核酸提取蕩滌時(shí)技術(shù)條件
一、蕩滌首先必須要將沉淀懸浮起來;
二就是要有一定的時(shí)間,特別是當(dāng)核酸沉淀比較大時(shí)(使核酸沉淀zui后蓬松);
三是小量多次;第加減乘除四種是去上清要*。
課本中的操作基本上都是“倒掉上清后倒置在吸水紙上一會(huì)兒”,這一描寫本身沒有問題,且非常便捷,但由于他來自海外,天然就有了“水土不服”的問題。假如離心管是通過硅化的,由于液體幾乎不掛壁,所以上清可以去除得十分*;好的管子,縱然沒有通過硅化,量也寥寥,也沒有啥子問題;差的管子,液體的掛壁十分可觀,其量多蒞會(huì)影響后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。惟一不受管子品質(zhì)影響的操作,就是倒掉液體后再短暫離心,將殘液用移液器吸出。必須要牢記的是,殘液中都包括上一步操作中的雜質(zhì),其量與混勻程度、核酸沉淀的體積都相關(guān)。揮發(fā)時(shí)去掉的是酒精,雜質(zhì)是不會(huì)被揮發(fā)去除的。培養(yǎng)箱 生化培養(yǎng)箱 恒溫培養(yǎng)箱
額外,核酸沉淀的體積也表決了蕩滌的強(qiáng)度。沉淀越大,安放時(shí)間相對(duì)要長(zhǎng)一點(diǎn)兒,蕩滌回?cái)?shù)也要思索問題增加。