游離甲狀腺素ELISA試劑盒，大鼠FT4試劑盒說明書

檢測原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被游離甲狀腺素（FT4）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的游離甲狀腺素（FT4）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

樣品收集、處理及保存方法

1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。

3. 細胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。

5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

自備物品

1. 酶標(biāo)儀（450nm）

2. 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒溫箱

操作注意事項

1. 試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶，這屬于正?，F(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用。

2. 實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。

3. 嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時間、加液量及順序進行溫育操作。

4. 所有液體組分使用前充分搖勻。

試劑盒組成

名稱96孔配置48孔配置備注

微孔酶標(biāo)板12 孔×8 條12 孔×4 條無

標(biāo)準(zhǔn)品（24pmol/L） 0.5mL 0.5mL 無

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液6mL 3mL 無

樣本稀釋液6mL 3mL 無

檢測抗體-HRP 10mL 5mL 無

20×洗滌緩沖液25mL 15mL 按說明書進行稀釋

底物A 6mL 3mL 無

底物B 6mL 3mL 無

終止液6mL 3mL 無

封板膜2 張2 張無

說明書1 份1 份無

自封袋1 個1 個無

注：標(biāo)準(zhǔn)品用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液倍比稀釋為24、12、6、3、1.5、0.75 pmol/L

試劑的準(zhǔn)備

20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20 稀釋，即1 份的20×洗滌緩

沖液加19 份的蒸餾水。

洗板方法

1. 手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min 后甩盡孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5 次。

2. 自動洗板機：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5 次。

操作步驟

1. 從室溫平衡20min 后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔。標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；待測樣本孔先加樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；空白孔不加。

3. 除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

4. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5 次（也可用洗板機洗板）。

5. 每孔加入底物A、B 各50μL，37℃避光孵育15min。

6. 每孔加入終止液50μL，15min 內(nèi)，在450nm 波長處測定各孔的

OD 值。結(jié)果判斷

繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：在Excel 工作表中，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo)，對應(yīng)

OD 值作縱坐標(biāo)，繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣

本濃度值。

試劑盒性能

1. 準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R 值，大于等于

0.9900。

2. 靈敏度：zui低檢測濃度小于0.1 pmol/L。

3. 特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

4. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

5. 貯藏：2-8℃，避光防潮保存。

6. 有效期：6 個月

免責(zé)聲明

1. 試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或人體實驗，否則所

產(chǎn)生的一切后果，由實驗者承擔(dān)，本公司概不負責(zé)。

2. 嚴(yán)格按照說明書操作，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者

承擔(dān)。

與  游離甲狀腺素ELISA試劑盒，大鼠FT4試劑盒說明書 相關(guān)產(chǎn)品;

試劑盒 96T 定量 采用純進口原料和工藝流程  保證質(zhì)量 優(yōu)惠供應(yīng)

大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸（FT3）ELISA試劑盒 又名：大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸ELISA試劑盒；大鼠FT3 ELISA試劑盒 96T 定量 采用純進口原料和工藝流程  保證質(zhì)量 優(yōu)惠供應(yīng)

大鼠血小板生成素（TPO）ELISA試劑盒 又名：大鼠血小板生成素ELISA試劑盒；大鼠TPO ELISA試劑盒 96T 定量 采用純進口原料和工藝流程  保證質(zhì)量 優(yōu)惠供應(yīng)

大鼠甘油三酯（TG）ELISA試劑盒 又名：大鼠甘油三酯ELISA試劑盒；大鼠TG ELISA試劑盒 96T 定量 采用純進口原料和工藝流程  保證質(zhì)量 優(yōu)惠供應(yīng)

大鼠轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白（TTR）ELISA試劑盒 又名：大鼠大鼠轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白ELISA試劑盒；大鼠轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白 96T 定量 采用純進口原料和工藝流程  保證質(zhì)量 優(yōu)惠供應(yīng)

大鼠乳酸脫氫酶（LDH）ELISA試劑盒 又名：大鼠乳酸脫氫酶ELISA試劑盒；大鼠LDH ELISA試劑盒 96T 定量 采用純進口原料和工藝流程  保證質(zhì)量 優(yōu)惠供應(yīng)

大鼠活性氧簇（ROS）ELISA試劑盒  又名：大鼠活性氧簇ELISA試劑盒；大鼠ROS ELISA試劑盒   96T 定量 采用純進口原料和工藝流程  保證質(zhì)量 優(yōu)惠供應(yīng)