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            上海研謹(jǐn)生物科技有限公司
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            炭疽桿菌(BA)核酸試劑盒(熒光-PCR 法)

            參  考  價(jià)面議
            具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

            產(chǎn)品型號

            品       牌其他品牌

            廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

            所  在  地上海市

            更新時(shí)間:2024-08-30 11:45:03瀏覽次數(shù):3415次

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            供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,食品,化工,生物產(chǎn)業(yè)
            炭疽桿菌(BA)核酸檢測試劑盒(熒光-PCR 法)公司提供實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):PCR技術(shù)服務(wù)、細(xì)胞培養(yǎng)、染色技術(shù)服務(wù)、原位雜交技術(shù)服務(wù)、免疫沉淀技術(shù)服務(wù)、Western Blotting技術(shù)服務(wù),并為廣大科研用戶提供各種高品質(zhì)的化學(xué)試劑、生物學(xué)試劑、免疫學(xué)檢測,ELISA試劑盒、生化試劑盒、分析標(biāo)準(zhǔn)品、對照品、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、食品安全檢測試劑、動(dòng)物疫病類檢測產(chǎn)品、獸藥殘留檢測試劑、細(xì)胞培養(yǎng)服務(wù)等,應(yīng)用覆蓋

             

            炭疽桿菌(BA)核酸檢測試劑盒(熒光-PCR )

            【產(chǎn)品名稱】 將步驟 1 提取的 DNA、陽性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品各取 4μL,分別加入相應(yīng)的反

             

            通用名稱:炭疽桿菌(BA)核酸檢測試劑盒(熒光-PCR )

            應(yīng)管中,蓋好管蓋,混勻,短暫離心。

             

            Name Bacillus Anthracis Detection Kit (Real-Time PCR Method) 4 擴(kuò)增(核酸擴(kuò)增區(qū))

            【包裝規(guī)格】48T/

            【預(yù)期用途】

            炭疽是由炭疽桿菌(Bacillus Anthracis, BA)感染引起的一種人獸共患病。BA 在環(huán)境中形成芽孢,可長期、穩(wěn)定地存在于自然界中。由于 BA 的穩(wěn)定性及其致病性,易引發(fā)突發(fā)公共衛(wèi)生事件。目前的 BA 檢測方法主要基于病原體的培養(yǎng)、染色鏡檢、血清學(xué)檢測等,但這些方法均不適合早期的快速偵檢?;诤怂釞z測的熒光-PCR技術(shù),因其靈敏度高、操作簡單、特異性好,可快速檢測炭疽病原,及時(shí)控制炭疽疫

            4.1 將待檢測反應(yīng)管置于熒光定量 PCR 儀反應(yīng)槽內(nèi);

            4.2 設(shè)置好通道、樣品信息,反應(yīng)體系設(shè)置為 25μL;熒光通道選擇: 檢測通道(Reporter DyeFAM, 淬滅通道(Quencher DyeNONE,ABI 系列儀器請勿選擇 ROX 參比熒光,選擇 None 即可。

            4.3 推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置:

             

            情 。

            [1] 本試劑盒適用于檢測皮膚水泡液、咽拭子、可疑食物等樣本中的炭疽桿菌,用于炭疽桿菌感染的輔助診斷。 5 結(jié)果分析判定

            【檢驗(yàn)原理】

            6.1 結(jié)果分析條件設(shè)定

            本試劑對炭疽桿菌特異性基因設(shè)計(jì)引物和熒光探針[2-3],用熒光 PCR 技術(shù)對炭疽 設(shè)置 Baseline  Threshold:一般直接按機(jī)器自動(dòng)分析的結(jié)果分析,當(dāng)曲線出現(xiàn)桿菌的核酸進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測,用于臨床上對可疑感染者的病原學(xué)診斷。

            【試劑組成】

            整體傾斜時(shí),根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié) Baseline start (一般可在 3~15 范圍內(nèi)調(diào)

            節(jié))、stop (一般可在 5~20 范圍內(nèi)調(diào)節(jié)),以及 Threshold Value (上下拖動(dòng)閾值線至高于陰性對照),重新分析結(jié)果。

            規(guī)

             

            核酸提取液酶液

            BA 反應(yīng)液

            BA 陽性質(zhì)控品

            陰性質(zhì)控品

            注:

