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            上海研謹生物科技有限公司

            真核表達載體構建實驗流程

            訂       金: 3000

            訂  貨  量: ≥1  件

            具體成交價以合同協(xié)議為準

            產品型號

            品牌其他品牌

            廠商性質生產商

            所在地上海市

            更新時間:2025-02-18 10:15:51瀏覽次數:1285次

            聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網
            產地類別 國產 應用領域 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產業(yè)
            提供商: 上海研謹生物
            服務名稱: 真核表達載體構建實驗流程
            規(guī)格: 實驗服務
            價格: 3000元
            收費標準/服務周期/提供結果:
            歡迎咨詢詳談,我們會根據您的方案及需求制定詳細的服務協(xié)議。
            更多實驗技術服務請瀏覽網站其他內容,或來電詳詢!

            真核表達載體構建實驗服務

             

             

             

            .服務介紹

            分子克隆是在分子水平上提供一種純化和擴 增特定DNA**片段的方法。常含有目的基因,用體外重組方法將它們插入克隆載體,形成重組克隆載體,通過轉化與轉導的方式,引入適合的寄主體內得到復制與擴增,然后再從篩選的寄主細胞內分離提純所需的克隆載體,可以得到插入DNA的許多拷貝,從而獲得目的基因的擴增。

             

            二、實驗原理

            外源DNA與載體分子的連接就是DNA重組,這樣重新組合的DNA叫做重組體或重組子。重組的DNA分子是在DNA連接酶的作用下,有Mg2+、ATP存在的連接緩沖系統(tǒng)中,將分別經酶切的載體分子與外源DNA分子進行連接。DNA連接酶有兩種: T4噬菌體DNA連接酶和大腸桿菌DNA連接酶。兩種DNA連接酶都有將兩個帶有相同粘性末端的DNA分子連在--起的功能, 而且T4噬菌體DNA連接酶還有一種大腸桿菌連接酶沒有的特性,即能使兩個平末端的雙鏈DNA分子連接起來。但這種連接的效率比粘性末端的連接效率低,一般可通過提高T4噬菌體DNA連接酶濃度或增加DNA濃度來提高平末端的連接效率。T4噬菌體DNA連接酶催化DNA連接反應分為3步:首先,T4DNA連接酶與輔助因子ATP形成酶- AMP復合物;然后,酶一AMP復臺物再結合到具有5磷酸基和3羥基切口的DNA上,使DNA腺苷化;后產生一個新的磷酸二酯鍵, 把切口封起來。

            DNA重組的方法主要有粘端連接法和平端連接法,為了防止載體本身的自連,可以通過(牛小腸堿性磷酸酶)CIP處理克服。

            連接反應的溫度在37°C時有利于連接酶的活性但是在這個溫度下,粘性末端的氫鍵結合是不穩(wěn)定的。因此人們找到了一個折中溫度,即12-16°C, 連接12-16h(過夜), 這樣既可大限度地發(fā)揮連接酶的活性,又兼顧到短暫配對結構的穩(wěn)定。

             

            三、實驗流程

            1.目的DNA的擴增和純化;

            2.連接反應;

            3.電泳檢測連接產物。

             

            四、客戶提供

            樣本DNA,基因序列,試劑盒。

             

            五、公司提供

            構建好的載體,電泳膠圖,測序結果。

             

            實驗代做服務:

             

            免疫組化IHC染色實驗服務

            細胞、組織TUNEL凋亡染色實驗服務

            試劑盒免費代檢測

            實驗室代做實驗項目

             

            透射電鏡服務實驗服務

            石蠟/冰凍切片TUNEL凋亡

            核仁組成區(qū)嗜銀-AGNOR染色實驗服務

            免疫共沉淀(CHIRP)實驗

            RNA結合蛋白免疫沉淀(RIP)實驗代做

            酶聯(lián)免疫(ELISA)技術服務

            雞傳染性法氏囊病病毒VP2抗體診斷試劑盒

            喹諾酮類快速檢測試劑盒

            組織芯片/微陣列定制技術服務

             

            染色質免疫沉淀分析(CLIP)實驗服務

             

            多因子液相芯片技術(Luminex)實驗

            免疫細胞化學ICC實驗服務

            ATP/ADP檢測實驗服務

            蛋白雙向(2-D)電泳實驗服務

            蛋白相互作用分析

            堿性磷酸酶染色實驗服務

            PKC活性檢測實驗

            非標定量實驗

            (Label-free)

             

            DIGE技術實驗服務

            端粒酶活性檢測實驗

            細胞生長曲線的測定

            掃描電鏡服務

            NF-KB p65活性檢測實驗

             

            慢病毒包裝實驗服務

             

            實驗室代做實驗項目

            主營:實驗室代做實驗項目$r$n1.實驗代做$r$n2.生化試劑、標準

            免疫組化技術服務

            公司主營:免疫組化技術服務$r$n1實驗代做$r$n2生化試劑、標準品

            實時熒光定量PCR(RealTime PCR)技術服務

            主營:實時熒光定量PCR(RealTime PCR)技術服務$r$n1

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