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            北京諾博萊德科技有限公司

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            北京諾博萊德科技有限公司>>NobleRyder>> CLO01-20KUNobleRyder DNA連接酶
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            CLO01-20KUNobleRyder DNA連接酶

            • 公司名稱:
            • 更新時間:
            • 所 在 地:
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            • 瀏覽次數:
            • 北京諾博萊德科技有限公司
            • 2024-11-21 08:46:00
            • 北京市
            • 592

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            【簡單介紹】

            品牌 其他品牌 貨號 CLO01-20KU / CLO01-80KU
            規(guī)格 20KU/80KU 供貨周期 一周
            應用領域 化工,生物產業(yè)
            NobleRyder DNA連接酶
            NobleRyder CLO01-20KU DNA連接酶 T4 DNA ligase(Rapid) 20KU
            NobleRyder CLO01-80KU DNA連接酶 T4 DNA ligase(Rapid) 80KU

            【詳細說明】

            NobleRyder  CLO01-20KU  DNA連接酶  T4 DNA ligaseRapid  20KU

             

            產品品牌:NobleRyder

            產品貨號:CLO01-20KU

            產品名稱:DNA連接酶

            英文名稱:T4 DNA ligaseRapid

            產品規(guī)格:20KU

             NobleRyder  DNA連接酶

            產品內容:

            組分

            CLO01-20KU

            CLO01-80KU

            T4   DNA Ligase (400U/μL)

            50   μL

            200   μL

            10   x T4 DNA Ligase Buffer

            100   μL

            0.5   mL

            5   x Rapid Ligase Buffer

            200   μL

            1   mL

             

            產品簡介

            T4 DNA Ligase是從表達T4 DNA連接酶基因的大腸桿菌中純化而來,可催化雙鏈DNARNA上的5'-磷酸末端和3'-羥基末端形成磷酸二酯鍵。該酶不僅能夠催化粘性末端或平末端之間的連接,還可以修復雙鏈DNA、RNADNA/RNA 雜交雙鏈中的單鏈切口。

             

            活性定義

            20μL的連接反應體系中,6μg的λDNA-HindⅢ分解物在16℃下反應30 min時,催化50%以上的DNA片段發(fā)生連接所需要的酶量定義為1個活性單位(U)

             

            注意事項

            1. 請于使用前確保產品wan全解凍,che底混勻后短暫離心,置于冰上備用。

            2. T4 DNA Ligase 不穩(wěn)定,使用時冰上操作,用完立即放回-20℃。

            3. 反復凍融會影響產品的性能。

            4. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

             

            實驗方法

            1.DNA片段與載體連接(粘性末端連接)

            ①冰上配制連接反應體系:

            試劑

            體積

            線性化載體DNA

            20~100   ng

            插入片段DNA

            3:1~10:1(片段:載體摩爾比)

            10   x T4 DNA Ligase Buffer

            1   μL

            T4   DNA Ligase (400U/μL)

            1   μL

            DNase-Free   Water

            Up   to 10 μL

            ②反應條件:

            25 ℃反應10 min

            2.DNA片段與載體連接(平末端連接)

            ①冰上配制連接反應體系:

            試劑

            體積

            線性化載體DNA

            20~100   ng

            插入片段DNA

            1:1~5:1(片段:載體摩爾比)

            5   x Rapid Ligase Buffer

            2   μL

            T4   DNA Ligase (400U/μL)

            2   μL

            DNase-Free   Water

            Up   to 10 μL

            * 平末端載體與片段進行連接時,應首先將載體進行去磷酸化處理,防止其自身環(huán)化。

            ②反應條件:

            25 ℃反應1 h16 ℃過夜。

            3. DNA 文庫構建中接頭連接反應

            ①冰上配制連接反應體系:T4 DNA Ligase (400U/μL)

            試劑

            體積

            dA-tailed   DNA

            10   μL

            DNA   Adapter

            1:10~1:20dA-tailed   DNA : DNA       Adapter 摩爾比)

            5   x Rapid Ligase Buffer

            4   μL

            T4   DNA Ligase(400U/μl)

            2   μL

            DNase-Free   Water

            Up   to 20 μL

            ②反應條件:

            25 ℃反應10 min。

            如需失活T4 DNA Ligase 65℃反應10 min 或者 70℃反應 5 min。

             

            產品訂購信息:

            NobleRyder  CLO01-20KU  DNA連接酶  T4 DNA ligaseRapid  20KU

            NobleRyder  CLO01-80KU  DNA連接酶  T4 DNA ligaseRapid  80KU

             NobleRyder  DNA連接酶


                
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