水：有機(jī)溶劑，然后再使用初始流動(dòng)相平衡。