目錄:上海微科生物技術(shù)有限公司>>德國NOBIMPEX>>T細胞培養(yǎng)基>> Nobimpex 無血清T細胞培養(yǎng)基 003 004
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Nobimpex 無血清T細胞培養(yǎng)基 003 004套裝適用于促進和優(yōu)化人來源 T 細胞的擴增。此培養(yǎng)基可支持高密度細胞的培養(yǎng)。無血清培養(yǎng)相比含血清培養(yǎng)可以減少批次差異，并且可以消除血清帶來的安全隱患。該培養(yǎng)基套裝包含“無血清T細胞促生長添加劑Nobimpex 004（貨號N104-0050，50ml）"和“無血清T細胞擴增培養(yǎng)基Nobimpex003（貨號N103-1000，1000ml）"。其中 “Nobimpex 004"獨立使用于免疫細胞治療中T細胞前5天的擴增培養(yǎng)，而“Nobimpex 003"則完成T細胞擴增培養(yǎng)的后續(xù)幾天的工作。
無動物來源成分：
Nobimpex T細胞培養(yǎng)基套裝均為無血清培養(yǎng)基，不含血清及其他動物來源成分，不含抗生素和細胞因子，人血清白蛋白和人轉(zhuǎn)鐵蛋白是僅有的人來源成分（供體的HIV1&2、HBV和HCV檢測為陰性）。
高質(zhì)量控制：
Nobimpex無血清培養(yǎng)基兼具高質(zhì)量和安全性的優(yōu)良品質(zhì)，嚴格的質(zhì)量控制包括無菌、內(nèi)毒素、支原體等微生物測試、PH值、滲透壓和細胞功能性等方面測試。
培養(yǎng)基的配制：
Nobimpex 003需要添加，加入 20ml200mM 的L-溶液或者0.584 g L-谷粉末（輻射滅菌）每升。建議“Nobimpex 004"按照細胞培養(yǎng)前5天、分2次進行添加（每次25ml）；5天后使用適量的“Nobimpex 003"進行培養(yǎng)擴增。所有培養(yǎng)基在使用前請按照確定的配方分別添加必須的刺激用抗體和細胞因子。該培養(yǎng)基是無菌液體（1X），可按需選擇添加抗生素。
使用說明：
1. 取25ml“Nobimpex 004培養(yǎng)基"添加確定量的刺激用抗體和細胞因子；
2. 按照已確定的方法來準備新鮮或者凍存的 PBMNCs (外周血單個核細胞)；
3. 用計數(shù)器計數(shù)細胞數(shù)量；
4. 轉(zhuǎn)移適當數(shù)量的細胞到含有上述培養(yǎng)基（已加入細胞因子和刺激抗體）的培養(yǎng)瓶中；
5. 把培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱中，37 ℃，5% CO2培養(yǎng)；
6. 第3天，添加另外25ml已配制好的“Nobimpex 004培養(yǎng)基" （已加入細胞因子和刺激抗體）；
7. 第5天及其余時間，添加適量的已配制好的 “Nobimpex 003培養(yǎng)基" （已加入細胞因子和刺激抗體）。
產(chǎn)品特性:
Nobimpex 無血清T細胞培養(yǎng)基套裝(Nobimpex003&004)已經(jīng)經(jīng)過嚴格的測試，可用于PBMNC中的T細胞擴增。本產(chǎn)品已與其他幾種商業(yè)化可用的無血清培養(yǎng)基做了T細胞擴增比較。實驗中，200，000 PBMNCs/ml 在本產(chǎn)品和另一商業(yè)化培養(yǎng)基中培養(yǎng)7天，培養(yǎng)基含有100 IU/ml IL-2和anti-CD3 (OKT3， 20ng/ml)抗體。
實驗中擴增的T細胞使用51鉻釋放分析來測試細胞溶解能力。靶細胞(K562，人慢性白血病細胞)，使用51鉻標記并連接到anti-CD3 (OKT3) Fc受體。當與效應或者細胞毒T細胞混合時，靶細胞就會凋亡或者溶解，并釋放51鉻。上清中51鉻的釋放量與靶細胞的死亡及功能T細胞的數(shù)量成正比。
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