            1.5mL×2 

            50μL×1 

            1.0mL×1 

            50μL×1 

            250μL×1 

            7結(jié)果判斷

            陽性:檢測通道 Ct ≤35.0,丏曲線有明顯的指數(shù)增長曲線。

            可疑:檢測通道 Ct >35.0,丏出現(xiàn)明顯擴(kuò)增曲線的樣本建議重復(fù)試驗(yàn),重復(fù)試驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn) Ct ≤35.0 和明顯擴(kuò)增曲線者為陽性,否則為陰性。

            陰性:樣本檢測結(jié)果無 Ct 值丏無明顯的擴(kuò)增曲線。

            8 檢測方法的局限性

            1) 不同批號試劑不能混用。 Ø 樣本檢測結(jié)果不樣本收集、處理、運(yùn)送以及保存質(zhì)量有關(guān);

             

            2) 試劑盒內(nèi)各試劑組份足夠包裝規(guī)格所標(biāo)示的檢測次數(shù)。

            【儲存條件及有效期】

            -20℃±5℃,避光保存、運(yùn)輸、反復(fù)凍融數(shù)不超過 5 次,有效期 12 個(gè)月。

            【適用儀器】

            ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、eppendorf 等系列

            Ø  樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,會出現(xiàn)假陽性結(jié)果;

            Ø  陽性對照、擴(kuò)增產(chǎn)物泄漏,會導(dǎo)致假陽性結(jié)果;

            Ø  病原體在流行過程中基因突變、重組,會導(dǎo)致假陰性結(jié)果;

            Ø  不同的提取方法存在提取效率差異,會導(dǎo)致假陰性結(jié)果;

            Ø  試劑運(yùn)輸,保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測效能下降,出現(xiàn)假陰性或定  量檢測不準(zhǔn)確的結(jié)果;熒光定量 PCR 檢測儀。 Ø 本檢測結(jié)果僅供參考,如須確診請結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測手段。

            【標(biāo)本采集】

            皮膚炭疽,取水泡液 1mL;肺炭疽,采集咽拭子標(biāo)本,放入標(biāo)本采集管中;腸炭疽,取糞便 1g

            【保存和運(yùn)輸】

            上述標(biāo)本短期內(nèi)可保存于-20℃,長期保存可置-70℃,但不能超過 6 個(gè)月,標(biāo)本運(yùn)送應(yīng)采用 2~8℃冰袋運(yùn)輸,嚴(yán)禁反復(fù)凍融。

            【使用方法】

            9. 質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)

            陰性質(zhì)控品:無明顯擴(kuò)增曲線或無 Ct 值顯示;

            陽性質(zhì)控品:擴(kuò)增曲線有明顯指數(shù)生長期,丏 Ct ≤32;

            以上條件應(yīng)同時(shí)滿足,否則實(shí)驗(yàn)視為無效。

             

            【注意事項(xiàng)】

            Ø  所有操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行;

            Ø 試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化,*混勻并短暫離心;

            Ø  反應(yīng)液應(yīng)避光保存;

            1. . 樣品處理(樣本處理區(qū)) Ø 反應(yīng)中盡量避免氣泡存在,管蓋需蓋緊;

            1.1 1 樣本前處理

            固體樣本:手術(shù)剪剪碎混勻后取 0.5g 于研磨器中研磨,加入 1.5mL 生理鹽水后繼續(xù)研磨,待勻漿后轉(zhuǎn)至 1.5mL 滅菌離心管中,8000rpm 離心 2min,取上清液 100μ

            L 1.5mL 滅菌離心管中;液體樣本:直接取 100μL 1.5mL 滅菌離心管中。

            1 111 提取

            1) 對上述處理好的標(biāo)本加入 50μL 核酸提取液,100℃恒溫處理 10min13,000rpm 離心 5min,取上清液轉(zhuǎn)移至新的 1.5mL EP 管,-20℃保存;

            2) DNA 的提取也可以采用深圳綠食源生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的 DNA 提取試劑盒(離心柱提取法),請嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。

            2. 試劑配制(試劑準(zhǔn)備區(qū))

            根據(jù)待檢測樣本總數(shù),設(shè)所需要的 PCR 反應(yīng)管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對照+1 管陽性對照;樣品每滿 7 份,多配制 1 ),每測試反應(yīng)體系配制如下表:

            Ø 使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)與用工作服;

            Ø 樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進(jìn)行,以免交叉污染;

            Ø 實(shí)驗(yàn)完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器;

            Ø  試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對待,并按照《微生物生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通  則》進(jìn)行處理。

             

            試劑 BA 反應(yīng)液 酶液

            用量(樣本數(shù)為 N20μL

            1μL將混合好的測試反應(yīng)液分裝到 PCR 反應(yīng)管中,21uL/管。

            3 加樣(樣本處理區(qū))

             

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